Oncoimunologie. doi: 10.4161/onci.25769 PMCID: PMC3812199PMID: 24179708
Lynda Thyer , 1 Emma Ward , 1 Rodney Smith ,1 Jacopo JV Branca , 2 Gabriele Morucci , 2 Massimo Gulisano , 2 David Noakes , 3 Robert Eslinger , 4 și Stefania Pacini 2 ,
Informații despre autor Note despre articol Informații privind drepturile de autor și licență Declinare a răspunderii
Abstract
α- N-acetilgalactosaminidaza (nagalaza) se acumulează în serul bolnavilor de cancer, iar activitatea sa se corelează cu povara tumorală, agresivitatea și progresia clinică a bolii. Administrarea factorului de activare a macrofagelor derivate din proteina GC (GcMAF) la pacienții cu cancer cu niveluri crescute de nagalază a fost asociată cu o scădere a activității nagalazei serice și cu beneficii clinice semnificative. Aici, raportăm rezultatele administrării GcMAF la o cohortă eterogenă de pacienți cu neoplasme avansate, diverse din punct de vedere histologic, considerate în general boli „incurabile”. În cele mai multe cazuri, terapia GcMAF a fost inițiată în stadiile târzii ale progresiei tumorii. Deoarece aceasta este o analiză retrospectivă deschisă, necontrolată, prudență trebuie utilizată atunci când se stabilesc relații cauză-efect între administrarea GcMAF și rezultatul bolii. Cu toate acestea, răspunsul la GcMAF a fost în general robust și au apărut unele tendințe. Toți pacienții (n = 20) s-au prezentat cu activitate nagalazei serice crescute, cu mult peste valorile normale. Toți pacienții, cu excepția unuia, au prezentat o scădere semnificativă a activității nagalazei serice la injecțiile săptămânale cu GcMAF. Scăderea activității nagalazei a fost asociată cu condiții clinice îmbunătățite și nu au fost raportate efecte secundare adverse. Observațiile raportate aici confirmă și extind rezultatele anterioare și deschid calea către studii ulterioare menite să evalueze rolul precis și indicațiile pentru imunoterapia anticancer pe bază de GcMAF.
Introducere
Se știe că α-N-acetilgalactosaminidaza (nagalaza) se acumulează în serul pacienților cu cancer, unde mediază glicozilarea componentei specifice grupului (GC), cunoscută cel mai bine sub numele de proteina de legare a vitaminei D (VDBP), care este precursorul Factorul de activare a macrofagelor derivat din proteine GC (GcMAF). VDBP glicozilat nu poate fi convertit în GcMAF 1 , iar nivelurile scăzute de GcMAF promovează imunodeficiența la persoanele care poartă neoplasme avansate. 2 Creșterea activității nagalazei observată la pacienții cu cancer se datorează în mare parte faptului că celulele maligne eliberează nagalază activă enzimatic. 3 Astfel, activitatea nagalazei serice reflectă nu numai povara tumorală și agresivitatea, ci și progresia clinică a bolii. 4 –7 În prezent, evaluarea activității nagalazei serice este propusă ca un mijloc de încredere pentru a determina severitatea clinică a neoplasmelor multiple. 3
În ser, nagalaza acționează ca o endo- (dar nu ca o exo-) enzimă, nefiind capabilă să glicozileze un reziduu de N -acetilgalactozamină (GalNAc) al GcMAF. 5 Astfel, nagalaza circulantă nu poate degrada GcMAF exogen. 5 – 7 Această observație a sugerat că pacienții cu activitate crescută a nagalazei pot beneficia de furnizarea exogenă a GcMAF. Alături, s-a observat că GcMAF exercită efecte anticancer multiple in vivo și in vitro, atât în modele experimentale, cât și în modele de tumori spontane. Având în vedere impactul GcMAF asupra macrofagelor și rolul lor central în răspunsurile imune anticancer, GcMAF este considerat pe scară largă ca un agent imunoterapeutic. 7
Cu toate acestea, pe lângă stimularea macrofagelor care infiltrează tumorile, 8 GcMAF nu numai că inhibă în mod direct proliferarea diferitelor celule canceroase umane in vitro, 9 , 10 , dar și inversează fenotipul malign al celulelor canceroase de sân umane. 10 Mai mult, se pare că GcMAF inhibă angiogeneza, privând astfel leziunile neoplazice de oxigenul și rezervele de nutrienți care sunt necesare pentru progresia tumorii și metastaze. 10 – 13Recent, s-a propus că efectele antineoplazice ale GcMAF sunt mediate de receptorul vitaminei D (VDR) și s-a demonstrat că GcMAF stimulează o cale de semnalizare intracelulară care afectează AMP ciclic. Această cascadă de transducție a semnalului ar putea fi de fapt responsabilă pentru moartea celulelor maligne expuse la GcMAF. 12 Luate împreună, aceste constatări in vitro și in vivo oferă o justificare pentru observația că GcMAF exercită efecte anticancerigene dramatice la (cel puțin o fracțiune din) pacienții cu cancer avansat. 5 – 7 De remarcat, în studiile menționate mai sus, efectele anticancer ale GcMAF au fost evaluate prin măsurarea activității nagalazei serice ca marker al poverii și progresiei tumorii. 2 , 3 ,14
Efectele biologice ale GcMAF au fost documentate într-o varietate de sisteme experimentale și fac obiectul a peste 50 de lucrări revizuite de colegi publicate în ultimii 20 de ani. 15Datorită rațiunii științifice solide care stă la baza utilizării cu compasiune a GcMAF la pacienții cu cancer avansat, sute de medici din toate părțile lumii au adoptat această abordare pentru o varietate de indicații în care s-ar putea dovedi utilă. Aici, prezentăm o serie de cazuri clinice care exemplifica rezultatele obținute cu administrarea GcMAF la pacienții cu diverse tipuri de cancer avansat, cu un accent deosebit pe efectele GcMAF asupra activității nagalazei serice. Știm bine că aceste cazuri, datorită eterogenității și numărului redus, pot fi considerate anecdotice. Cu toate acestea, un studiu foarte recent privind evaluarea practicii clinice încurajează puternic reevaluarea cazurilor individuale precum cele prezentate aici. 16Astfel, în timp ce unele studii prezintă statistici mari și impresionante obținute din cohorte clinice mari, altele pot raporta un număr limitat de cazuri demne de remarcat, așa cum facem aici. Potrivit acestei abordări epistemologice, cu autoritate, „toate aceste povești devin dovada a ceea ce funcționează în medicină”. 16 Prin urmare, credem că cazurile clinice raportate mai jos indică efecte benefice pentru administrarea GcMAF la pacienții cu cancer avansat, determinând studii suplimentare pentru a aborda în mod oficial această posibilitate.
