ceai verde cancer prostata-studiu clinic

Polifenolii din ceai scad nivelul seric al antigenului specific prostatei, al factorului de creștere a hepatocitelor și a factorului de creștere endotelială vasculară la pacienții cu cancer de prostată și inhibă producția factorului de creștere a hepatocitelor și a factorului de creștere endotelial vascular in vitro

Jerry McLarty , Rebecca LH Bigelow , Mylinh Smith , Don Elmajian , Murali Ankem și James A. CardelliDOI: 10.1158 / 1940-6207.CAPR-08-0167  Publicat în iulie 2009

Abstract

Scopul acestui studiu a fost de a determina efectele suplimentării pe termen scurt cu compușii activi din ceaiul verde asupra biomarkerilor serici la pacienții cu cancer de prostată.

26 bărbați cu biopsii pozitive de prostată și programate pentru prostatectomie radicală au primit doze zilnice de polifenon E, care conținea 800 mg de (-) – epigalocatechin-3-galat (EGCG) și cantități mai mici de (-) – epicatechină, (- ) -epigallocatechin și (-) – epicatechin-3-gallat (în total 1,3 g de polifenoli de ceai), până la momentul prostatectomiei radicale. Serul a fost colectat înainte de inițierea studiului medicamentos și în ziua prostatectomiei. Biomarcatorii serici Factorul de creștere a hepatocitelor (HGF), factorul de creștere endotelial vascular (VEGF), factorul de creștere asemănător insulinei (IGF) -I, proteina de legare a IGF-3 (IGFBP-3) și antigenul specific prostatei (PSA) au fost analizați prin ELISA. Toxicitatea a fost monitorizată în principal prin intermediul enzimelor funcției hepatice. Modificările componentelor serice au fost analizate statistic folosind testul de rang semnat Wilcoxon.Fibroblastele asociate cancerului au fost tratate cu EGCG și s-au măsurat nivelurile de proteine ​​HGF și VEGF și ARNm.

Raportul HGF, VEGF, PSA, IGF-I, IGFBP-3 și raportul IGF-I / IGFBP-3 au scăzut semnificativ în timpul studiului. De asemenea, toate testele funcției hepatice au scăzut, cinci dintre ele în mod semnificativ: proteine ​​totale, albumină, aspartat aminotransferază, fosfatază alcalină și amilază. Scăderea HGF și VEGF a fost confirmată in vitro la fibroblastele asociate cancerului de prostată .

Rezultatele noastre arată o reducere semnificativă a nivelurilor serice de PSA, HGF și VEGF la bărbații cu cancer de prostată după un scurt tratament cu EGCG (Polifenon E), fără creșterea enzimelor hepatice. Aceste descoperiri susțin un rol potențial pentru Polifenon E în tratamentul sau prevenirea cancerului de prostată.

Potrivit Societății Americane a Cancerului, cancerul de prostată este cea mai diagnosticată afecțiune malignă la bărbați și a doua cauză principală de mortalitate prin cancer la bărbații din Statele Unite, 27.000 murind în fiecare an. Ratele de recurență pentru boala în stadiu incipient sunt relativ ridicate, iar ratele de mortalitate pentru boala în stadiu târziu nu s-au îmbunătățit semnificativ în ultimii 10 ani ( 1 ). Din ce în ce mai mulți cercetători și-au concentrat eforturile pe utilizarea potențială a produselor naturale și au reevaluat datele epidemiologice anterioare și au inițiat cercetări de laborator pentru a determina eficacitatea lor potențială ca terapie împotriva cancerului. S-a considerat că polifenolii de ceai verde prezintă potențial în acest domeniu ( 2). Un studiu promițător realizat recent în Italia a arătat că consumul de polifenoli de ceai verde a întârziat semnificativ progresia neoplaziei intraepiteliale de prostată de înaltă calitate către cancerul de prostată ( 3 ). S-a constatat că această tendință continuă până în al doilea an, în ciuda lipsei de consum de polifenoli de ceai verde ( 4 ).

Polifenolul bioactiv major prezent în ceaiul verde este (-) – epigalocatechin-3-galat (EGCG). Catechinele suplimentare găsite în ceaiul verde includ (-) – epicatechin (EC), (-) – epigallocatechin (EGC) și (-) – epicatechin-3-gallat (ECG). Studiile epidemiologice au relevat o reducere a incidenței cancerului de colon la persoanele care au consumat ceai ( 5 ), o corelație inversă între polifenoli de ceai urinar și cancer gastric ( 6 ) și un prognostic îmbunătățit al pacienților cu cancer de sân în stadiile I și II la acei pacienți care au băut cinci sau mai multe căni de ceai verde ( 7 ). Mai recent, o meta-analiză a sugerat un efect modest asupra riscului de cancer pulmonar ( 8 ). De asemenea, s-a demonstrat că consumul de ceai este asociat cu un risc mai scăzut de cancer de prostată ( 910 ). În plus, s-a sugerat că riscul mai scăzut al cancerului de prostată la bărbații asiatici poate fi asociat cu consumul lor de ceai verde ( 11 ). Cu toate acestea, datele epidemiologice sunt încă neconcludente, unele studii arată beneficii posibile, iar altele nu au găsit niciun efect asupra raportului de risc pentru cancer ( 9 , 12 ).

Am arătat anterior că EGCG și ECG pot inhiba calea de semnalizare HGF / c-Met atât în celulele carcinomului mamar ( 13 ), cât și în cel al prostatei. 6 Calea HGF / c-Met este dereglată în numeroase tipuri de afecțiuni maligne, inclusiv cancer de sân, prostată și gastric ( 14 ). În cancerul de prostată, receptorul transmembranar c-Met este adesea supraexprimat în tumorile primare și metastaze. Nivelurile ridicate de c-Met sunt direct corelate cu scorul Gleason și asociate cu tumori slab diferențiate ( 15 , 16 ). În plus, nivelurile serice ridicate ale ligandului c-Met, HGF, s-au dovedit a fi asociate cu boala metastatică și scăderea supraviețuirii generale ( 17 , 18). Adesea, supraproducția de HGF apare la fibroblastele asociate cancerului localizate în stroma din jurul tumorii ( 16 , 19 ). Dereglementarea căii HGF / c-Met duce la creșterea proliferării, motilității și invaziei ( 14 ).

Mai mulți alți biomarkeri serici asociați cu prognostic slab la pacienții cu cancer de prostată includ factorul de creștere asemănător insulinei (IGF) -I, proteina de legare IGF-3 (IGFBP-3) și VEGF. Nivelurile serice ridicate de IGF-I s-au dovedit a fi direct asociate cu riscul de cancer de prostată prin efectele sale proliferative și antiapoptotice ( 20 ). IGFBP-3 funcționează în mod normal pentru a inhiba semnalizarea IGF-I și mai multe studii epidemiologice au descoperit o asociere inversă între IGFBP-3 și riscul de cancer de prostată, deși există unele controverse în ceea ce privește IGFBP-3 și corelativele de risc ( 20 , 21 ). Prin urmare, sa sugerat că raportul IGF-I / IGFBP-3 este un potențial biomarker al cancerului de prostată ( 21).). VEGF joacă un rol important în angiogeneză, un proces necesar pentru creșterea tumorii și metastaze ( 22 ). Densitatea creșterii vaselor noi este asociată cu cancerul de prostată clinic agresiv și progresia bolii ( 23 ). S-a raportat că nivelurile mai ridicate de VEGF sunt prezente în ser și în plasma bărbaților cu cancer de prostată în comparație cu controalele sănătoase, iar nivelurile crescute de VEGF sunt asociate cu boli metastatice și progresie biochimică ( 24 , 25 ). O meta-analiză recentă a arătat că nivelurile de VEGF în ser sau plasmă sunt de ± 2,18 și 1,85 ori mai mari (media ponderată a tuturor studiilor de cancer analizate), respectiv, la pacienții cu cancer de prostată comparativ cu controalele sănătoase ( 26). În cele din urmă, nivelurile de HGF și VEGF au fost găsite în unele studii pentru a crește devreme în timpul tumorigenezei ( 27 – 31 ), sugerând că utilizarea compușilor naturali care pot bloca axa de semnalizare HGF / c-Met, VEGF și / sau IGF-I pot prezenta promisiuni atât ca agenți chimiopreventivi, cât și ca agenți anticanceroși care încetinesc progresia tumorilor stabilite.

Având în vedere rezultatele noastre in vitro care arată că EGCG inhibă semnalizarea c-Met stimulată de HGF și efectele din aval în celulele cancerului de sân și de prostată, am inițiat un studiu clinic de fază II la pacienții cu carcinom de prostată pentru a determina dacă administrarea orală de polifenon E (conținând EGCG și, la cantități mai mici, ECG, EGC și EC) ar putea scădea nivelurile biomarkerilor, inclusiv HGF, antigenul specific prostatei (PSA), VEGF și IGF-I, în serul și țesutul pacientului. Rezultatele pentru porțiunea serică a studiului nostru sunt raportate aici.

