Viruși oncolitici: o nouă clasă de medicamente pentru imunoterapie

Nat Rev Drug Discov. 2015; 14(9): 642–662.

Publicat online 2015 Sep 1. doi:  10.1038/nrd4663

PMCID: PMC7097180 PMID: 26323545

Howard L. Kaufman , Frederick J Kohlhapp și Andrew Zloza

Informații despre autor Informații privind drepturile de autor și licență Declinare a răspunderii

Acest articol a fost corectat. Vezi 

Nat Rev Drug Discov. 2016 30 august; 15(9): 660 .

Materiale suplimentare

Mergi la:

Abstract

Virușii oncolitici reprezintă o nouă clasă de agenți terapeutici care promovează răspunsurile anti-tumorale printr-un mecanism dublu de acțiune care depinde de uciderea selectivă a celulelor tumorale și de inducerea imunității sistemice anti-tumorale. Mecanismele moleculare și celulare de acțiune nu sunt pe deplin elucidate, dar sunt probabil să depindă de replicarea virală în celulele transformate, inducerea morții celulelor primare, interacțiunea cu elementele antivirale ale celulelor tumorale și inițierea imunității antitumorale înnăscute și adaptative. O varietate de virusuri native și modificate genetic au fost dezvoltate ca agenți oncolitici, iar aprobarea primului virus oncolitic de către Administrația SUA pentru Alimente și Medicamente (FDA) este anticipată în viitorul apropiat.

Informatie suplimentara

Versiunea online a acestui articol (doi:10.1038/nrd4663) conține materiale suplimentare, care sunt disponibile utilizatorilor autorizați.

Principal

Imunoterapia cu virusul oncolitic este o abordare terapeutică a tratamentului cancerului care utilizează virusuri native sau modificate genetic care se reproduc selectiv în celulele tumorale. Capacitatea virusurilor de a ucide celulele canceroase a fost recunoscută de aproape un secol, dar numai în ultimul deceniu studiile clinice au documentat un beneficiu terapeutic la pacienții cu cancer ^{1 , 2 , 3 .}. Interesul pentru virusurile oncolitice a crescut, pe baza unei mai bune înțelegeri a biologiei virale, a imunologiei tumorale și a geneticii moleculare. Mai mult, un studiu clinic recent randomizat de fază III a demonstrat o rată de răspuns durabilă îmbunătățită pentru pacienții cu melanom avansat care au fost tratați cu un virus herpes simplex modificat de tip 1 (HSV-1), care codifică factorul de stimulare a coloniilor granulocite-macrofage (GM-CSF) ³ . Acest virus, denumit talimogene laherparepvec (T-VEC; Amgen), este de așteptat să fie prima imunoterapie cu virus oncolitic aprobat de Administrația SUA pentru Alimente și Medicamente (FDA) pentru tratamentul cancerului. Succesul T-VEC este probabil să promoveze dezvoltarea în continuare a medicamentelor în cadrul acestei noi clase de terapii pentru cancer.

Dintre cei aproape 1 milion de virusuri vertebrate, se crede că aproximativ 320.000 infectează celulele de mamifere ⁴ . Virușii au mai multe proprietăți comune; acestea includ un element genetic compus din ADN sau ARN monocatenar sau dublu și capacitatea de a infecta celulele gazdă și de a se replica în condiții permisive (Tabelele 1,​,22).

tabelul 1

Proprietățile unor viruși ADN selectați

Slide PowerPoint

	Adenovirus	Virusul vaccinului	Herpesvirus	Parvovirusul H1
Clasificarea Baltimore	Grupa I: dsDNA	Grupa I: dsDNA	Grupa I: dsDNA	Grupa II: ssDNA
Familie	Adenoviridae	Poxviridae	Herpesviridae	Parvoviridae
Virion	Gol	Blaturi complexe	Învelit	Gol
Simetria capsidei	Icosaedric	Complex	Icosaedric	Icosaedric
Site de replicare	Nucleu și citoplasmă	Citoplasma	Nucleu și citoplasmă	Nucleu și citoplasmă
Receptor celular	MAȘINĂ	Necunoscut	HVEM, nectină 1, nectină 2	Reziduuri de acid sialic
Integrarea nucleară	+	–	+	+
Capacitatea transgenelor	++	+++	+++	N / A
Virusul de tip sălbatic infectează celulele care nu se replic	−	−	−	+
Virulența virusului de tip sălbatic	+/−	+/−	−	+
Antivirale	+	+	+	−
Imunogenitate	−	−	−	+
hemaglutinare	+/−	−	−	+
Pătrunderea barierei hematoencefalice	−	−	−	+
Titrul realizabil (PFU per ml)	10 12	10 9	10 10	5 × 10 8