Rezultate
Activitatea medie a nagalazei serice înainte de tratamentul cu GcMAF documentată în cohorta noastră de pacienți a fost de 2,84 ± 0,26 nM/min/mg, cu un interval de 1,00–5,60 nM/min/mg (tabelul 1). La momentul celei de-a doua teste (interval mediu = 112 d), activitatea medie a nagalazei serice în cursul tratamentului cu GcMAF a fost de 2,01 ± 0,22 nM/min/mg, cu un interval de 1,00–3,20 nM/min/mg. Diferența dintre aceste valori a fost semnificativă statistic (p < 0,05). De remarcat, niciun pacient din această cohortă nu a fost observat inițial ca fiind în intervalul de referință de laborator pentru activitatea nagalazei serice (0,90-0,92 nM/min/mg). La momentul testării finale (interval mediu = 263 d), activitatea medie a nagalazei serice a cohortei de pacienți a fost de 1,59 ± 0,17 nM/min/mg, cu un interval de 0,60–2,80 nM/min/mg. Diferența dintre această valoare și activitatea nagalazei serice înregistrată înainte de inițierea tratamentului cu GcMAF a fost, de asemenea, semnificativă statistic (p < 0,01).
Tabel 1. Nivelurile de Nagalase înainte și după terapia GcMAF*
| Nr | Gen | Vârstă | Tipul tumorii | Activitatea nagalazei serice | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Data înainte de extragere | Pre rezultat | Data primului post extragere | Rezultatul primului post | Zile între pre și prima extragere post | Data ultimei extrageri | Ultimul rezultat | Zile între pre și ultima extragere | Pre-ultima diferență | ||||
| 1) | M | 64 | Vezica CA | octombrie 2012 | 2,90 | Ianuarie 2013 | 2,60 | 92 | -0,30 | |||
| 2) | M | 63 | Vezica CA | iulie 2011 | 3.10 | februarie, 2012 | 2.30 | 215 | octombrie 2012 | 1.40 | 458 | -1,70 |
| 3) | F | 69 | Vezica CA | mai 2011 | 4.10 | octombrie 2011 | 2.30 | 153 | decembrie 2012 | 0,75 | 580 | -3,35 |
| 4) | F | 60 | CA ovariană | iunie 2012 | 3.30 | iunie 2012 | 3.20 | 7 | noiembrie 2012 | 2,80 | 153 | -0,50 |
| 5) | F | 62 | CA ovariană | august 2012 | 2,70 | – | – | – | Februarie 2013 | 2.00 | 184 | -0,70 |
| 6) | F | 61 | CA ovariană | decembrie 2012 | 2,60 | – | – | – | Februarie 2013 | 2.20 | 62 | -0,40 |
| 7) | M | 67 | Prostata CA | august 2012 | 3.40 | – | – | – | decembrie 2012 | 2,80 | 122 | -0,60 |
| 8) | M | 76 | Prostata CA | aprilie, 2011 | 2.00 | august 2011 | 1.20 | 122 | decembrie 2012 | 0,75 | 610 | -1,25 |
| 9) | M | 65 | Prostata CA | octombrie 2011 | 1,90 | februarie, 2012 | 1,70 | 123 | octombrie 2012 | 1.20 | 366 | -0,70 |
| 10) | F | 66 | Sân CA | august 2011 | 1,70 | ianuarie 2012 | 1.00 | 153 | decembrie 2012 | 0,60 | 487 | -1,10 |
| 11) | F | 63 | Sân CA | mai 2011 | 5,60 | octombrie 2011 | 2,90 | 153 | octombrie 2012 | 1.10 | 519 | -4,50 |
| 12) | M | 63 | Limbă celule scuamoase CA | iulie 2012 | 3.00 | septembrie 2012 | 1,50 | 62 | decembrie 2012 | 1.00 | 153 | -2.00 |
| 13) | F | 55 | Limbă celule scuamoase CA | noiembrie 2012 | 1.20 | – | – | – | Februarie 2013 | 0,87 | 92 | -0,33 |
| 14) | M | 54 | CA colorectal | iulie 2012 | 3,90 | – | – | – | octombrie 2012 | 2.00 | 92 | -1,90 |
| 15) | F | 58 | Celulă scuamoasă cap/gât CA | iunie 2012 | 2,90 | iulie 2012 | 2,70 | 30 | Februarie 2013 | 2.00 | 245 | -0,90 |
| 16) | M | 72 | Laringe CA | mai 2011 | 4,70 | octombrie 2011 | 2.00 | 153 | decembrie 2012 | 0,90 | 580 | -3,80 |
| 17) | F | 35 | Celulă scuamoasă CA | iunie 2012 | 1,50 | septembrie 2012 | 1.10 | 92 | -0,40 | |||
| 18) | F | 69 | Limfom folicular | iunie 2012 | 1.00 | august 2012 | 1.30 | 61 | Ianuarie 2013 | 1.20 | 214 | 0,20 |
| 19) | F | 66 | Limfom | august 2012 | 2.20 | – | – | – | noiembrie 2012 | 1,90 | 92 | -0,30 |
| 20) | M | 42 | Oligodendrogliom anaplazic de gradul III | noiembrie 2012 | 3.00 | – | – | – | Ianuarie 2013 | 2,60 | 61 | -0,40 |
| Max | – | – | – | – | 5,60 | – | 3.20 | 215 | – | 2,80 | 610 | – |
| Min | – | – | – | – | 1.00 | – | 1.00 | 7 | – | 0,60 | 61 | – |
| Rău | – | – | – | – | 2,84 | – | 2,01* | 112 | – | 1,59** | 263 | – |
| SEM | – | – | – | – | 0,26 | – | 0,22 | 19.17 | – | 0,17 | 44,90 | – |
Deschide într-o fereastră separată
* Valorile activității nagalazei serice sunt prezentate ca nM/min/mg. Ultima coloană (pre-ultima diferență de nagalază) a ilustrat scăderea activității nagalazei serice între inițierea terapiei cu factor de activare a macrofagelor derivate din proteina GC (GcMAF) (pre) și ultimul punct de timp al testării (ultimul). Pentru pacienții cărora le-a fost testată activitatea nagalazei serice în mai mult de două cazuri, rezultatele determinării suplimentare (primul post) sunt raportate în coloana „Rezultatele primului post”. *p < 0,05; **p < 0,01. CA, carcinom.