Materiale și metode

Studiați medicamentele

Polifenon E, 200 mg EGCG per capsulă, este un agent de investigație fabricat și furnizat inițial de Mitsui-Norin Co., Ltd. și acum de Polyphenon E. International, Inc. % până la 98% din totalul catechinelor în greutate; componenta principală este EGCG, care cuprinde 50% până la 75% din material. Alte catechine sunt prezente la niveluri de 12% sau mai mici, incluzând EC, EGC, ECG și gallocatechin gallate. Polifenonul E conține, de asemenea, cofeină (<2% într-un lot măsurat) și cantități mici de produse neidentificate. Siguranța polifenonului E a fost stabilită anterior într-un studiu de fază I ( 32). Pacienții au fost rugați să ia patru capsule cu o masă (în total 1,3 g de polifenon E) pentru un total de 800 mg EGCG zilnic. Timpul de administrare a medicamentului a variat între pacienți, în funcție de programele lor chirurgicale, dar s-a anticipat o medie de 6 săptămâni.

Participanți

Au fost recrutați pentru studiu bărbați cu vârste cuprinse între 18 și 75 de ani, cu un diagnostic recent de cancer de prostată în stadiul I, II sau III, care erau programați pentru prostatectomie radicală. Criteriile de excludere au inclus o afecțiune malignă cunoscută la orice alt loc decât prostata; participarea la un alt studiu de cercetare în ultimii 3 luni; după ce ați consumat cinci sau mai multe căni de ceai verde în decurs de 1 săptămână înainte de biopsie; sau având oricare dintre enzimele hepatice alanină aminotransferază, aspartat aminotransferază, fosfatază alcalină, albumină sau bilirubină totală mai mare decât limita superioară a normalului (LSN).

Design de studiu

Proiectul studiului a fost un studiu clinic deschis, cu un singur braț, în două etape, fază II, pentru a evalua efectele polifenonului E administrat în intervalul dintre biopsia prostatei și prostatectomia radicală. Siguranța a fost monitorizată de chimia serică; interviurile pentru toxicitate au fost efectuate prin contact telefonic în săptămâna 3, un panou hepatic și un interviu de toxicitate în persoană la momentul prostatectomiei. Pe parcursul studiului, Food and Drug Administration a adăugat cerința ca un grup hepatic, inclusiv amilază și lipază, să se facă după 4 săptămâni în studiu și la fiecare 4 săptămâni după aceea. Pentru toxicitatea de gradul 1, creșterea alaninei aminotransferazei (> ULN – 2,5 × ULN), medicamentul studiat trebuia reținut până la recuperarea la normal. Pentru gradul 2 (2,5 × ULN – 5,0 × ULN), gradul 3 (5,0 × ULN – 20,0 × ULN) sau gradul 4 (> 20.0 × ULN) creșterea alaninei aminotransferazei, medicamentul de studiu urma să fie întrerupt și s-au obținut panouri hepatice repetate săptămânal până când enzimele s-au normalizat. Vărsăturile medicamentului studiat în 2 zile consecutive au fost cauza retragerii. Obiectivul principal al studiului a fost determinarea efectelor polifenonului E asupra markerilor tisulari (de exemplu, expresia c-Met a celulei tumorale și nivelurile de fosforilare). Punctele finale secundare, axate în acest articol, au inclus efectele asupra biomarkerilor serici VEGF, IGF-I, IGFBP-3 și PSA. Aderența la protocol a fost măsurată prin jurnale de medicamente și numărarea pilulelor. Conformitatea a fost definită ca luând 75% sau mai mult din medicamentele zilnice. Numărul de subiecți a fost planificat să fie între 14 și 25. Prima fază a constat într-o analiză preliminară programată făcută după ce 14 subiecți evaluabili au finalizat protocolul.Au fost evidente mai multe răspunsuri pozitive la tratament, astfel încât a fost inițiată a doua etapă, cu adăugarea a încă 11 subiecți pentru un total de cel puțin 25 de subiecți evaluabili. Acest proiect a fost de așteptat să producă 95% probabilitate de a detecta cel puțin un răspuns pozitiv, dacă probabilitatea unui răspuns pozitiv a fost ≥20% (27 ). Un răspuns pozitiv a fost definit ca o schimbare ≥50% a biomarkerilor tisulari. Analiza intermediară planificată a constatat prin măsurarea imunohistochimică că nivelurile de țesut p-Met și p-AKT au fost <50% din nivelurile din controalele potrivite. Datele despre țesuturi vor fi prezentate într-un alt articol ( 33 ).

Testele biomarkerului

Probele de sânge venos au fost colectate înainte de studiu și înainte de intervenția chirurgicală în vacutainere din plastic și păstrate pe gheață până la procesare. Probele au fost rotite la 2.000 rpm la 4 ° C timp de 15 minute într-o centrifugă cu cupă oscilantă și stratul seric a fost îndepărtat prin intermediul pipetelor de transfer din plastic în tuburi de microcentrifugă. Serul a fost depozitat imediat la -80 ° C și ținut congelat până la analiză. Există dezbateri cu privire la analiza cea mai precisă a nivelurilor de VEGF, ser versus plasmă, deoarece s-a demonstrat că VEGF este eliberat din trombocite la prepararea serului ( 26 ). Serul a fost ales în acest studiu din mai multe motive, inclusiv observația că trombocitele pot fi implicate în metastaze tumorale și reflectă biologia cancerului și, prin urmare, VEGF derivat din trombocite poate reflecta biologia cancerului ( 34). În plus, în acest studiu, fiecare pacient a servit drept propriul control și nu au fost făcute comparații între grupurile de tratament. Testele de chimie clinică de rutină și panoul hepatic au fost efectuate în laboratorul clinic al Centrului de Științe ale Sănătății al Universității de Stat din Louisiana (LSUHSC), iar testele pentru PSA, IGF-I și IGFBP-3 au fost făcute de un laborator comercial (DSL Laboratories, Webster, TX ) folosind testul imunoradiometric extrem de sensibil. Probele de ser fără legătură au fost utilizate ca martori și coeficienții de variație pentru toate testele au fost <7,0% în fiecare test și <12,0% între fiecare test. Toate metodele și controalele de control al calității au fost în conformitate cu specificațiile pentru fiecare test. Toate probele de pretratare și post-tratament au fost efectuate în aceeași analiză de lot și toate probele au fost orbite. Testele ELISA (R &D Systems) pentru a detecta HGF și VEGF au fost făcute într-un mod orbit în laboratorul investigatorului. Au fost efectuate și mediate alicote duplicate ale fiecărei probe, iar concentrațiile au fost determinate pe baza curbelor standard. Probele de pretratare și post-tratament de la aceiași pacienți au fost analizate în același lot pentru ELISA. Coeficientul de variație intra-test pentru HGF și VEGF a fost <7,0%, iar coeficientul de variație între test pentru HGF și VEGF a fost <9,0%.0%, iar coeficientul de variație între teste pentru HGF și VEGF a fost <9,0%.0%, iar coeficientul de variație între teste pentru HGF și VEGF a fost <9,0%.

Analiza Western blot și ELISA in vitro

Linia celulară primară de fibroblast prostatic HPS-19B a fost furnizată cu amabilitate de laboratorul David Rowley și menținută în DMEM (Cellgro), 5% Nu-Ser (BD Biosciences), 5% ser fetal bovin (Cellgro), 5 μg / ml insulină ( Sigma), 0,5 μg / ml testosteron (Sigma) și penicilină / streptomicină (Cellgro). Celulele WPMY-1, o linie celulară stromală imortalizată SV-T mare, au fost obținute din colecția American Type Culture și menținute în DMEM (Cellgro), 5% ser fetal bovin și penicilină / streptomicină. Celulele HPS-19B și WPMY-1 au fost tratate în mediu fără ser timp de 48 sau respectiv 24 ore, cu sau fără 5 sau 10 μmol / L EGCG. Mediul condiționat și lizatele proteice au fost recoltate prin adăugarea a 125 μL de tampon eșantion Laemmli (125 mmol / L Tris, 4% SDS, 0,01% albastru de bromofenol, 30% zaharoză, 5% β-mercaptoetanol) la celule.Zece microlitri de lizați au fost trecuți pe un gel de acrilamidă 10%, transferați pe poliviniliden difluorură, blocați și testați cu anticorpi la proteinele enumerate mai jos. Anticorpii utilizați includ kinaza reglementată de semnal fosfo-extracelular (ERK), traductor de semnal fosfo și activator al transcripției 3 (STAT3), fosfo-c-jun NH2- kinază terminală (tehnologie de semnalizare celulară), ERK total (biotehnologie Santa Cruz) și tubulină (Lab Vision). ELISA s-au făcut cu probe nediluate conform protocolului recomandat de producător.