Deschide într-o fereastră separată

CAR, receptor coxsackie-adenovirus; dsDNA, ADN dublu catenar; HVEM, mediator de intrare a virusului herpes; MTD, doza maximă tolerată; N/A, nu este cazul; PFU, unitate de formare a plăcilor; ssDNA, ADN monocatenar. *Doar receptorii bine validați au inclus, alții pot fi raportați. ‡În oameni. ¶La reexpunere.

tabel 2

Proprietățile unor viruși ARN selectați

Slide PowerPoint

	Reovirus	Virusul Coxsackie	Virusul Valea Seneca	Poliovirus	Virusul rujeolei	Virusul bolii de Newcastle	Virusul stomatitei veziculoase
Clasificarea Baltimore	Grupa III: ARNdc	Grupa IV: ARNss	Grupa IV: ARN ss(+).	Grupa IV: ARN ss(+).	Grupa V: ss(−) ARN	Grupa V: ss(−) ARN	Grupa V ss(−) ARN
Familie	Reoviridae	Picornaviridae	Picornaviridae	Picornaviridae	Paramyxoviridae	Paramyxoviridae	Rhabdoviridae
Virion	Gol	Gol	Gol	Gol	Învelit	Învelit	Învelit
Simetria capsidei	Icosaedric	Icosaedric	Icosaedric	Icosaedric	Icosaedric	Elicoidală	Elicoidală
Site de replicare	Citoplasma	Citoplasma	Citoplasma	Citoplasma	Citoplasma	Citoplasma	Citoplasma
Receptor celular	Necunoscut	CAR/ICAM-1/DAF	Necunoscut	CD155	SLAM și CD46	Necunoscut	LDLR
Integrarea nucleară	−	−	−	−	−	−	−
Capacitatea transgenelor	N / A	N / A	N / A	N / A	+	+	+
Virusul de tip sălbatic infectează celulele care nu se replic	+	−	+	−	−	−	+
Virulența virusului de tip sălbatic	+	+/−	+	−	−	+	+
Antivirale	−	−	−	−	−	−	−
Imunogenitate	−	−	+	+/−	−	−	−
hemaglutinare	+	+	+	+	−	−	−
Pătrunderea barierei hematoencefalice	+	−	+	+	−	+	−
Titrul realizabil (PFU per ml)	10 9	10 9	N / A	10 8	10 11	10 8	2 × 10 10

Deschide într-o fereastră separată

CAR, receptor coxsackie-adenovirus; DAF, factor de accelerare a dezintegrarii; ARNds, ARN dublu catenar; ICAM-1, moleculă de adeziune intercelulară 1; LDLR, receptor de lipoproteine ​​cu densitate joasă; MTD, doza maximă tolerată; N/A, nu este cazul; PFU, unitate de formare a plăcilor; SLAM, moleculă de activare limfocitară de semnalizare; ss(+)ARN, ARN monocatenar pozitiv; ss(-)ARN, ARN monocatenar negativ; VP, particulă virală. *Doar receptorii bine validați au inclus, alții pot fi raportați. ‡ Pentru oameni. ¶La reexpunere.