Descrierea narativă a unor cazuri clinice notabile din Țările de Jos
Următoarele rapoarte au fost colectate și comunicate de Dr. Steven Hofman (CMC, Capelle aan den Ijssel; Țările de Jos) și se referă la anii 2011–2012. În plus față de GcMAF, celor mai mulți pacienți li s-a prescris suplimente de vitamine D și A. Suplimentele suplimentare sunt indicate atunci când sunt asumate. Majoritatea pacienților nu au presupus chimioterapie anticancer convențională împreună cu GcMAF. Cu toate acestea, mai mulți pacienți au fost supuși unor terapii anticancer convenționale în anii anteriori, așa cum se indică în rapoartele individuale. Când pacienții au asumat terapii convenționale, cum ar fi hormonii, în cursul administrării GcMAF (de exemplu, pacientul #8), acest lucru este indicat în raportul individual. Atunci când nu este indicat altfel, pacienții au primit 100 ng GcMAF săptămânal, ca o singură injecție intramusculară, în conformitate cu recomandările acceptate în mod obișnuit.5 – 7 Rapoartele originale sunt cu caractere cursive . Fiecare caz este menționat cu numere progresive, ca întabelul 1.
Înfigura 1, scăderea activității nagalazei serice în cohorta de pacienți este reprezentată grafic în funcție de testarea consecutivă. De remarcat, deoarece aceasta este o analiză retrospectivă și nu un studiu clinic, determinările nagalazei nu au fost efectuate în același moment la fiecare pacient în parte. Forma generală a graficului, totuși, este foarte similară, dacă nu complet superpozabilă, cu cea a altor grafice de același tip care au fost raportate anterior. 5 – 7 , 17
Figura 1. Cursul de timp al tratamentului cu GcMAF la 7 pacienți cu cancer cu activitate nagalazei serice ca indice de prognostic. Datele corespund pacienților descriși în secțiunea „Descrierea narativă a unor cazuri clinice notabile din Țările de Jos”. Determinările activității nagalazei serice nu au fost efectuate în același punct de timp la fiecare pacient în parte, așa cum se detaliază întabelul 1. Pacienții sunt indicați cu numere consecutive ca în secțiunea Rezultate șitabelul 1.
2. Bărbat, născut în 1950. Carcinom al vezicii urinare din 2009, tratat anterior cu chimio-soluții local. Nivelul Nagalase la prezentarea din 4 iulie 2011: 3.10. 10 februarie 2012: ora 2.30. 25 mai 2012: 1,80. 26 octombrie 2012: ora 1.40. Tratament cu GcMAF și acupunctură, mai târziu numai GcMAF (mai târziu cale intravenoasă). Vezica urinară considerată curată de urolog în vara anului 2012. Tratamentul GcMAF a continuat.În acest caz, scăderea constantă a activității nagalazei serice a fost asociată cu o îmbunătățire clinică semnificativă. Scăderea activității nagalazei a fost evidentă la prima testare post-tratament, la aproximativ 7 luni după inițierea tratamentului cu GcMAF și a persistat până la ultima determinare disponibilă, adică aproximativ 15 luni după aceea. Diferența în activitatea nagalazei serice, așa cum a fost înregistrată înainte de ultima determinare și înainte de inițierea terapiei cu GcMAF, a fost de -1,70 nM/min/mg.
3. Femeie, nascuta in 1944. Carcinom vezical tratat din 2011 de catre medic urolog cu chiuretaj si BCG. Nivelul Nagalase la prezentarea din 9 mai 2011: 4.10. 24 octombrie 2011: ora 2.30. 3 aprilie 2012: ora 1.40. 10 septembrie 2012: ora 1.00. 4 decembrie 2012: 0,75. În timpul perioadei de testare a nagalazei, pacientul a fost sfătuit să injecteze GcMAF intramuscular săptămânal, dar pacientul nu a fost consecvent. Vezica urinară a fost considerată în stare bună de mai multe ori în această perioadă de către medicul urolog curant.De asemenea, în acest caz, o scădere consistentă a activității nagalazei serice a fost asociată cu o îmbunătățire clinică semnificativă. O astfel de scădere a activității nagalazei a fost evidentă la prima testare post-tratament, la aproximativ 5 luni după inițierea tratamentului cu GcMAF, și a persistat până la ultima determinare disponibilă, adică aproximativ 19 luni după aceea. Diferența în activitatea nagalazei serice, așa cum a fost înregistrată înainte de ultima determinare și înainte de inițierea terapiei cu GcMAF, a fost de -3,35 nM/min/mg. Ultima valoare disponibilă a activității nagalazei serice, 0,75 nM/min/mg, a fost în intervalul normal.