Transcriere inversă-analiză PCR

ARN-ul a fost izolat din celule WPMY-1 tratate în mediu fără ser peste noapte cu 5 și 10 μmol / L EGCG cu kitul de izolare 5 ARN Prime (5 PRIME, Inc.) conform protocolului recomandat de producător. Transcrierea inversă a fost făcută folosind kitul Superscript RT de la Invitrogen. Pe scurt, 2 μg de ARN au fost transcrise invers folosind primerii oligo dT. ARN-ul rămas a fost îndepărtat prin adăugarea de RNază H. Transcrierea inversă în timp real-PCR (RT-PCR) a fost realizată pe iCycler Bio-Rad, folosind primeri proprietari specifici genei cumpărate de la Qiagen cu SYBR Green. Toate rezultatele au fost normalizate la gliceraldehidă-3-fosfat dehidrogenază. Experimentul a fost făcut de trei ori și reacția RT-PCR a fost făcută în duplicat. Analiza statistică a fost făcută prin testul t Student .

Testul luciferazei

Luciferază construct 181-HGF a fost realizat prin amplificarea regiunii promotor al HGF genei, folosind primerul de înainte 5′-TAGAGCTCTGTTTGGTGCTGTTGAAGG-3 ‘și primerul invers 5′-ATAAGCTTGCCTGGGTGAAAGAATCCTG-3’ și subclonat în Sac 1- Hinsite-ul dIII al vectorului pGL3-Enhancer (Promega). Testul luciferazei a fost realizat prin transfectarea a 2 μg de 181-HGF și 0,1 μg de luciferază Renilla pe godeu al unei plăci cu 24 de godeuri în celule WPMY-1 confluente 75% cu ExGen 500 (Fermentas, Inc.) conform protocolului recomandat de producător. Mediul proaspăt a fost adăugat 8 ore mai târziu. A doua zi, celulele au fost tratate cu sau fără 5 sau 10 μmol / L EGCG în mediu fără ser timp de 6 sau 24 de ore. Lizatele au fost recoltate și citite pe un luminometru cu setul de testare a reporterului Dual-luciferază (Promega) conform protocolului recomandat de producător.

Considerații etice și de reglementare

Cercetarea a fost aprobată de Comitetul de revizuire instituțională al LSUHSC și au fost respectate toate liniile directoare privind portabilitatea și responsabilitatea asigurărilor de sănătate. Un medicament nou de investigație aprobat a fost obținut înainte de inițierea studiului. Toți subiecții au semnat documente de consimțământ informat.

metode statistice

Datorită distribuției non-gaussiene a datelor și a dimensiunii eșantionului relativ mici, au fost utilizate metode statistice neparametrice. Valorile înainte și după fiecare punct final au fost comparate folosind testul de rang semnat Wilcoxon; Coeficienții de corelație nonparametrici ai lui Spearman au fost folosiți pentru a compara gradele de schimbare dintre punctele finale. Regresia liniară multivariată a fost făcută pentru a testa efectul vârstei, al timpului asupra medicamentului și al rasei asupra gradului de schimbare în punctele finale. Testele univariate au inclus testul Mann-Whitney pentru diferențele rasiale în măsurile de pretratare și gradul de schimbare. Analiza a fost făcută folosind SPSS 16.0 pentru Windows (SPSS, Inc.).

Rezultate

Administrarea polifenonului E scade nivelurile serice de HGF, VEGF, IGF-BP3, IGF-I și PSA la bărbații cu cancer de prostată

Studiul clinic de fază II pentru evaluarea efectelor polifenonului E asupra nivelului seric al biomarkerilor de cancer a înscris 33 de bărbați. Cu toate acestea, două au fost ulterior descoperite a fi neeligibile; unul s-a retras devreme; unul a refuzat să ia oricare dintre medicamentele studiului; doi nu au mers la operație din motive medicale; și niciun ser pre-chirurgical nu era disponibil pentru un singur om. Dintre cei 26 de participanți, vârstele au variat între 41 și 68 de ani, cu o medie de 58,5 ani; 62% dintre pacienții înrolați erau afro-americani. Durata studiului a variat între 12 și 214 de zile, cu o medie de 34,5 zile. Patru pacienți au participat la studiu între 56 și 73 de zile; un caz neobișnuit a fost la tratament 214 zile. Nouă pacienți au fost în studiu între 33 și 53 de zile, iar 12 au fost în studiu între 12 și 32 de zile. Nu s-au observat diferențe evidente în mărimea răspunsului în funcție de timp la medicament. In orice caz,a existat o tendință în care procentul de pacienți cu PSA în scădere a crescut cu mai mult timp pe droguri; 85% dintre pacienții care au depășit timpul mediu pentru administrarea medicamentului au avut niveluri de PSA în scădere, comparativ cu 64% pentru cei sub timpul mediu pentru administrarea medicamentului. Cu toate acestea, din cauza dimensiunii reduse a eșantionului, această tendință nu a fost semnificativă (P = 0,35). Pacientul care a fost în studiu timp de 214 de zile a avut numeroase întârzieri în data de prostatectomie, iar medicul său a ales să-l mențină în studiu, deoarece nu au fost observate efecte adverse. Doar un pacient a raportat greață ușoară de la administrarea medicamentului studiat, înainte de a fi instruit să ia medicamentul cu o masă, mai degrabă decât înainte de masă.

Analiza de laborator a markerilor serici, HGF, VEGF, PSA, IGF-I și IGFBP-3, a fost făcută așa cum este descris în Materiale și metode, iar modificările biomarkerilor serici sunt prezentate în Tabelul 1 . O scădere semnificativă a fost observată în nivelurile serice de HGF, VEGF, PSA, IGF-I și IGFBP-3 (toate P <0,03, testul de rang semnat Wilcoxon). Raportul IGF-I / IGFBP-3 s-a schimbat, de asemenea, semnificativ. figura 1prezintă aceste modificări pentru HGF, VEGF, PSA și raportul IGF-I / IGFBP-3 pe tot spectrul pacienților. Zece din 25 de pacienți au avut o scădere de ≥25% a nivelurilor lor de HGF, în timp ce 6 din 25 de pacienți au avut o scădere de ≥25% a nivelurilor lor de VEGF. Vârsta, rasa și timpul de administrare a medicamentului nu au avut un efect semnificativ asupra modificărilor biomarkerilor serici. În general, pacienții care s-au schimbat într-un marker s-au schimbat și în unul sau mai mulți alți markeri în aceeași direcție. De exemplu, din 18 pacienți ale căror niveluri de PSA au scăzut, 14 dintre ei au prezentat, de asemenea, o scădere a HGF, 12 în VEGF, 12 în IGF-I și 17 în IGFBP-3. Cu toate acestea, deși acest lucru sugerează o tendință, corelația în magnitudinea modificării nu a fost semnificativă, cel mai probabil datorită numărului mic de pacienți înscriși la acest studiu. În plus, 10 din 26 de pacienți au avut o scădere ≥10% atât a VEGF, cât și a HGF (Spearman’sρ coeficient de corelație = 0,711, P <0,001 cu două cozi).

Tabelul 1.

Nivelurile de markeri serici înainte și după tratamentul cu Polifenon E.

Fig. 1.

Fig. 1.

Polifenonul E scade nivelul HGF, VEGF, PSA și raportul IGF-I / IGFBP-3 la bărbații cu cancer de prostată. Bărbații s-au autoadministrat 800 mg EGCG zilnic pe o perioadă mediană de 34,5 zile. Serul a fost luat înainte de tratament și după tratament și analizat pentru nivelurile serice de HGF și VEGF prin ELISA sau pentru PSA seric, IGF-I și IGFBP-3 de către un laborator comercial. Modificarea procentuală a fost determinată prin compararea nivelurilor post-tratament cu nivelurile de pretratare. Datele au fost sortate numeric și modificarea procentuală a fost reprezentată grafic. Fiecare coloană reprezintă un pacient individual.