Rezultatul infecțiilor virale poate fi foarte variabil în funcție de natura patogenă a genelor codificate viral, de interacțiunile dintre virus și sistemul imunitar al gazdei și de capacitatea virusului de a se replica și/sau de a induce latența după infecție. Perspectivele asupra mecanismelor de intrare virală, replicare, inducere și/sau suprimare a răspunsurilor imune și infecții litice versus latente au condus la un interes intens în utilizarea virusurilor pentru tratamentul bolilor umane și au fost utilizate pentru a selecta vectori oncolitici pentru tratamentul bolilor umane. tipuri specifice de cancere. Spre deosebire de „vaccinurile” standard pe bază de virus, virusurile oncolitice infectează și lizează direct celulele tumorale in situ . Ele nu necesită neapărat ca antigene definite să fie incluse în vector caAntigenele asociate tumorii pot fi eliberate de celulele tumorale moarte. Virușii oncolitici pot oferi, de asemenea , semnale suplimentare de pericol care pot promova un răspuns imun eficient antitumoral.

Deși incomplet înțeleși, se crede că virusurile oncolitice mediază activitatea antitumorală prin două mecanisme distincte de acțiune: replicarea selectivă în interiorul celulelor neoplazice, având ca rezultat un efect litic direct asupra celulelor tumorale; și inducerea imunității sistemice antitumorale. Contribuția relativă a acestor mecanisme poate diferi în funcție de natura și tipul celulei canceroase, de caracteristicile vectorului viral și de interacțiunea dintre virus, micromediul tumoral și sistemul imunitar al gazdei.

Anumite viruși au capacitatea de a pătrunde în celulele canceroase și de a se replica selectiv în astfel de celule. Deși virusurile oncolitice pot pătrunde atât în ​​celulele normale, cât și în cele canceroase, anomaliile inerente în răspunsul celulelor canceroase la stres, semnalizarea celulară și homeostazia oferă un avantaj selectiv pentru replicarea virală ⁵ . Mașinile antivirale normale ale celulelor gazdă, care sunt responsabile pentru detectarea și eliminarea virușilor, pot fi, de asemenea, anormale în celulele canceroase. De exemplu, protein kinaza R (PKR) este un factor critic care ajută la curățarea infecțiilor virale intracelulare. PKR poate fi absent în unele celule canceroase, permițând replicarea virală crescută, în timp ce poate fi activ în alte celule canceroase, cum ar fi tumorile de grad scăzut, iar aceste diferențe pot influența activitatea terapeutică a unui virus oncolitic.

Răspunsul imun la virusurile oncolitice pare a fi o componentă importantă a efectului antitumoral, dar poate fi o sabie cu două tăișuri. Pe de o parte, virusurile pot ajuta la promovarea unui răspuns imun împotriva celulelor tumorale, permițând prezentarea antigenului tumoral în contextul unei infecții virale active. Pe de altă parte, răspunsurile antivirale de neutralizare pot bloca replicarea virusului și infecția continuă a celulelor tumorale. Rezultatul terapeutic depinde de o interacțiune complexă între aceste forțe opuse. Când imunitatea sistemică este pe deplin angajată, totuși, răspunsurile terapeutice pot fi observate atât în ​​tumorile injectate local, cât și în locurile îndepărtate de creștere a tumorii neinfectate.

Mulți virusuri au fost propuși ca vectori pentru imunoterapia cu virusul oncolitic și s-a făcut o muncă considerabilă pentru optimizarea vectorilor virali prin atenuarea patogenității și creșterea imunogenității ⁶ . Până în prezent, adenovirusurile, poxvirusurile, HSV-1, coxsackievirusurile, poliovirusurile, virusul rujeolic, virusul bolii Newcastle (NDV), reovirusurile și altele au intrat în studii clinice de fază incipientă. Doi viruși, T-VEC și H101 (Shanghai Sunway Biotech) au fost acum revizuiți de reglementare. H101 este un adenovirus oncolitic modificat genetic care, în combinație cu chimioterapia, a fost aprobat pentru tratamentul carcinomului nazofaringian în China în noiembrie 2005 (Refs 3 , 7 ).

Această revizuire oferă o imagine de ansamblu cuprinzătoare a problemelor critice în dezvoltarea imunoterapiei cu virus oncolitic. Discutam date preclinice și clinice care susțin un rol pentru virusurile oncolitice în terapia cancerului și detaliem unele dintre provocările unice în dezvoltarea medicamentelor pentru virusul oncolitic.