8. Bărbat, născut în 1937. Carcinom de prostată găsit de PSA în 2009, fără plângeri specifice. Tratat prin injecții cu hormoni, care a dat plângeri. Inainte si in acelasi an a fost depistat carcinom de colon si operat dupa iradiere si chimioterapie (nu exista tumora netratata/metastaze probabile). Nivelul Nagalase la prezentare din 6 aprilie 2011: ora 2.00. 29 august 2011: ora 1.20. 5 ianuarie 2012: 0,81. 5 iulie 2012: 0,67. 6 decembrie 2012: 0,75. Tratament cu acupunctură și GcMAF; după ceva timp, tratamentul cu hormoni a fost întrerupt și plângerile, tot nespecifice, s-au îmbunătățit foarte mult. Rămâne pe supraveghere cu frecvență joasă.Din nou, activitatea nagalazei serice a revenit la valorile normale (0,75 nM/min/mg) după aproximativ 20 luni de tratament cu GcMAF. O scădere a activității nagalazei, totuși, a fost evidentă deja la primul test, adică la 4 luni după inițierea tratamentului cu GcMAF. Conform literaturii de specialitate, 7 normalizarea nivelurilor serice de nagalaza la pacientii cu cancer de prostata poate reprezenta un indice de eradicare a tumorii.
9. Bărbat, născut în 1948. Carcinom de prostată în 2008; prostata a extirpat in 2009 cu prognostic bun. Cu toate acestea, un anume raportează că oboseala și durerea au rămas. S-a început tratamentul cu GcMAF, împreună cu câteva tratamente de acupunctură. Nivelul Nagalase la prezentarea din 21 octombrie 2011: 1,90. 2 februarie 2012: 1,70. 19 octombrie 2012: ora 1.20. Reclamațiile au scăzut treptat, iar injecțiile au fost efectuate intravenos ulterior. Tratamentul continua.
10. Femeie, născută în 1947. Carcinom de sân stâng (descoperit la sondaj), operat cu ganglioni santinelă în 2010, chimioterapie seria 4 din 6, fără plângeri specifice rămase. Încă o stare de rău, oboseală și tulburări de somn. Nivelul Nagalase la prezentarea din 9 august 2011: 1,70. 16 ianuarie 2012: ora 1.00. 12 martie 2012: 0,72. 11 decembrie 2012: 0,60. GcMAF-tratament (predominant cale intravenoasă) combinat cu acupunctură. GcMAF a fost întrerupt în aprilie 2012. Reclamațiile specifice au diminuat. Pacient încă văzut la câteva luni. O scădere semnificativă a activității nagalazei serice a putut fi observată după 5 luni de tratament cu GcMAF. O astfel de scădere a persistat chiar și după întreruperea GcMAF, iar activitatea nagalazei serice a fost normalizată la aproximativ 16 luni după inițierea terapiei. Conform literaturii de specialitate, 5normalizarea activității nagalazei serice la pacientele cu carcinom mamar poate reprezenta un indice de eradicare a tumorii.
11. Femeie, nascuta in 1950. Carcinom de san stang, afectiuni specifice, metastaze probabile. După operație locală, iradierea toracelui, combinată cu chimioterapie, Herceptin-terapie. Parțial plângeri în asociere cu tratamente. Nivelul Nagalase la prezentarea din 11 mai 2011: 5,60. 6 octombrie 2011: 2,90. 21 februarie 2012: 1,80. 18 octombrie 2012: 1.10. Tratat cu GcMAF intramuscular, ulterior intravenos și câteva tratamente de acupunctură. Nicio plângere suplimentară (a scăzut în 3-6 săptămâni), încă în regim GcMAF intravenos. O scădere semnificativă a activității nagalazei serice a putut fi observată la aproximativ 5 luni după inițierea terapiei. Aproximativ după 17 luni de tratament cu GcMAF, nivelurile serice de nagalază s-au apropiat de valorile normale.
16.Bărbat, născut în 1941. Carcinom de laringe găsit și tratat cu chiuretaj și iradiere în 2010. Colită hemoragică-recto-în anamneză, puține plângeri după 2005. Carcinom de vezică descoperită în 2011, tratat prin chiuretaj local și mai multe cicluri de instilatii BCG. Plângeri legate de creșterea tumorii și tratamente, fără chimioterapie. Tratamentul a constat în acupunctură și GcMAF intramuscular, iar ulterior injecții intravenoase pe o bază săptămânală. Nivelul Nagalase la prezentare din 16 mai 2011: 4,70. 4 octombrie 2011: ora 2.00. 10 februarie 2012: ora 1.20. 15 iunie 2012: ora 1.00. 23 octombrie 2012: 0,88. 20 decembrie 2012: 0,90. În timpul imunoterapiei cu GcMAF au existat evoluții interesante. Insistând asupra extirparei vezicii urinare de către urologi, a făcut față unei schimbări de urolog, doua a doua pareri de catre o clinica specializata in cancer si ulterior de catre un medic urolog al echipei de operatie programata. Din partea Pacienților, au existat câteva ajustări favorabile ale stilului de viață, cum ar fi întreruperea fumatului și adoptarea unui aport zilnic de ulei de ficat de cod și frunze de salvia (din proprie inițiativă). În fața opiniei urologilor am decis să dau GcMAF de două ori pe săptămână pe o perioadă de șase săptămâni. Ultima opinie a medicului urolog curant a fost amânarea unei decizii mai definitive pentru februarie, din cauza unei impresii mult mai bune a mucoasei vezicii urinare începând din ianuarie 2013. Există optimism la cei trei actori numiți în situația actuală. precum întreruperea fumatului și adoptarea unui aport zilnic de ulei de ficat de cod și frunze de salvia (din proprie inițiativă). În fața opiniei urologilor am decis să dau GcMAF de două ori pe săptămână pe o perioadă de șase săptămâni. Ultima opinie a medicului urolog curant a fost amânarea unei decizii mai definitive pentru februarie, din cauza unei impresii mult mai bune a mucoasei vezicii urinare începând din ianuarie 2013. Există optimism la cei trei actori numiți în situația actuală. precum întreruperea fumatului și adoptarea unui aport zilnic de ulei de ficat de cod și frunze de salvia (din proprie inițiativă). În fața opiniei urologilor am decis să dau GcMAF de două ori pe săptămână pe o perioadă de șase săptămâni. Ultima opinie a medicului urolog curant a fost amânarea unei decizii mai definitive pentru februarie, din cauza unei impresii mult mai bune a mucoasei vezicii urinare începând din ianuarie 2013. Există optimism la cei trei actori numiți în situația actuală.În acest caz, o scădere semnificativă a activării nagalazei serice după administrarea GcMAF a fost asociată cu beneficii clinice semnificative, în concordanță cu rapoartele anterioare. 7
Descrierea narativă a unor cazuri clinice notabile din Statele Unite ale Americii
Următoarele rapoarte au fost comunicate de RE și se referă la anii 2012–2013. La majoritatea pacienților, administrarea săptămânală a 100 ng GcMAF im a fost inițiată în august 2012, iar prima evaluare a activității nagalazei serice a fost efectuată imediat înainte de inițierea tratamentului. Niciunul dintre pacienți nu a presupus chimioterapie anticancer convențională în timpul împreună cu GcMAF. Aici, raportăm doar acele cazuri pentru care au fost disponibile cel puțin două determinări de nagalază.