Polifenonul E nu prezintă efecte adverse asupra funcției hepatice

Studiile de caz izolate au sugerat că dozele mari de EGCG pot avea efecte adverse asupra funcției hepatice. Prin urmare, am evaluat efectele potențiale asupra funcției enzimatice hepatice prin analiza proteinelor totale, albuminei, bilirubinei, bilirubinei conjugate, alaninei aminotransferazei, aspartatului aminotransferazei, fosfatazei alcaline, γ-glutamil transpeptidazei, amilazei și lipazei. Modificările enzimelor hepatice sunt prezentate în Tabelul 2 . În mod interesant, toate enzimele, dar bilirubina conjugată au scăzut în timpul studiului, cinci dintre ele semnificativ: proteine ​​totale, albumină, aspartat aminotransferază, fosfatază alcalină și amilază ( P<0,05, Wilcoxon a semnat testul de rang). Toate valorile au fost în limite normale pe tot parcursul studiului. Cu excepția proteinelor și albuminei totale, toate modificările au avut loc într-o direcție favorabilă, sugerând că în studiul nostru, administrarea polifenonului E nu are efecte adverse asupra funcției hepatice. În plus, nu am observat modificări semnificative ale indicelui de masă corporală ( P = 0,80).

tabel 2.

Testele funcției hepatice înainte și după tratamentul cu Polifenon E.

EGCG inhibă producția de HGF și VEGF în fibroblastele asociate cancerului de prostată

Nivelurile ridicate de HGF sunt asociate cu boala metastatica si a scazut de supravietuire in cancerul de prostata ( de 16 – 18 ani ). Rezultatele noastre sugerând că Polifenonul E ar putea scădea nivelurile de HGF la pacienții cu cancer de prostată ne-au determinat să evaluăm efectul EGCG asupra expresiei HGF in vitro . HGF este secretat în mod normal din fibroblastele stromale din jur, unde activează c-Met în celulele tumorale. Am tratat linia celulară de fibroblaste de prostată asociate cancerului primar HPS-19B și linia de fibroblaste de prostată imortalizată WPMY-1 în condiții fără ser cu 5 și 10 μmol / L EGCG timp de 48 și respectiv 24 de ore. Mediul condiționat a fost recoltat și ELISA a fost făcut. Rezultatele din Fig. 2Aarată că EGCG inhibă secreția de HGF în celulele fibroblastelor de prostată, susținând astfel rezultatele pe care le-am observat în studiul nostru de fază II. ELISA-urile intracelulare și extracelulare au fost făcute pentru a determina dacă tratamentul EGCG afectează nivelurile totale de HGF. Rezultatele arată că EGCG a scăzut atât nivelul intracelular, cât și cel extracelular al HGF încă din 6 ore, sugerând că EGCG nu afectează doar secreția (datele nu sunt prezentate).

Fig. 2.

Fig. 2.

EGCG scade nivelurile de HGF și VEGF la fibroblastele asociate cancerului. Fibroblastele asociate cancerului A, WPMY-1 și HPS-19B au fost tratate timp de 24 sau 48 de ore, respectiv, cu 5 sau 10 μmol / L EGCG. Mediul condiționat a fost recoltat și evaluat de ELISA pentru HGF secretat. Modificarea pliurilor a fost determinată în raport cu controlul. B, ARN-ul a fost izolat de control și 5 sau 10 μmol / L de fibroblaste WPMY-1 tratate cu EGCG. Analiza RT-PCR în timp real a fost făcută pentru HGF. Toate valorile au fost normalizate față de gliceraldehidă-3-fosfat dehidrogenază și modificarea ori a fost determinată în raport cu martorul. Rezultatele sunt medii a trei experimente independente. C,Testele luciferazei HGF s-au făcut prin transfectarea constructului promotorului HGF 181-bp și a Renilla-luciferazei în fibroblaste WPMY-1. A doua zi, celulele au fost tratate cu sau fără 5 sau 10 μmol / L EGCG timp de 24 de ore în mediu fără ser. Lizatele au fost citite pe un luminometru și normalizate la Renilla luciferază. Mediile condiționate D, 24 de ore din fibroblaste WPMY-1 tratate cu sau fără 5 sau 10 μmol / L EGCG au fost analizate pentru VEGF prin ELISA. Fibroblastele E, WPMY-1 au fost tratate cu sau fără 5 sau 10 μmol / L EGCG în mediu fără ser timp de 6 ore. Lizatele au fost recoltate și efectuate prin analiza Western blot pentru fosfo-p42 / 44 ERK, fosfo-STAT3 și tubulină. F,Celulele WPMY-1 au fost tratate cu sau fără 10 μmol / L EGCG sau 5 sau 10 μmol / L UO126 timp de 24 de ore în mediu fără ser. Mediul condiționat a fost evaluat pentru nivelurile secretate de HGF și VEGF de către ELISA. *, diferențe semnificative statistic în comparație cu probele martor. Toate analizele statistice au fost făcute prin testul t Student .

Analiza RT-PCR în timp real a fost făcută cu fibroblaste WPMY-1 tratate timp de 24 de ore cu și fără EGCG de 5 și 10 μmol / L în mediu fără ser. Rezultatele din trei experimente independente arată că EGCG a scăzut semnificativ nivelurile de ARNm de HGF într-o manieră dependentă de doză, sugerând că EGCG afectează fie transcripția ARN, fie degradarea ( Fig. 2B ). Pentru a determina dacă EGCG blochează transcripția HGF, testele de luciferază au fost făcute cu regiunea în amonte de 181-pb a genei HGF fuzionată cu gena luciferazei. Tratamentul cu EGCG a scăzut semnificativ activitatea luciferazei la 24 de ore cu ~ 35% ( Fig. 2C ).

S-a demonstrat că EGCG inhibă producția de VEGF în numeroase sisteme model atât in vitro, cât și in vivo ( 35 – 39 ). Se sugerează că scăderea mediată de EGCG a VEGF este la nivelul transcripției prin inhibarea STAT3 și / sau proteina activator-1 ( 35 , 36 , 38 ). De asemenea, am evaluat dacă tratamentul EGCG ar putea scădea nivelul VEGF la fibroblastele asociate prostatei. Celulele WPMY-1 au fost tratate timp de 24 de ore și mediul condiționat a fost evaluat pentru VEGF secretat prin ELISA. Similar cu HGF, EGCG a scăzut semnificativ nivelurile VEGF ( Fig. 2D ).

Puține studii au evaluat căile de semnalizare care afectează transcripția genei HGF umane. S-a demonstrat că STAT3 reglează nivelurile de HGF prin Src, iar cascada proteinei kinazei activate de mitogen a fost implicată în reglarea transcripțională a genei HGF umane ( 40 – 42 ). Pentru a evalua ce căi de semnalizare au fost vizate de EGCG, scăzând astfel nivelurile de HGF la fibroblastele umane, celulele WPMY-1 ( Fig. 2E ) și HPS-19B (datele nu sunt prezentate) au fost tratate cu și fără 5 sau 10 μmol / L EGCG timp de 6 ore , și a lizatelor proteice conduse de analiza Western blot. Figura 2E arată că EGCG nu a afectat fosforilată formele, active ale STAT3 sau c-Jun NH 2-kinaza terminală (datele nu sunt prezentate) în celulele WPMY-1. Tratamentul EGCG a inhibat fosforilarea ERK p42 / p44 ( Fig. 2E ). Pentru a confirma că ERK p42 / 44 joacă un rol în producția de HGF, fibroblastele WPMY-1 au fost tratați cu sau fără 10 μmol / L EGCG sau 5 sau 10 μmol / L din inhibitorul p42 / 44 ERK UO126 timp de 24 de ore. Analiza ELISA a mediului condiționat WPMY-1 arată că inhibarea ERK scade nivelurile secretate de HGF și VEGF, similar cu cel din tratamentul EGCG. Aceste observații sugerează că EGCG poate bloca producția de HGF prin inhibarea semnalizării ERK ( Fig. 2F ).

Discuţie

Raportăm aici că bărbații diagnosticați cu cancer de prostată care iau 1,3 g zilnic de catehine de ceai verde (800 mg EGCG) arată o reducere semnificativă a HGF seric, VEGF, IGF-I, IGFBP-3 și PSA cu o perioadă de dozare mediană de 34,5 zile. Testele funcției hepatice nu au evidențiat anomalii, sugerând că această doză de polifenoli de ceai este sigură atunci când este administrată timp de câteva luni. Datele sunt în concordanță cu un număr tot mai mare de lucrări care sugerează un efect protector al catechinelor împotriva toxicității ficatului în cultura celulară și șoareci ( 43 – 46 ). În plus, in vitroexperimentele arată că EGCG blochează producția de VEGF și HGF în cel puțin două linii de celule fibroblaste asociate cancerului de prostată. Pentru HGF, inhibarea de către EGCG pare a fi la nivelul transcripției, cel mai probabil prin inhibarea căii proteinei kinazei activate cu mitogen p42 / 44. Aceste date sugerează că polifenolii de ceai verde ar putea fi utili ca terapie adjuvantă la bărbații cu cancer de prostată prin scăderea nivelului de citokine care contribuie la progresia cancerului de prostată.