Mergi la:

Mecanisme de imunoterapie cu virus oncolitic

Mecanismele prin care virusurile oncolitice mediază respingerea tumorii sunt incomplet înțelese. Majoritatea virusurilor oncolitice ucid direct celulele tumorale gazdei. Această activitate este influențată de eficiența țintirii receptorilor celulari, replicarea virală și elementele de răspuns antiviral al celulei gazdă ^8 , 9 . Potențialul litic al virusurilor oncolitice depinde și de tipul de virus, doză, tropism viral natural și indus și de susceptibilitatea celulei canceroase la diferitele forme de moarte celulară (apoptoză, necroză, piroptoză și autofagie).

În celulele normale, o varietate de căi de semnalizare funcționează pentru a detecta și elimina particulele virale patogene (Fig. 1). Aceste căi pot fi stimulate prin eliberarea locală de interferon (IFN) sau prin receptori intracelulari de tip Toll (TLR), care sunt activați de elemente virale. TLR-urile sunt receptori de recunoaștere a modelului intracelular și de suprafață celulară care sunt activați ca răspuns la secvențe repetate, așa-numitele modele moleculare asociate patogenului (PAMP), care sunt comune bacteriilor și virusurilor patogene. PAMP-urile pot include elemente de capside virale, ADN, ARN și produse proteice virale. Semnalizarea TLR activează răspunsurile antivirale ale celulei gazdă și imunitatea înnăscută sistemică. Au fost identificați mai mulți factori din aval ale celulei gazdă implicați în eliminarea virusului oncolitic, inclusiv factorul 3 asociat TNF (TRAF3), factorul 3 legat de IFN (IRF3), IRF7 și gena 1 inductabilă de acid retinoic (RIG-1). Acești factori activează calea JAK-STAT (Janus kinase-signal transducer and activator of transcription), care coordonează mecanismul antiviral din celulele infectate. Mașinile antivirale întăresc eliberarea locală de IFN, care activează activitatea PKR. PKR este o protein kinază intracelulară care recunoaște ARN-ul dublu catenar și alte elemente virale^10 , 11 . Când este activat de elemente virale, PKR oprește sinteza proteinelor celulare și promovează moartea rapidă a celulelor și clearance-ul viral. În celulele canceroase, semnalizarea căii IFN și activitatea PKR pot fi anormale, iar clearance-ul viral este împiedicat ¹² .

figura 1

Virușii oncolitici pot exploata căile de evaziune imună a cancerului.