1. Bărbat, 64 de ani. Carcinom vezical. Nivelul Nagalase la prima testare în octombrie 2012: 2,90. În ianuarie 2013: 2,60. Îmbunătățit. În acest caz, o scădere a activității nagalazei serice ar putea fi documentată în aproximativ 3 luni de tratament cu GcMAF și a fost asociată cu îmbunătățirea clinică.
4. Femeie, 60 de ani. Carcinom ovarian. Nivelul Nagalase la prima testare în iunie 2012: 3.30. noiembrie 2012: 2,80. Marker tumoral CA-125 în decembrie 2012: 15,7. În februarie 2013: 19.1 Îmbunătățit. Administrarea săptămânală a GcMAF a dus la o scădere semnificativă a activității nagalazei serice în aproximativ 3 luni. O astfel de scădere a fost asociată cu beneficii clinice. Aceste modificări, totuși, nu au fost (încă) asociate cu o scădere a nivelurilor circulante ale antigenului canceros 125 (CA-125), un alt marker tumoral.
7. Bărbat, 67 ani. Carcinom de prostată. Nivelul Nagalase la prima testare în august 2012: 3,40. În decembrie 2012: 2,80. Îmbunătățit. În acest caz, beneficiile clinice au fost asociate cu o scădere semnificativă a activității nagalazei serice în aproximativ 4 luni de la inițierea terapiei GcMAF. Aceste rezultate sunt în concordanță cu constatările raportate mai sus, precum și cu cazurile descrise anterior. 7
12. Bărbat, 63 ani. Carcinom scuamos al limbii. Nivelul Nagalase la prima testare în iulie 2012: 3.00. În septembrie 2012: 1,50. În decembrie 2012: ora 1.00. Îmbunătățit. Din nou, îmbunătățirea clinică a fost asociată cu o scădere semnificativă a activității nagalazei serice, care s-a apropiat de intervalul normal în aproximativ 5 luni. Din câte cunoștințele noastre, acesta este primul caz al unui pacient afectat de carcinom cu celule scuamoase al limbii care primește GcMAF. De asemenea pacientul n. treisprezece (tabelul 1) a fost tratat cu GcMAF pentru un carcinom cu celule scuamoase al limbii și a arătat o scădere a activității nagalazei serice în aproximativ 3 luni.
14. Barbat, varsta 54. Cancer colorectal. Nivelul Nagalase la prima testare în iulie 2012: 3,90. În octombrie 2012: ora 2.00. Întrerupt. În acest caz, o scădere semnificativă a activității nagalazei serice ar putea fi documentată la aproximativ 3 luni după inițierea terapiei GcMAF. Nu cunoaștem motivele care au dus la întreruperea tratamentului.
15. Femeie, 58 ani. Carcinom scuamos al capului și gâtului. Nivelul Nagalase la prima testare în iunie 2012: 2,90. În iulie 2012: 2,70. În februarie 2013: ora 2.00. Îmbunătățit. În acest caz, o scădere minimă a activității nagalazei serice observată după 1 lună de administrare a GcMAF a fost asociată cu beneficii clinice.
17. Femeie, 35 ani. Carcinom cu celule scuamoase. Nivelul Nagalase la prima testare în iunie 2012: 1,50. În septembrie 2012: 1.10. Întrerupt . În acest caz, a fost observată o scădere a activității nagalazei serice după 3 luni de terapie cu GcMAF. Nu cunoaștem motivele care au dus la întreruperea tratamentului.
18. Femeie, 69 ani. Limfom folicular. Nivelul Nagalase la prima testare în iunie 2012: 1.00. În august 2012: ora 1.30. În ianuarie 2013: 1.20. Îmbunătățit. În acest caz, nu a putut fi dezvăluită nicio asociere între activitatea nagalazei serice, tratamentul cu GcMAF și condițiile clinice.
19. Femeie, 66 ani. Limfom. Nivelul Nagalase la prima testare în august 2012: 2,20. În noiembrie 2012: 1,90. Îmbunătățit. În acest caz, o îmbunătățire clinică a fost asociată cu o scădere semnificativă a activității nagalazei serice în aproximativ 3 luni după inițierea tratamentului cu GcMAF.