În ultimii ani, tendința în studiile de cercetare clinică a fost spre dezvoltarea punctelor finale ale biomarkerului pentru a determina eficacitatea unui nou medicament ( 47 ). Aceasta se bazează, parțial, pe faptul că punctul final acceptat tipic al supraviețuirii globale necesită studii mari și costisitoare, încetinind astfel dezvoltarea agenților terapeutici potențial utili. Modificările observate la punctul final surogat ar trebui să reflecte modificările unui parametru clinic mai relevant, cum ar fi supraviețuirea globală.

HGF prezintă o varietate de activități in vitro și în modele animale care sunt în concordanță cu capacitatea sa de a promova progresia cancerului de prostată, inclusiv stimularea motilității celulare și a invaziei, supraviețuirea crescută a celulelor tumorale și angiogeneza ( 17 , 48 , 49 ). În plus, s-a raportat că nivelurile de HGF din ser se corelează cu stadiul cancerului de prostată și, în unele tipuri de cancer, pot prezice efectiv supraviețuirea globală ( 17 , 18 , 50 ). Mai mult, nivelurile de c-Met, receptorul pentru HGF, prezic supraviețuirea globală în multe tipuri de cancer; astfel, se prevede că inhibarea axei HGF / c-Met crește speranța de viață ( 15 , 1651 ). Prin urmare, nivelurile de HGF ar putea avea valoare predictivă în ceea ce privește boala metastatică și agenți precum Polifenonul E care pot reduce nivelurile serice de HGF ar putea fi terapeutic utile pentru a încetini progresia tumorilor dependente de activitatea HGF. Deși reducerile nivelurilor serice ale HGF pe care le-am observat nu au fost robuste, este foarte posibil ca chiar și reduceri relativ mici să aibă un efect biologic mare în ceea ce privește progresia cancerului de prostată.

Se prevede că scăderea nivelului biologic al VEGF la pacienții cu cancer avansat va crește timpul lor global de supraviețuire. Prin urmare, este rezonabil să propunem că reducerea nivelului acestei citokine ar putea încetini progresia cancerului de prostată. Astfel, reducerea nivelurilor serice de VEGF la bărbații care consumă polifenon E pare promițătoare și vor fi necesare studii suplimentare pe termen lung pentru a determina dacă scăderea nivelurilor serice de VEGF și HGF se traduce într-un rezultat clinic mai favorabil.

Polifenonul E a scăzut, de asemenea, nivelurile serice de PSA, deși schimbarea a fost modestă. Acest rezultat, deși promițător, trebuie interpretat cu prudență. Modificările unui număr de parametri fiziologici pot modifica nivelurile serice ale PSA, iar multe dintre acestea nu sunt legate de progresia cancerului ( 52 ). Mai mult, nivelurile de PSA pot să nu reflecte cu precizie dimensiunea tumorii sau modificările numărului de celule canceroase.

De asemenea, am observat o reducere semnificativă a nivelurilor de IGF-I și IGFBP-3 la bărbații care iau polifenon E. Nivelurile de IGF și IGFBP-3 au fost studiate de câțiva ani și rezultatele sunt încă controversate cu privire la rolul lor în cancerul de prostată dezvoltare sau progresie ( 53 – 55 ). Un studiu recent a concluzionat că nu a existat nicio asociere între nivelurile acestor două proteine ​​și cancerul de prostată, deși interesant, autorii au remarcat faptul că nivelurile prediagnostice ale IGFBP-3 s-au corelat cu riscul de cancer de prostată, dar numai pentru bărbații negri ( 56 ).

Rezultatele noastre sunt, de asemenea, în concordanță cu procesul publicat de Bettuzzi și colegii ( 3 ). În studiul lor, bărbaților cu neoplazie intraepitelială de prostată de înaltă calitate li s-au administrat fie extracte de ceai verde, fie un placebo timp de 1 an ( 3 ). O treime dintre bărbații din grupul de control au dezvoltat cancer de prostată în cursul anului, în timp ce doar 3% dintre bărbații din grupul tratat au dezvoltat cancer. Această tendință a continuat până în al doilea an ( 4 ). În plus, deși nu a fost semnificativ diferit, tendința pentru grupul tratat a fost un nivel mai scăzut de PSA în comparație cu grupul placebo. Alți biomarkeri din ser nu au fost analizați în acest studiu. Se propune ca axa HGF / c-Met să fie deja activată la bărbații cu neoplazie intraepitelială de prostată de înaltă calitate (57 ) și, astfel, reducerea progresiei către cancer cu polifenoli de ceai verde s-ar putea datora, parțial, inhibării acestei căi de semnalizare.

Puține studii publicate au evaluat efectele catechinelor de ceai verde asupra biomarkerilor și progresiei cancerului de prostată. Un studiu din Jatoi și colab. ( 58) a folosit un program de dozare de 6 g de ceai pe zi în apă în șase doze divizate. Doar 1 din 42 de pacienți a prezentat o reducere> 50% a PSA, iar mulți dintre pacienți s-au plâns de toxicitatea ceaiului. Au ajuns la concluzia că ceaiul verde părea să aibă o valoare limitată în tratamentul cancerului de prostată independent de androgen și, la dozele utilizate, părea să aibă efecte secundare. Studiul nostru care utilizează doze mai mari a dus la câteva efecte secundare, probabil pentru că Polifenonul E este formulat pentru a avea niveluri scăzute de cofeină. În plus, niciunul dintre pacienții noștri nu a avut cancer de prostată avansat și, prin urmare, faptul că ceaiul verde la doze mai mici decât cele primite de pacienții noștri nu a avut niciun efect asupra cancerului de prostată avansat nu este surprinzător. Un al doilea studiu realizat în Canada a acumulat pacienți cu cancer de prostată independent de androgen și acești pacienți au primit 250 mg de extracte de ceai verde de două ori pe zi (59 ). Punctul final principal al studiului a fost PSA sau progresia măsurabilă a bolii. Au ajuns la concluzia că ceaiul verde a avut o activitate clinică minimă împotriva cancerului de prostată refractar la hormoni. Autorii au emis ipoteza că nivelurile serice de EGCG probabil nu depășesc 0,2 μmol / L și acesta ar putea fi unul dintre motivele pentru care polifenolii din ceai au fost ineficienți. Studiul nostru se bazează pe un studiu anterior de dozare de fază I care a arătat că concentrațiile care depășesc 1 μmol / L ar putea fi atinse prin administrarea orală de polifenon E, cu niveluri plasmatice maxime realizabile la aproximativ 4 ore după ingestie ( 60 ). Prin urmare, efectele pozitive pe care le-a avut ceaiul verde asupra biomarkerilor noștri ar putea fi legate de nivelurile serice mai ridicate de EGCG.

În ultimii 10 ani, a existat o conștientizare crescândă că stroma tumorii joacă un rol foarte important în progresia cancerului ( 61 ). Un număr de celule asociate cu stroma, inclusiv macrofage, celule endoteliale și fibroblaste, furnizează factori care facilitează proliferarea, supraviețuirea și invazia celulelor tumorale. Laboratorul Rowley a studiat importanța stromei reactive în progresia cancerului de prostată și a caracterizat fibroblastele asociate cancerului care par să joace un rol critic în interacțiunea tumoră-stromă ( 62 ). O mai bună înțelegere a funcțiilor celulelor strome în progresia cancerului poate duce la abordări terapeutice pentru a viza celulele tumorale și stromale.

HGF este în primul rând exprimat și secretat de fibroblasti stromali, deși producția autocrină poate apărea în cancerul de prostată în stadiu târziu ( 63 ). Prin urmare, o reducere a HGF seric la pacienții tratați cu polifenon E ne-a determinat să luăm în considerare efectul polifenolilor de ceai asupra fibroblastelor asociate cancerului. Rezultatele noastre arată clar că EGCG, principala catehină din polifenon E, a blocat rapid producția de HGF la concentrații relevante din punct de vedere fiziologic. Blocul pare a fi la nivelul transcripției și poate implica inactivarea căii proteinei kinazei p42 / 44 activată de mitogen. S-a dovedit că transcrierea HGF este reglementată de STAT și Src ( 40 , 41), dar EGCG nu a avut niciun efect aparent asupra acestor căi în fibroblastele pe care le-am examinat. În plus, am observat că EGCG a blocat producția de VEGF în fibroblastele asociate cancerului; această citokină joacă un rol critic în procesul angiogen. Datele noastre privind fibroblastele de prostată sunt de acord cu mai multe publicații care arată că EGCG poate reduce nivelurile de VEGF la nivelul transcripțional în cultura celulară, precum și la modelele de șoarece ( 35 – 39 ).