A| În urma infecției virale, majoritatea celulelor normale activează o cale antivirală care permite să conțină infecțiile virale. Mașinile antivirale pot fi declanșate de modele moleculare asociate cu patogenul viral (PAMP) care activează receptorii Toll-like (TLR) sau prin detectarea acizilor nucleici virali de către gena 1 inductibilă de acid retinoic (RIG-1). Odată ce un virus este detectat, o cascadă de semnalizare prin mai multe elemente de interferon de tip I (IFN) (Janus kinaza (JAK), traductorul de semnal și activatorul transcripției (STAT) și factorul de reglare a interferonului 9 (IRF9)) are ca rezultat o cale transcripțională programată care limitează răspândirea virală și poate viza celulele infectate pentru apoptoză sau necroză. Producția locală de IFN indusă de răspunsul imun înnăscut la infecțiile virale poate promova, de asemenea, activitatea antivirală prin receptorul IFN (IFNR). TLR-urile semnalează prin intermediul proteinei de răspuns primar de diferențiere mieloidă MYD88, IFNβ care induce adaptorul care conține domeniul TIR (TRIF), IRF7, IRF3 și factorul nuclear-κB (NF-κB), inducând producerea de citokine proinflamatorii și IFN-uri de tip I . IFN-urile de tip I semnalizează prin calea de semnalizare JAK-STAT, rezultând o reglare în sus a regulatorilor ciclului celular, cum ar fi protein kinaza R (PKR) și IRF7, care limitează răspândirea virală prin legarea de particule virale și declanșarea căilor transcripționale IFN de tip I, promovarea apoptozei abortive a celulelor infectate și producerea de citokine care alertează sistemul imunitar asupra prezenței unei infecții virale. inducerea producerii de citokine proinflamatorii și IFN de tip I. IFN-urile de tip I semnalizează prin calea de semnalizare JAK-STAT, rezultând o reglare în sus a regulatorilor ciclului celular, cum ar fi protein kinaza R (PKR) și IRF7, care limitează răspândirea virală prin legarea de particule virale și declanșarea căilor transcripționale IFN de tip I, promovarea apoptozei abortive a celulelor infectate și producerea de citokine care alertează sistemul imunitar asupra prezenței unei infecții virale. inducerea producerii de citokine proinflamatorii și IFN de tip I. IFN-urile de tip I semnalizează prin calea de semnalizare JAK-STAT, rezultând o reglare în sus a regulatorilor ciclului celular, cum ar fi protein kinaza R (PKR) și IRF7, care limitează răspândirea virală prin legarea de particule virale și declanșarea căilor transcripționale IFN de tip I, promovarea apoptozei abortive a celulelor infectate și producerea de citokine care alertează sistemul imunitar asupra prezenței unei infecții virale.b | În celulele canceroase, totuși, acest proces este întrerupt. Celulele canceroase pot regla în jos componentele cheie de semnalizare în cadrul căii de semnalizare înnăscute, inclusiv RIG-1, IRF7 și IRF3 (Ref. 1 ). Acest lucru limitează detectarea particulelor virale de către TLR și RIG-1, făcând celulele canceroase mai susceptibile la replicarea virală. În plus, celulele canceroase pot regla în jos componentele cheie ale căii de semnalizare a IFN de tip I ^{2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7}, limitând astfel efectele pro-apoptotice și de reglare a ciclului celular ale IFN-urilor de tip I. Deși datele sunt limitate, figura ilustrează viruși individuali în apropierea factorilor și/sau căilor despre care se știe că promovează eliminarea virală în celulele normale (partea a ) sau care susțin replicarea virală din cauza deficienței de factor în celulele canceroase (partea b ). ARNds, ARN dublu catenar; NDV, virusul bolii de Newcastle; TRAF, factor asociat TNF; VSV, virusul stomatitei veziculoase.

Slide PowerPoint

Diferiți virusuri pot, de asemenea, manipula factori de semnalizare aberanți diferiți în celulele tumorale pentru a bloca apoptoza, ceea ce permite virusului mai mult timp pentru a-și finaliza ciclul de viață. În urma replicării virale, majoritatea virusurilor oncolitice induc moartea celulară, care poate elimina direct celulele tumorale viabile, dar, de asemenea, stabilește stadiul inițierii răspunsurilor imune sistemice. Inducerea răspunsurilor imune ale gazdei poate fi mult ajutată atât de tipul de moarte celulară, cât și de eliberarea semnalelor de pericol din celulele infectate cu virus. De exemplu, necroza sau piroptoza sunt forme mai imunogene de moarte celulară decât apoptoza.

Inducerea imunității sistemice antitumorale.Inducerea răspunsurilor imune adaptative sistemice înnăscute și specifice tumorii pare a fi un element critic pentru eradicarea tumorii cu virusuri oncolitice. După moartea celulelor oncolitice, celulele tumorale eliberează antigene asociate tumorii care pot servi la promovarea unui răspuns imun adaptativ care mediază regresia tumorii la locurile tumorale îndepărtate care nu sunt expuse virusului. Ele eliberează, de asemenea, PAMPS virale și semnale de model molecular asociate pericolelor celulare (DAMP-uri; de exemplu, proteine ​​de șoc termic, proteină 1 a grupului cu mobilitate ridicată (HMGB1), calreticulină, ATP și acid uric) și citokine (de exemplu, tip I). IFN-urile, factorul de necroză tumorală-α (TNFα), IFNy și interleukina-12 (IL-12)), care promovează maturarea celulelor prezentatoare de antigen (APC), cum ar fi celulele dendritice. ^{Acestea activează CD4 +} specific antigenuluişi răspunsurile celulelor T CD8 ^{+ .} Odată activate, celulele T CD8 ⁺ se pot extinde în celule efectoare citotoxice cu capacitatea de a circula către locurile de creștere tumorală stabilită, unde mediază imunitatea antitumorală la recunoașterea antigenului (Fig. 2). Cu toate acestea, capacitatea naturală a virusurilor de a induce un răspuns imun antiviral gazdă poate avea ca rezultat eliminarea virusului prin anticorpi antivirali neutralizanți și/sau răspunsuri imune mediate de celule T citotoxice. Măsura în care neutralizarea virală influențează inducerea imunității tumorale este complexă și poate fi influențată de multe variabile, în special de caracteristicile virusului și micromediul tumoral.