Discuţie
S-a demonstrat că GcMAF inhibă multiple aspecte ale transformării neoplazice in vitro, într-o varietate de modele tumorale. 5 – 10Cazurile clinice raportate aici sunt eterogene și se referă la pacienți cu diferite tipuri de neoplasme și în diferite stadii de progresie malignă. Aceste cazuri includ pacienți cu cancer la care efectele GcMAF nu au fost descrise înainte, cum ar fi subiecții care suferă de diferite tipuri de carcinom al capului și gâtului (inclusiv tumori ale laringelui și limbii), limfoame, oligodendrocitom și carcinom ovarian. În unele cazuri, pacienții au fost afectați simultan de mai multe tipuri de tumori, așa cum este raportat în descrierea narativă. În multe cazuri, pacienții au primit GcMAF împreună cu alte tratamente complementare, cum ar fi acupunctura sau administrarea de suplimente nutritive. În toate cazurile, terapia GcMAF a fost inițiată în stadiile târzii ale progresiei tumorii, deoarece terapiile convenționale erau în mod evident preferate în stadiile mai puțin avansate. Prin urmare, majoritatea cazurilor descrise aici se încadrează în categoria tratamentului compasional. De fapt, cei mai mulți dintre acești pacienți au fost supuși terapiei anticancer convenționale în anii precedenți și s-au referit la tratamentul cu GcMAF atunci când chimio- sau radioterapia convențională s-a dovedit ineficientă sau intolerabilă, așa cum este descris în rapoartele individuale. Deoarece aceasta este o analiză retrospectivă deschisă, necontrolată, trebuie să se acorde prudență în stabilirea unei relații cauză-efect între tratament și rezultatul clinic. Cu toate acestea, răspunsul la GcMAF a fost adesea relativ robust și anumite tendințe ies în evidență. cei mai mulți dintre acești pacienți au fost supuși terapiei anticancer convenționale în anii precedenți și s-au referit la tratamentul cu GcMAF atunci când chimioterapie sau radioterapie convențională s-au dovedit ineficiente sau intolerabile, așa cum este descris în rapoartele individuale. Deoarece aceasta este o analiză retrospectivă deschisă, necontrolată, trebuie să se acorde prudență în stabilirea unei relații cauză-efect între tratament și rezultatul clinic. Cu toate acestea, răspunsul la GcMAF a fost adesea relativ robust și anumite tendințe ies în evidență. cei mai mulți dintre acești pacienți au fost supuși terapiei anticancer convenționale în anii precedenți și s-au referit la tratamentul cu GcMAF atunci când chimioterapie sau radioterapie convențională s-au dovedit ineficiente sau intolerabile, așa cum este descris în rapoartele individuale. Deoarece aceasta este o analiză retrospectivă deschisă, necontrolată, trebuie să se acorde prudență în stabilirea unei relații cauză-efect între tratament și rezultatul clinic. Cu toate acestea, răspunsul la GcMAF a fost adesea relativ robust și anumite tendințe ies în evidență.
Tendințe din cazuri olandeze
1. Toți pacienții s-au prezentat cu activitate serică a nagalazei mult peste valoarea normală, adică aproximativ 0,95 nM/min/mg.
2. Toți pacienții au prezentat o scădere semnificativă a activității nagalazei serice în urma injecțiilor cu GcMAF.
3. În toate cazurile, activitatea nagalazei serice a fost redusă la a doua evaluare, iar o astfel de scădere a persistat în următoarele determinări.
4. În 4/7 cazuri, activitatea nagalazei serice a revenit la niveluri normale la ultima evaluare.
Tendințe din cazuri americane
1. Toți pacienții, cu excepția unuia, s-au prezentat cu activitate serică a nagalazei cu mult peste valoarea normală. Pacientul #18, într-adevăr, a prezentat o activitate a nagalazei serice care a fost foarte aproape de normal.
2. La majoritatea pacienților, s-a observat o scădere semnificativă a activității nagalazei serice la administrarea GcMAF. La pacienta #18, o astfel de scădere nu a fost asociată cu beneficii clinice, chiar dacă activitatea ei serică a nagalazei a fost întotdeauna scăzută. Această lipsă a unei relații inverse stricte între activitatea nagalazei serice și răspunsurile clinice a fost observată recent într-un studiu care descrie efectele GcMAF la copiii cu autism. Majoritatea acestor pacienți au prezentat într-adevăr o scădere a activității nagalazei serice, precum și o îmbunătățire semnificativă a simptomelor, dar cele două fenomene nu au fost strict corelate între ele. 18
Un punct semnificativ care reiese din analiza cazurilor descrise mai sus este absența aparentă a efectelor secundare legate de GcMAF. Acest punct, care a fost documentat anterior la copiii cu autism, 18 este de mare importanță atunci când GcMAF este luat în considerare pentru tratamentul compasional al pacienților cu boli avansate sau incurabile. De fapt, în multe țări, absența completă a efectelor secundare este o condiție prealabilă pentru administrarea cu compasiune a substanțelor care nu au fost încă aprobate de autoritățile sanitare locale.
Evident, aceste observații preliminare necesită o perioadă prelungită de urmărire pentru a determina cele mai bune indicații pentru administrarea compasivă a GcMAF. Începând de astăzi, GcMAF a fost folosit (întotdeauna ca o terapie plină de compasiune) cu rezultate încurajatoare la pacienții afectați de aproape toate tipurile de cancer și în toate etapele de progresie a bolii. Cu toate acestea, este tentant să presupunem că pacienții care prezintă anumite tipuri și/sau stadii de malignitate ar putea obține beneficii clinice consistente din administrarea GcMAF. De asemenea, fundalul genetic al pacienților, în special în ceea ce privește polimorfismele VDR , ar putea influența răspunsul individual la GcMAF. De fapt, recent am demonstrat că gradul de răspuns al monocitelor umane la GcMAF este asociat cu VDR individual.genotipuri. 13 Prin urmare, se poate presupune că efectele antineoplazice ale GcMAF pot fi, de asemenea, influențate de astfel de polimorfisme. Mai mult, trebuie reținut faptul că prognosticul pacienților afectați de toate tipurile de cancer depinde de starea lor nutrițională și inflamatorie, care poate fi monitorizată de Indexul Prognostic Inflamator și Nutrițional (PINI). 19 Scorul PINI ar putea, prin urmare, să devină parte a evaluărilor de laborator efectuate în cursul terapiei GcMAF și – împreună cu evaluarea testării activității nagalazei serice și VDR .polimorfisme – poate ajuta medicii în monitorizarea răspunsului individual al pacientului la GcMAF și ajustarea dozelor și programelor în cursul tratamentului, dacă este necesar. Studiile care investighează impactul polimorfismelor GC asupra răspunsului pacienților cu cancer la terapia GcMAF, precum și contribuția variantelor distincte de GC la cantitățile relative de specii GcMAF 20 „neinductibile”, inactive , vor fi, de asemenea, esențiale în determinarea celei mai corecte abordări. către administrația GcMAF.
Rezultatele raportate aici sunt în concordanță cu rezultatele anterioare 5 – 7 , precum și cu o publicație recentă a lui Inui și colab. 21 , care au descris trei cazuri clinice tratate cu succes cu regimuri terapeutice combinatorii, inclusiv injecții subcutanate sau intramusculare cu ser uman care conține GcMAF. Spre deosebire de acest ultim studiu, rezultatele prezentate aici au fost obținute cu GcMAF foarte purificat, excluzând efectele altor proteine serice care ar fi putut acționa ca factori de confuzie.