Aceste rezultate combinate au o semnificație potențială, deoarece arată că polifenolii de ceai verde pot viza atât c-Met în celulele tumorale, cât și producția de HGF și VEGF în fibroblastele stromale. Propunem că aceasta va fi o abordare mai puternică terapeutic decât vizarea unui singur tip de celulă. Studiile actuale care utilizează abordări imunohistochimice evaluează stroma reactivă rezecată în probe de țesut de la pacienții care au consumat polifenon E în studiul nostru.

Bettuzzi și colab. Studiul ( 3 ) sugerează că polifenolii de ceai vor fi cei mai eficienți atunci când sunt utilizați pentru a întârzia progresia displaziei către cancer sau pentru a încetini progresia tumorilor mici in situ sau în creștere la locurile metastatice. Polifenolii din ceai pot fi și mai eficienți în combinație cu alte produse naturale sau cu agenți vizați. De exemplu, un studiu clinic recent de faza II a arătat că consumul de extract de rodie a încetinit semnificativ rata de creștere a PSA la pacienții cu cancer de prostată ( 64 ). Principalul polifenol din ser după ingestia de extract de rodie este acidul elagic și am stabilit că acidul elagic este de 10 ori mai eficient decât EGCG în blocarea activării c-Met printr-un mecanism distinct. 7Ar fi interesant să analizăm eficacitatea celor două grupuri de polifenoli în studiile preclinice și clinice. Alții au stabilit recent că combinațiile anumitor polifenoli, cum ar fi EGCG cu Tarceva, un inhibitor al receptorului factorului de creștere epidermic, sunt mai eficiente în modelele de cancer preclinice decât oricare dintre agenții singuri ( 65 ). Tarceva este utilizat în prezent terapeutic pentru tratarea cancerului pulmonar și a cancerului de cap și gât, iar rezistența dobândită sau rezistența cronică la acest agent vizat a limitat succesul Tarceva. Pe baza acestor studii, am inițiat un studiu de fază I / II care examinează eficacitatea polifenonului E plus Tarceva în tratamentul pacienților cu cancer pulmonar.

În concluzie, rezultatele noastre arată o reducere semnificativă a nivelurilor serice de PSA, HGF, IGF-I, IGFBP-3 și VEGF la bărbații cu cancer de prostată după un scurt tratament cu EGCG (Polifenon E), fără creșterea enzimelor hepatice. Scăderea HGF și VEGF serice de către EGCG a fost susținută de studii in vitro care arată că EGCG blochează producția de HGF și VEGF în fibroblastele asociate cancerului. Aceste date susțin un rol potențial pentru Polifenon E în tratamentul sau prevenirea cancerului de prostată și sugerează că aceste constatări ar trebui verificate prin studii clinice mai mari, controlate cu placebo. Efectele diferitelor doze, administrarea pe termen lung și asocierea cu alte medicamente rămân de văzut.

Dezvăluirea potențialelor conflicte de interese

Nu au fost dezvăluite potențiale conflicte de interese.

Mulțumiri

Mulțumim Polyphenon Pharma, în special Stig Ogata, pentru sprijinul și furnizarea lor de Polyphenon E pentru acest proces.

Note de subsol

  • ↵ 6 Duhon și colab., Trimise spre publicare.
  • ↵ 7 Duhon și colab., În pregătire.
  • Primit la 3 septembrie 2008.
  • Revizuirea a primit 20 aprilie 2009.
  • Acceptat pe 6 mai 2009.
  • © 2009 Asociația Americană pentru Cercetarea Cancerului.