Figura 2

Inducerea imunității antitumorale locale și sistemice de către virusurile oncolitice.

Eficacitatea terapeutică a virusurilor oncolitice este determinată de o combinație de liză directă a celulelor canceroase și activarea indirectă a răspunsurilor imune antitumorale. La infectarea cu un virus oncolitic, celulele canceroase inițiază un răspuns antiviral care constă în reticul endoplasmatic (RE) și stres genotoxic. Acest răspuns duce la suprareglarea speciilor reactive de oxigen (ROS) și la inițierea producției de citokine antivirale. ROS și citokinele, în special interferonii de tip I (IFN), sunt eliberați din celula canceroasă infectată și stimulează celulele imune (celule prezentatoare de antigen, CD8 ⁺celulele T și celulele ucigașe naturale (NK). Ulterior, virusul oncolitic provoacă oncoliză, care eliberează descendenți virali, modele moleculare asociate patogenului (PAMP), semnale de model molecular asociate pericolului (DAMP) și antigene asociate tumorii (TAA), inclusiv neo-antigene. Eliberarea descendenței virale propagă infecția cu virusul oncolitic. PAMP-urile (formate din particule virale) și DAMP-urile (cuprinzând proteine ​​ale celulei gazdă) stimulează sistemul imunitar prin declanșarea receptorilor de activare, cum ar fi receptorii Toll-like (TLR). În contextul mediului imun-stimulator rezultat, TAA și neo-antigenele sunt eliberate și absorbite de celulele prezentatoare de antigen. În mod colectiv, aceste evenimente au ca rezultat generarea de răspunsuri imune împotriva celulelor canceroase infectate viral, precum și de novo.răspunsurile imune împotriva TAA/neo-antigenilor afișate pe celulele canceroase neinfectate. CD40L, ligand CD40; ARNds, ARN dublu catenar; HMGB1, caseta de grup 1 de mare mobilitate; HSP, proteină de șoc termic; IL-2, interleukină-2; IL-2R, receptor IL-2; MHC, complex major de histocompatibilitate; ssRNA, ARN monocatenar; TCR, receptor de celule T; TNFα, factor de necroză tumorală-α.

Slide PowerPoint

Eliberarea de antigene asociate tumorii, în special în combinație cu eliberarea locală de citokine și DAMP, poate fi benefică pentru inducerea răspunsurilor imune înnăscute și adaptative împotriva celulelor canceroase (Fig. 2). Acest efect poate fi deosebit de important pentru mediarea regresiei tumorii la locurile tumorale îndepărtate care nu sunt injectate sau expuse la virus. Studiile preclinice au demonstrat importanța celulelor T CD8 ⁺ specifice tumorii în mediarea respingerii tumorii cu virusuri oncolitice ¹³ .

IFN-urile de tip I și DAMP-urile pot activa direct și celulele natural killer (NK), care fac parte din răspunsul imun înnăscut. Celulele NK pot ucide celulele țintă cu expresia de clasa I a complexului major de histocompatibilitate (MHC) reglată în jos, care este o apariție comună în celulele canceroase ^14 , 15 . Influența celulelor NK poate depinde atât de specia gazdă, cât și de caracteristicile virusului ^16 , 17 . Mai mult, celulele NK pot fi dăunătoare eficacității virusurilor oncolitice prin eliminarea celulelor infectate viral ¹⁸ . Factorii care influențează echilibrul dintre clearance-ul viral mediat imun și inducerea imunității antitumorale sunt incomplet înțeleși.