În concluzie, cazurile clinice prezentate aici întăresc ipoteza că GcMAF ar putea deveni parte a regimurilor imunoterapeutice anticancer.
Materiale și metode
Producția GcMAF
Medicii au obținut GcMAF de la Immuno Biotech Ltd (Guernsey, Marea Britanie). GcMAF a fost foarte purificat conform procedurilor descrise anterior. 7 Pe scurt, VDBP a fost izolat din ser uman purificat obținut de la Crucea Roșie Americană, utilizând fie cromatografia de afinitate cu 25-hidroxivitamina D3-sefaroză, fie cromatografia de afinitate actină-agaroză. Materialul legat a fost eluat și prelucrat în continuare prin incubare cu trei enzime imobilizate. GcMAF rezultat a fost sterilizat pe filtru. Conținutul de proteine și concentrația soluției GcMAF au fost testate folosind metode standard de testare a proteinei Bradford. 22La sfârșitul procesului de producție, GcMAF a fost verificat pentru sterilitate atât în interior, cât și extern, de laboratoare independente. Siguranța și activitatea biologică a GcMAF au fost testate pe monocite umane, 13 celule umane canceroase de sân, 10 și membrane corionallantoice de embrioni de pui. 12
Colectare de date
O revizuire retrospectivă a diagramei pentru analiza testării nagalazei a fost realizată pe cohorta inițială de pacienți consultați de clinicieni (RE și Dr. Steven Hofman, CMC, Capelle aan den Ijssel; Țările de Jos). Toate înregistrările au fost revizuite de medici pentru confirmarea valorilor activității nagalazei serice, diagnostice, intervale de timp dintre testare, dozare GcMAF și răspunsuri clinice. Diagnosticul de cancer a fost confirmat de alți medici curători.
administrarea GcMAF
Administrarea GcMAF la pacienți individuali a fost efectuată exclusiv de către medicii acestora (RE și Dr. Steven Hofman, CMC, Capelle aan den Ijssel; Țările de Jos), în conformitate cu regulile și reglementările naționale. Fișele clinice originale sunt păstrate de către medici, în locațiile respective, așa cum este indicat. În secțiunea Rezultate, cazurile clinice sunt raportate cât mai aproape de notele originale ale medicilor, cu corecții minime de gramatică și ortografie. Deoarece fiecare medic folosit a descris starea pacienților individuali într-un mod diferit, este de așteptat o anumită eterogenitate în aceste note. Notele sunt prezentate intenționat așa cum au fost scrise, astfel încât fiecare cititor să își poată trage concluziile.
Determinarea activității nagalazei serice
Testarea nagalazei serice a fost efectuată la ELN Laboratories (Bunnik, Olanda) urmând procedura publicată de Yamamoto et al. 14 În special, activitatea nagalazei serice a fost determinată prin utilizarea unui test enzimatic final bazat pe un substrat cromogen. Laboratoarele ELN au stabilit un interval de referință de 0,32–0,95 nM/min/mg de substrat pe baza probelor de ser colectate de la voluntari sănătoși, un interval ușor mai mare decât cel raportat anterior, care a fost de 0,35–0,65 nM/min/mg. 14Studiile ulterioare privind un număr ridicat de subiecți vor stabili cel mai potrivit interval de referință. Indiferent de această problemă, deoarece toate determinările au fost efectuate în același laborator, o scădere relativă a activității nagalazei serice după administrarea GcMAF a fost utilizată ca indice al eficacității terapeutice.
metode statistice
Comparațiile statistice între activitatea nagalazei serice observată înainte și după (la două momente de timp distincte) administrarea GcMAF au fost efectuate prin testele t Student.
Mulțumiri
Autorii doresc să mulțumească Dr. Steven Hofman, CMC, Capelle aan den Ijssel, Țările de Jos, pentru furnizarea datelor referitoare la pacienții pe care i-a tratat, precum și pentru revizuirea critică a acestui studiu.
Dezvăluirea potențialelor conflicte de interese
DN este CEO-ul Immuno Biotech Ltd (compania care izolează și purifică proteina GcMAF). Cu toate acestea, DN nu avea cunoștințe despre terapiile utilizate și nici despre numele pacienților ale căror date erau analizate. Nici el, nici vreun angajat al Immuno Biotech Ltd, nu avea cunoștințe despre nagalase sau alte rezultate ale testelor sau despre numele pacienților utilizate în acest studiu.
Glosar
Abrevieri:
| BCG | bacilul Calmette-Guérin |
| CA-125 | antigenul cancerului 125 |
| GalNAc | N -acetilgalactozamină |
| GcMAF | Factorul de activare a macrofagelor derivat din proteine GC |
| PINI | indicele prognostic inflamator și nutrițional |
| PSA | antigen specific prostatic |
| VDBP | proteina care leagă vitamina D |
| VDR | receptor de vitamina D |
Note de subsol
Publicat anterior online: www.landesbioscience.com/journals/oncoimmunology/article/25769
Referințe
1.
Yamamoto N, Naraparaju VR, Moore M, Brent LH. Glicozilarea proteinei serice de legare a vitaminei D3 de către alfa-N-acetilgalactosaminidaza detectată în plasma pacienților cu lupus eritematos sistemic. Clin Immunol Immunopathol. 1997; 82 :290–8. doi: 10.1006/clin.1996.4320. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]2.
Mohamad SB, Nagasawa H, Uto Y, Hori H. Activitatea alfa-N-acetilgalactosaminidazei celulelor tumorale și implicarea acesteia în activarea macrofagelor legate de GcMAF. Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol. 2002; 132 :1–8. doi: 10.1016/S1095-6433(01)00522-0. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]3.
Greco M, Mitri MD, Chiriacò F, Leo G, Brienza E, Maffia M. Profilul proteomic seric al melanomului malign cutanat și relația cu progresia cancerului: asociere cu activitatea alfa-N-acetilgalactosaminidazei derivate din tumoră. Cancer Lett. 2009; 283 :222–9. doi: 10.1016/j.canlet.2009.04.001. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]4.