Referințe

  1.  
    1. Rubin MA
    . Terapia țintită a cancerului: noi roluri pentru patologi – cancerul de prostată . Mod Pathol 2008 ; 21 Supliment 2 : S44 – 55 . CrossRef PubMed Google Scholar
  2.  
    1. Surh YJ
    . Chimioprevenția cancerului cu fitochimicale dietetice . Nat Rev Cancer 2003 ; 3 : 768 – 80 . CrossRef PubMed Google Scholar
  3.  
    1. Bettuzzi S ,
    2. Brausi M ,
    3. Rizzi F ,
    4. Castagnetti G ,
    5. Peracchia G ,
    6. Corti A
    . Chimioprevenția cancerului de prostată uman prin administrarea orală de catehine de ceai verde la voluntarii cu neoplazie intraepitelială de prostată de înaltă calitate: un raport preliminar dintr-un studiu de un an de dovadă de principiu . Cancer Res 2006 ; 66 : 1234 – 40 . Text complet abstract / GRATUIT Google Scholar
  4.  
    1. Brausi M ,
    2. Rizzi F ,
    3. Bettuzzi S
    . Chimioprevenția cancerului de prostată uman prin catechine de ceai verde: doi ani mai târziu. O actualizare de urmărire . Eur Urol 2008 ; 54 : 472 – 3 . CrossRef PubMed Google Scholar
  5.  
    1. Sun CL ,
    2. Yuan JM ,
    3. Koh WP ,
    4. Yu MC
    . Ceaiul verde, ceaiul negru și riscul de cancer colorectal: o meta-analiză a studiilor epidemiologice . Carcinogeneză 2006 ; 27 : 1301 – 9 . Text complet abstract / GRATUIT Google Scholar
  6.  
    1. Mu LN ,
    2. Lu QY ,
    3. Yu SZ ,
    4. și colab
    . Consumul de ceai verde și indicele multigenetic privind riscul de cancer de stomac la o populație chineză . Int J Cancer 2005 ; 116 : 972 – 83 . CrossRef PubMed Google Scholar
  7.  
    1. Seely D ,
    2. Mills EJ ,
    3. Wu P ,
    4. Verma S ,
    5. Guyatt GH
    . Efectele consumului de ceai verde asupra incidenței cancerului de sân și a recurenței cancerului de sân: o revizuire sistematică și meta-analiză . Integr Cancer Ther 2005 ; 4 : 144 – 55 . Text complet abstract / GRATUIT Google Scholar
  8.  
    1. Arts IC
    . O revizuire a dovezilor epidemiologice privind ceaiul, flavonoidele și cancerul pulmonar . J Nutr 2008 ; 138 : 1561 – 6S . Google Scholar
  9.  
    1. Jian L ,
    2. Lee AH ,
    3. Binns CW
    . Ceaiul și licopenul protejează împotriva cancerului de prostată . Asia Pac J Clin Nutr 2007 ; 16 Suppl 1 : 453 – 7 . Google Scholar
  10.  
    1. Jian L ,
    2. Xie LP ,
    3. Lee AH ,
    4. Binns CW
    . Efectul protector al ceaiului verde împotriva cancerului de prostată: un studiu de caz-control în sud-estul Chinei . Int J Cancer 2004 ; 108 : 130 – 5 . CrossRef PubMed Google Scholar
  11.  
    1. Kurahashi N ,
    2. Sasazuki S ,
    3. Iwasaki M ,
    4. Inoue M ,
    5. Tsugane S
    . Consumul de ceai verde și riscul de cancer de prostată la bărbații japonezi: un studiu prospectiv . Am J Epidemiol 2008 ; 167 : 71 la – 7 . Text complet abstract / GRATUIT Google Scholar
  12.  
    1. Zhou Y ,
    2. Li N ,
    3. Zhuang W ,
    4. și colab
    . Ceaiul verde și riscul de cancer gastric: meta-analiză a studiilor epidemiologice . Asia Pac J Clin Nutr 2008 ; 17 : 159 – 65 . PubMed Google Scholar
  13.  
    1. Bigelow RL ,
    2. Cardelli JA
    . Catechinele de ceai verde, (-) – epigalocatechin-3-galat (EGCG) și (-) – Epicatechin-3-galat (ECG), inhibă semnalizarea HGF / Met în celulele epiteliale mamare imortalizate și tumorigenice . Oncogene 2006 ; 25 : 1922 – 30 . CrossRef PubMed Google Scholar
  14.  
    1. Trusolino L ,
    2. Comoglio PM
    . Receptorul factorului de dispersie și al semaforinei: semnalizarea celulară pentru creșterea invazivă . Nat Rev Cancer 2002 ; 2 : 289 – 300 . CrossRef PubMed Google Scholar
  15.  
    1. Knudsen BS ,
    2. Gmyrek GA ,
    3. Inra J ,
    4. și colab
    . Expresie ridicată a receptorului Met în metastaza cancerului de prostată la nivelul osului . Urologie 2002 ; 60 : anul 1113 – 7 . CrossRef PubMed Google Scholar
  16.  
    1. Nakashiro K ,
    2. Hayashi Y ,
    3. Oyasu R
    . Expresia imunohistochimică a factorului de creștere a hepatocitelor și a receptorului c-Met / HGF în țesutul prostatic uman benign și malign . Oncol Rep 2003 ; 10 : 1149 – 53 . PubMed Google Scholar
  17.  
    1. Naughton M ,
    2. Picus J ,
    3. Zhu X ,
    4. Catalona WJ ,
    5. Vollmer RT ,
    6. Humphrey PA
    . Factorul de dispersie – creșterea factorului de creștere a hepatocitelor în serul pacienților cu cancer de prostată . J Urol 2001 ; 165 : 1325 – 8 . CrossRef PubMed Google Scholar
  18.  
    1. Humphrey PA ,
    2. Halabi S ,
    3. Picus J ,
    4. și colab
    . Semnificația pronostică a nivelului factorului de dispersie plasmatică / factorului de creștere a hepatocitelor la pacienții cu cancer de prostată refractar la hormoni metastatici: rezultate din cancer și leucemie grupa B 150005/9480 . Clin Genitourin Cancer 2006 ; 4 : 269 – 74 . CrossRef PubMed Google Scholar
  19.  
    1. Nakashiro K ,
    2. Hara S ,
    3. Shinohara Y ,
    4. și colab
    . Comutarea fenotipică de la rolul paracrin la cel autocrin al factorului de creștere a hepatocitelor într-o linie celulară de carcinom prostatic uman independent de androgen, CWR22R . Am J Pathol 2004 ; 165 : 533 – 40 . PubMed Google Scholar
  20.  
    1. Rowlands MA ,
    2. Gunnell D ,
    3. Harris R ,
    4. Vatten LJ ,
    5. Holly JM ,
    6. Martin RM
    . Circulația peptidelor de factor de creștere asemănătoare insulinei și riscul de cancer de prostată: o revizuire sistematică și meta-analiză . Int J Cancer 2009 ; 124 : 2416 – 29 . CrossRef PubMed Google Scholar
  21.  
    1. Papatsoris AG ,
    2. Karamouzis MV ,
    3. Papavassiliou AG
    . Noi perspective despre implicația rețelei IGF-1 în cancerul de prostată . Trends Mol Med 2005 ; 11 : 52 – 5 . CrossRef PubMed Google Scholar
  22.  
    1. Kerbel RS
    . Angiogeneza tumorală . N Engl J Med 2008 ; 358 : 2039 – 49 . CrossRef PubMed Google Scholar
  23.  
    1. Concato J ,
    2. Jain D ,
    3. Li WW ,
    4. Risch HA ,
    5. Uchio EM ,
    6. Wells CK
    . Markeri moleculari și mortalitate în cancerul de prostată . BJU Int 2007 ; 100 : 1259 – 63 . CrossRef PubMed Google Scholar
  24.  
    1. Jones A ,
    2. Fujiyama C ,
    3. Turner K ,
    4. și colab
    . Factor crescut de creștere endotelială vasculară serică la pacienții cu cancer de prostată scăpat de hormoni . BJU Int 2000 ; 85 : 276 – 80 . CrossRef PubMed Google Scholar
  25.  
    1. Duque JL ,
    2. Loughlin KR ,
    3. Adam RM ,
    4. Kantoff PW ,
    5. Zurakowski D ,
    6. Freeman MR
    . Nivelurile plasmatice ale factorului de creștere endotelial vascular sunt crescute la pacienții cu cancer de prostată metastatic . Urologie 1999 ; 54 : 523 – 7 . CrossRef PubMed Google Scholar
  26.  
    1. Kut C ,
    2. MacGabhann F ,
    3. Popel AS
    . Unde este VEGF în corp? O meta-analiză a distribuției VEGF în cancer . Br J Cancer 2007 ; 97 : 978 – 85 . CrossRef PubMed Google Scholar
  27.  
    1. Wong AS ,
    2. Pelech SL ,
    3. Woo MM ,
    4. și colab
    . Coexpresia factorului de creștere a hepatocitelor-Met: un pas timpuriu în carcinogeneza ovariană? Oncogene 2001 ; 20 : 1318 – 28 . CrossRef PubMed Google Scholar
    1. Yasuda K ,
    2. Nagakawa O ,
    3. Akashi T ,
    4. și colab
    . Factorul seric de creștere a hepatocitelor active (AHGF) în bolile benigne de prostată și cancerul de prostată . Prostata 2009 ; 69 : 346 – 51 . CrossRef PubMed Google Scholar
    1. Nishimura K ,
    2. Arichi N ,
    3. Tokugawa S ,
    4. și colab
    . Factorul de creștere a hepatocitelor și interleukina-6 în combinație cu volumul de prostată sunt posibili markeri tumorali ai cancerului de prostată la pacienții cu niveluri de PSA din zona gri . Cancer de prostată Dis prostatic Dis 2008 ; 11 : 258 – 63 . CrossRef PubMed Google Scholar
    1. Chen YS ,
    2. Wang JT ,
    3. Chang YF ,
    4. și colab
    . Exprimarea factorului de creștere a hepatocitelor și a proteinei c-met este semnificativ asociată cu progresia carcinomului cu celule scuamoase orale în Taiwan . J Oral Pathol Med 2004 ; 33 : 209 – 17 . CrossRef PubMed Google Scholar
  28.  
    1. Larcher F ,
    2. Robles AI ,
    3. Duran H ,
    4. și colab
    . Reglarea în sus a factorului de creștere endotelial vascular / factorul de permeabilitate vasculară în carcinogeneza pielii șoarecelui se corelează cu starea de progresie malignă și nivelurile de expresie ale H-rasului activate . Cancer Res 1996 ; 56 : 5391 – 6 . Text complet abstract / GRATUIT Google Scholar
  29.  
    1. Chow HH ,
    2. Cai Y ,
    3. Alberts DS ,
    4. și colab
    . Faza I de studiu farmacocinetic de polifenoli ceai după administrarea unei doze unice de epigallocatechin galat și Polyphenon E . Biomarkeri de epidemiol pentru cancer Anterior 2001 ; 10 : 53 – 8 . Text complet abstract / GRATUIT Google Scholar
  30.  
    1. Gehan EA
    . Determinarea numărului de pacienți necesari într-un studiu preliminar și de urmărire a unui nou agent chimioterapeutic . J Chronic Dis 1961 ; 13 : 346 – 53 . CrossRef PubMed Google Scholar