Contracararea evaziunii imune mediate de cancer. Celulele canceroase au dezvoltat strategii sofisticate pentru a evita distrugerea mediată imun. De exemplu, celulele tumorale și micromediul pot exprima receptori de suprafață inhibitori imun care inactivează celulele imune efectoare și secretă factori – cum ar fi IL-10, factorul de creștere transformator-β (TGFβ) și indoleamin-2,3-dioxigenaza (IDO) — care facilitează recrutarea celulelor imunosupresoare, cum ar fi macrofagele asociate tumorilor ¹⁹ și celulele supresoare derivate din mieloide ²⁰ , în locurile de creștere a tumorii ²¹ . Virușii oncolitici modifică acest micromediu supresor printr-o varietate de mecanisme care modifică mediul citokinelor și tipul de celule imune din micromediul tumoral.^22 , 23 . Aceste modificări promovează recunoașterea și eradicarea celulelor tumorale mediate imun și pot declanșa răspândirea antigenului și epitopului asociat tumorii ^24 , 25 . În prezența semnalelor de pericol și a angajării TLR, nivelurile IFN-urilor de tip I și ale altor mediatori inflamatori cresc, potențând și mai mult imunitatea sistemică împotriva cancerului.

Uciderea celulelor canceroase poate duce la eliberarea de noi antigene canceroase ( neo-antigene ) care ar fi putut fi ascunse anterior sistemului imunitar din cauza prezentării restrictive (Fig. 2). Acest efect a fost raportat recent în urma tratamentului pacienților cu cancer cu inhibitori imunoterapeutici ai punctelor de control ale celulelor T ^26 , 27 . Astfel de neo-antigene pot fi preluate de APC-urile locale în contextul unui mediu proinflamator, care poate declanșa un răspuns imun împotriva neo-antigenului. Dacă sunt generate noi clone de celule T, acestea pot fi capabile să circule și să ucidă celulele canceroase care exprimă antigen, inclusiv celulele canceroase care nu au fost infectate de virus. Răspunsul imun a fost, de asemenea, asociat cu un efect de observator „asociat imun”, în care eliberarea locală de perforine și granzime citotoxice poate duce la uciderea celulelor tumorale din apropiere, chiar și în absența expresiei directe a antigenului ²⁸. Acesta este diferit de efectul de observator al virusului ( Caseta 1 ), care se referă la replicarea virusului în interiorul celulelor canceroase și răspândirea acestuia la celulele canceroase neinfectate anterior.

Biodistribuția virusului oncolitic. Barierele fizice care reduc răspândirea virusurilor oncolitice includ necroza, calcificarea, hipoxia, acidoza, creșterea activității proteolitice și o presiune interstițială ridicată ^{29 , 30 , 31 .}. Mai mult, tumorile sunt dense cu matrice extracelulară și sunt slab vascularizate. Majoritatea studiilor clinice cu virusuri oncolitice (cum ar fi adenovirus, poxvirus, HSV-1, rujeolă și reovirus) au folosit injecții intratumorale pentru a ocoli barierele arhitecturale tumorale. Cu toate acestea, injecțiile intratumorale sunt limitate la tumorile care sunt accesibile fizic prin palpare clinică sau imagistică directă. După cum s-a discutat mai sus, injectarea unui virus oncolitic într-o leziune tumorală poate induce un răspuns sistemic anti-tumoral care poate depăși limitările fizice, așa cum a demonstrat în studiul clinic de fază III T-VEC OPTIM 3 ^.. Alți virusuri, cum ar fi virusul Seneca Valley, pot fi administrați intravenos din cauza rezistenței naturale la hemaglutinare, un proces care duce la clearance-ul viral prematur și la reducerea eliberării la locul tumorii după livrarea intravenoasă ³² .

Bariera hematoencefalică poate limita capacitatea unor viruși (și a multor alte medicamente) de a ajunge la tumorile cerebrale primare și metastazele cerebrale. Acest lucru poate fi depășit prin injectarea directă în tumorile sistemului nervos central (SNC) sau prin utilizarea rezervoarelor externe care comunică cu locurile tumorilor cerebrale. Parvovirusul traversează în mod natural bariera hematoencefalică, permițând livrarea acestui virus oncolitic pe cale intravasculară. Parvovirusul H-1PV a fost utilizat în studiile clinice cu glioblastom multiform (GBM) ³³ . Cu toate acestea, au existat relativ puține studii privind distribuția virusului oncolitic in vivo pentru a evalua penetranța virală în întregul SNC ^{33 , 34 , 35} .