Reddi AL, Sankaranarayanan K, Arulraj HS, Devaraj N, Devaraj H. Alfa-N-acetilgalactosaminidaza serică este asociată cu diagnosticul/prognosticul pacienților cu carcinom spinocelular al colului uterin. Rac Lett. 2000; 158 :61–4. doi: 10.1016/S0304-3835(00)00502-4. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]5.
Yamamoto N, Suyama H, Yamamoto N, Ushijima N. Imunoterapia pacienților cu cancer de sân metastatic cu factor de activare a macrofagelor derivate din proteinele care leagă vitamina D (GcMAF) Int J Cancer. 2008; 122 :461–7. doi: 10.1002/ijc.23107. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]6.
Yamamoto N, Suyama H, Nakazato H, Yamamoto N, Koga Y. Imunoterapia cancerului colorectal metastatic cu factor de activare a macrofagelor derivate din proteinele care leagă vitamina D, GcMAF. Cancer Immunol Immunother. 2008; 57 :1007–16. doi: 10.1007/s00262-007-0431-z. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]7.
Yamamoto N, Suyama H, Yamamoto N. Imunoterapie pentru cancerul de prostată cu factor de activare a macrofagelor derivate din proteine Gc, GcMAF. Transl Oncol. 2008; 1 :65–72. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]8.
Nonaka K, Onizuka S, Ishibashi H, Uto Y, Hori H, Nakayama T și colab. Factorul de activare proteină-macrofag care leagă vitamina D inhibă HCC la șoarecii SCID. J Surg Res. 2012; 172 :116–22. doi: 10.1016/j.jss.2010.07.057. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]9.
Gregory KJ, Zhao B, Bielenberg DR, Dridi S, Wu J, Jiang W și colab. Factorul de activare proteină-macrofag care leagă vitamina D inhibă direct proliferarea, migrarea și exprimarea uPAR a celulelor canceroase de prostată. Plus unu. 2010; 5 :e13428. doi: 10.1371/journal.pone.0013428. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]10.
Pacini S, Punzi T, Morucci G, Gulisano M, Ruggiero M. Efectele factorului de activare a macrofagelor derivate din proteinele care leagă vitamina D asupra celulelor cancerului de sân uman. Anticancer Res. 2012; 32 :45–52. [ PubMed ] [ Google Scholar ]11.
Kalkunte S, Brard L, Granai CO, Swamy N. Inhibarea angiogenezei prin proteina de legare a vitaminei D: caracterizarea activității anti-endoteliale a DBP-maf. Angiogeneza. 2005; 8 :349–60. doi: 10.1007/s10456-005-9024-7. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]12.
Pacini S, Morucci G, Punzi T, Gulisano M, Ruggiero M. Factorul de activare a macrofagelor derivat din proteine Gc (GcMAF) stimulează formarea cAMP în celulele mononucleare umane și inhibă angiogeneza în analiza membranei corionallantoice embrionare de pui. Cancer Immunol Immunother. 2011; 60 :479–85. doi: 10.1007/s00262-010-0953-7. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]13.
Pacini S, Morucci G, Punzi T, Gulisano M, Ruggiero M, Amato M, et al. Efectul paricalcitolului și GcMAF asupra angiogenezei și proliferării și semnalizării celulelor mononucleare din sângele periferic uman. J Nephrol. 2012; 25 :577–81. doi: 10.5301/jn.5000035. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]14.
Yamamoto N, Naraparaju VR, Urade M. Utilitatea prognostică a alfa-N-acetilgalactosaminidazei serice și imunosupresia rezultată din glicozilarea proteinei Gc serice la pacienții cu cancer oral. Cancer Res. 1997; 57 :295–9. [ PubMed ] [ Google Scholar ]15.
Yamamoto N, Lindsay DD, Naraparaju VR, Ireland RA, Popoff SN. Un defect în cascada de activare a macrofagelor provocată de inflamație la șobolanii osteopetrotici. J Immunol. 1994; 152 :5100–7. [ PubMed ] [ Google Scholar ]16.
Nunn R. Simplă anecdotă: dovezi și povești în medicină. J Eval Clin Pract. 2011; 17 :920–6. doi: 10.1111/j.1365-2753.2011.01727.x. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]17.
Yamamoto N, Ushijima N, Koga Y. Imunoterapia pacienților infectați cu HIV cu factor de activare a macrofagelor derivate din proteina Gc (GcMAF) J Med Virol. 2009; 81 :16–26. doi: 10.1002/jmv.21376. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]18.
Bradstreet JJ, Vogelaar E, Thyer L. Observații inițiale ale activității crescute ale alfa-N-acetilgalactosaminidazei asociate cu autism și reduceri observate de la injecțiile cu factor de activare a proteinei GC-macrofage. Autism Insights. 2012; 4 :31–8. doi: 10.4137/AUI.S10485. [ CrossRef ] [ Google Scholar ]19.
Fabris A, Biagioni P, Punzi T, Morucci G, Gulisano M, Pacini S, et al. Rolul enzimei de conversie a angiotensinei și polimorfismelor genelor receptorului de vitamina D în sindromul de anorexie-cașexie canceroasă. Am J Immunol. 2012; 8 :65–70. [ Google Scholar ]20.
Rehder DS, Nelson RW, Borges CR. Starea de glicozilare a proteinei de legare a vitaminei D la pacienții cu cancer. Proteine Sci. 2009; 18 :2036–42. doi: 10.1002/pro.214. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]21.
Inui T, Kuchiike D, Kubo K, Mette M, Uto Y, Hori H, et al. Experiență clinică de imunoterapie integrativă a cancerului cu GcMAF. Anticancer Res. 2013; 33 :2917–9. [ PubMed ] [ Google Scholar ]22.
Bradford MM. O metodă rapidă și sensibilă pentru cuantificarea cantităților de micrograme de proteină utilizând principiul legării proteine-colorant. Biochimie anală. 1976; 72 :248–54. doi: 10.1016/0003-2697(76)90527-3. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
TRATAMENTE CANCER EFICIENTE, NON - toxice 