  31.  
    1. Lee JK ,
    2. Hong YJ ,
    3. Han CJ ,
    4. Hwang DY ,
    5. Hong SI
    . Utilitatea clinică a factorului de creștere endotelial al serului și plasmei la pacienții cu cancer: care este specimenul optim? Int J Oncol 2000 ; 17 : 149 – 52 . PubMed Google Scholar
  32.  
    1. Sartippour MR ,
    2. Shao ZM ,
    3. Heber D ,
    4. și colab
    . Ceaiul verde inhibă inducerea factorului de creștere endotelial vascular (VEGF) în celulele cancerului de sân uman . J Nutr 2002 ; 132 : 2307 – 11 . Text complet abstract / GRATUIT Google Scholar
  33.  
    1. Park JS ,
    2. Kim MH ,
    3. Chang HJ ,
    4. și colab
    . Epigalocatechin-3-galatul inhibă expresia VEGF indusă de PDGF în celulele musculare netede vasculare umane prin blocarea receptorului PDGF și Erk-1/2 . Int J Oncol 2006 ; 29 : 1247 – 52 . PubMed Google Scholar
    1. Jung YD ,
    2. Kim MS ,
    3. Shin BA ,
    4. și colab
    . EGCG, o componentă majoră a ceaiului verde, inhibă creșterea tumorii prin inhibarea inducției VEGF în celulele carcinomului de colon uman . Br J Cancer 2001 ; 84 : 844 – 50 . CrossRef PubMed Google Scholar
  34.  
    1. Zhu BH ,
    2. Zhan WH ,
    3. Li ZR ,
    4. și colab
    . (-) – Epigalocatechin-3-galatul inhibă creșterea cancerului gastric prin reducerea producției de VEGF și a angiogenezei . World J Gastroenterol 2007 ; 13 : 1162 – 9 . PubMed Google Scholar
  35.  
    1. Shankar S ,
    2. Ganapathy S ,
    3. Hingorani SR ,
    4. Srivastava RK
    . EGCG inhibă creșterea, invazia, angiogeneza și metastaza cancerului pancreatic . Front Biosci 2008 ; 13 : 440 – 52 . CrossRef PubMed Google Scholar
  36.  
    1. Tomida M ,
    2. Saito T
    . Gena factorului de creștere a hepatocitelor umane (HGF) este activată transcripțional de factorul inhibitor al leucemiei prin elementul de legare Stat . Oncogene 2004 ; 23 : 679 – 86 . CrossRef PubMed Google Scholar
  37.  
    1. Wojcik EJ ,
    2. Sharifpoor S ,
    3. Miller NA ,
    4. și colab
    . O nouă funcție de activare a c-Src și Stat3 privind transcripția HGF în celulele de carcinom mamar . Oncogene 2006 ; 25 : 2773 – 84 . CrossRef PubMed Google Scholar
  38.  
    1. Gohda E ,
    2. Nagao T ,
    3. Yamamoto I.
    . Stimularea producției factorului de creștere a hepatocitelor la fibroblastele umane de către inhibitorul proteinei fosfatazei acid okadaic . Biochem Pharmacol 2000 ; 60 : 1531 – 7 . CrossRef PubMed Google Scholar
  39.  
    1. Xiao J ,
    2. Lu R ,
    3. Shen X ,
    4. Wu M
    . [Extractele de ceai verde protejate împotriva afectării hepatice cronice și cirozei induse de tetraclorură de carbon] . Zhonghua Yu Fang Yi Xue Za Zhi 2002 ; 36 : 243 – 6 . PubMed Google Scholar
    1. Jiao HL ,
    2. Voi P ,
    3. Zhao BL
    . Efectele protectoare ale polifenolilor de ceai verde asupra celulelor HepG2 umane împotriva deteriorării oxidative a fenofibratului . Free Radic Biol Med 2003 ; 35 : 1121 – 8 . CrossRef PubMed Google Scholar
    1. Jimenez-Lopez JM ,
    2. Cederbaum AI
    . Ceaiul verde polifenol epigalocatechin-3-galat protejează celulele HepG2 împotriva toxicității dependente de CYP2E1 . Free Radic Biol Med 2004 ; 36 : 359 – 70 . CrossRef PubMed Google Scholar
  40.  
    1. Roomi M ,
    2. Kalinovsky T ,
    3. Ivanov V ,
    4. Rath M ,
    5. Niedzwiecki A
    . Un amestec de nutrienți previne toxicitatea hepatică și renală a acetaminofenului la șoarecii ICR . Hum Exp Toxicol 2008 ; 27 : 223 – 30 . Text complet abstract / GRATUIT Google Scholar
  41.  
    1. Kelloff GJ ,
    2. Sigman CC
    . Obiective noi bazate pe știință pentru a accelera dezvoltarea medicamentelor oncologice . Eur J Cancer 2005 ; 41 : 491 – 501 . CrossRef PubMed Google Scholar
  42.  
    1. Sattler M ,
    2. Salgia R
    . c-Met și factor de creștere a hepatocitelor: potențial ca ținte noi în terapia cancerului . Curr Oncol Rep 2007 ; 9 : 102 – 8 . CrossRef PubMed Google Scholar
  43.  
    1. Hashem M ,
    2. Essam T
    . Factorul de creștere a hepatocitelor ca marker tumoral în serul pacienților cu cancer de prostată . J Egypt Natl Cancer Inst 2005 ; 17 : 114 – 20 . Google Scholar
  44.  
    1. Gohji K ,
    2. Nomi M ,
    3. Niitani Y ,
    4. și colab
    . Valoarea prognostică independentă a factorului seric de creștere a hepatocitelor în cancerul de vezică urinară . J Clin Oncol 2000 ; 18 : 2963 – 71 . Text complet abstract / GRATUIT Google Scholar
  45.  
    1. Comoglio PM ,
    2. Giordano S ,
    3. Trusolino L
    . Dezvoltarea de medicamente a inhibitorilor MET: vizând dependența de oncogen și oportunitatea . Nat Rev Drug Discov 2008 ; 7 : 504 – 16 . CrossRef PubMed Google Scholar
  46.  
    1. Loeb S ,
    2. Catalona WJ
    . Ce trebuie făcut cu un test PSA anormal . Oncolog 2008 ; 13 : 299 – 305 . Text complet abstract / GRATUIT Google Scholar
  47.  
    1. Renehan AG ,
    2. Frystyk J ,
    3. Flyvbjerg A
    . Riscul de obezitate și cancer: rolul axei insulină-IGF . Trends Endocrinol Metab 2006 ; 17 : 328 – 36 . CrossRef PubMed Google Scholar
    1. Roddam AW ,
    2. Allen NE ,
    3. Appleby P ,
    4. și colab
    . Factori de creștere asemănători insulinei, proteinele lor de legare și riscul de cancer de prostată: analiza datelor individuale ale pacienților din 12 studii prospective . Ann Intern Med 2008 ; 149 : 461 – 71 , W483-468 . CrossRef PubMed Google Scholar
  48.  
    1. Meinbach DS ,
    2. Lokeshwar BL
    . Factori de creștere asemănători insulinei și proteinele lor de legare în cancerul de prostată: cauză sau consecință? Urol Oncol 2006 ; 24 : 294 – 306 . PubMed Google Scholar
  49.  
    1. Borugian MJ ,
    2. Spinelli JJ ,
    3. Sun Z ,
    4. și colab
    . Riscul de cancer de prostată în raport cu factorul de creștere asemănător insulinei (IGF) -I și proteina-3 care leagă IGF: un studiu prospectiv multietnic . Biomarkeri de epidemiol pentru cancer Anterior 2008 ; 17 : 252 – 4 . Text integral GRATUIT Google Scholar
  50.  
    1. Pisters LL ,
    2. Troncoso P ,
    3. Zhau HE ,
    4. Li W ,
    5. von Eschenbach AC ,
    6. Chung LW
    . expresie c-met proto-oncogenă în țesuturile benigne și maligne ale prostatei umane . J Urol 1995 ; 154 : 293 – 8 . CrossRef PubMed Google Scholar
  51.  
    1. Jatoi A ,
    2. Ellison N ,
    3. Burch PA ,
    4. și colab
    . Un studiu de faza II a ceaiului verde în tratamentul pacienților cu carcinom de prostată metastatic independent de androgen . Rac 2003 ; 97 : 1442 – 6 . CrossRef PubMed Google Scholar
  52.  
    1. Choan E ,
    2. Segal R ,
    3. Jonker D ,
    4. și colab
    . Un studiu clinic prospectiv al ceaiului verde pentru cancerul de prostată refractar hormonal: o evaluare a abordării terapiei complementare / alternative . Urol Oncol 2005 ; 23 : 108 – 13 . CrossRef PubMed Google Scholar
  53.  
    1. Chow HH ,
    2. Cai Y ,
    3. Hakim IA ,
    4. și colab
    . Farmacocinetica și siguranța polifenolilor de ceai verde după administrarea în doze multiple de epigalocatechină galat și polifenon E la persoanele sănătoase . Clin Cancer Res 2003 ; 9 : 3312 – 9 . Text complet abstract / GRATUIT Google Scholar
  54.  
    1. Condon MS
    . Rolul micromediului stromal în cancerul de prostată . Semin Cancer Biol 2005 ; 15 : 132 – 7 . CrossRef PubMed Google Scholar
  55.  
    1. Tuxhorn JA ,
    2. Ayala GE ,
    3. Rowley DR
    . Stroma reactivă în progresia cancerului de prostată . J Urol 2001 ; 166 : 2472 – 83 . CrossRef PubMed Google Scholar
  56.  
    1. Matsumoto K ,
    2. Nakamura T
    . Factorul de creștere a hepatocitelor și sistemul Met ca mediator al interacțiunilor tumorale-stromale . Int J Cancer 2006 ; 119 : 477 – 83 . CrossRef PubMed Google Scholar
  57.  
    1. Pantuck AJ ,
    2. Leppert JT ,
    3. Zomorodian N ,
    4. și colab
    . Studiul de faza II a sucului de rodie pentru bărbații cu creștere a antigenului specific prostatei în urma intervenției chirurgicale sau a radiațiilor pentru cancerul de prostată . Clin Cancer Res 2006 ; 12 : 4018 – 26 . Text complet abstract / GRATUIT Google Scholar
  58.  
    1. Zhang X ,
    2. Zhang H ,
    3. Tighiouart M ,
    4. și colab
    . Inhibarea sinergică a creșterii tumorilor capului și gâtului prin ceaiul verde (-) – epigalocatechin-3-galat și inhibitor EGFR al tirozin kinazei . Int J Cancer 2008 ; 123 : 1005 – 14 . CrossRef PubMed Google Scholar

Exprimati-va pararea!

Completează mai jos detaliile tale sau dă clic pe un icon pentru a te autentifica:

Logo WordPress.com

Comentezi folosind contul tău WordPress.com. Dezautentificare /  Schimbă )

Fotografie Google

Comentezi folosind contul tău Google. Dezautentificare /  Schimbă )

Poză Twitter

Comentezi folosind contul tău Twitter. Dezautentificare /  Schimbă )

Fotografie Facebook

Comentezi folosind contul tău Facebook. Dezautentificare /  Schimbă )

Conectare la %s

Acest site folosește Akismet pentru a reduce spamul. Află cum sunt procesate datele comentariilor tale.