Dimensiunea și eterogenitatea tumorii pot prezenta o altă barieră în biodistribuția virusului. Mai mult decât atât, celulele canceroase oprite în creștere în medii hipoxice sunt mai puțin susceptibile de a fi permisive la infecție ^{31 , 36 , 37} . Celulele stromale, cum ar fi fibroblastele asociate cancerului, pot fi infectate cu virusuri oncolitice, dar nu sunt permisive la replicarea virală. Astfel, fibroblastele pot acționa ca un rezervor de momeală pentru virusurile oncolitice, reducând livrarea virionilor infecțioși către celulele canceroase ³⁸ . Un alt mecanism care poate limita eficacitatea globală a virusurilor oncolitice este susceptibilitatea celulelor canceroase la apoptoză, care poate fi indusă de infecția virală sau de alți factori ³⁹. Dacă celulele suferă apoptoză prea rapid, acest lucru va reduce timpul de replicare și propagare virală și va scădea cantitatea de virus activ în tumoră, limitând în cele din urmă doza intratumorală activă.

Caseta 1: Efectul de observator al virusului

Metoda optimă de administrare a virusurilor oncolitice nu este stabilită, dar cele mai multe studii clinice au utilizat injectarea directă în tumorile stabilite, unele evaluând administrarea intravenoasă. Deoarece virusurile oncolitice sunt capabile de replicare, doar un număr limitat de celule tumorale trebuie infectate. Un efect semnificativ de observator poate fi anticipat prin replicarea locală a virusului și eliberarea acestuia în tumora înconjurătoare, unde particulele virale pot infecta apoi noi celule tumorale. Dacă răspunsul imun antiviral al gazdei nu neutralizează virusul, infecția poate continua să se propage. Includerea genelor sinucigașe în virusul oncolitic poate spori și mai mult efectul observatorului și poate obține o ucidere mult mai mare a celulelor. In orice caz,

Mergi la:

Dezvoltarea virusurilor oncolitice ca medicamente

Întrucât virusurile oncolitice sunt particule virale vii, proiectarea generală a strategiilor de virus oncolitic trebuie să ia în considerare abordări ale țintirii celulelor tumorale și atenuării patogenezei virale, precum și abordări pentru a limita imunogenitatea virală, promovând în același timp uciderea și imunogenitatea celulelor tumorale. Flexibilitatea ingineriei recombinante a permis explorarea unui număr de strategii pentru a spori eficacitatea virusurilor oncolitice.

Direcționarea virusurilor oncolitice către celulele canceroase. Mulți dintre virusurile oncolitice care se află în prezent în clinică au un tropism natural pentru proteinele de suprafață celulară care sunt exprimate aberant de celulele canceroase (Fig. 3). De exemplu, HSV-1 utilizează mediatorul de intrare a virusului herpes (HVEM) și nectine selectate pentru intrarea în celule. Acești receptori de suprafață sunt supraexprimați pe unele celule canceroase, inclusiv melanom și diferite carcinoame ⁴⁰ . Virusul rujeolei, în special tulpina Edmonston, utilizează receptorul de suprafață CD46 pentru intrarea în celule ⁴¹ . CD46 funcționează în mod normal pentru a preveni eliminarea celulelor prin inactivarea căii complementului a sistemului imunitar și este adesea supraexprimat de celulele canceroase ⁴². Virusul Coxsackie poate pătrunde în celule prin molecula de adeziune intercelulară 1 (ICAM-1; cunoscută și sub numele de CD54) și factorul de accelerare a degradarii (DAF; cunoscut și sub numele de CD55), care poate fi supraexprimat în cancere precum mielomul multiplu, melanomul și cancerul de sân (deși virusurile coxsackie pot folosi, de asemenea, nectine pentru intrarea în celule) ^{43 , 44 , 45} . Ecovirusul, un membru al familiei de enterovirusuri, are o specificitate crescută pentru celulele canceroase ovariane, deoarece utilizează domeniul I al integrinei α2β1 pentru intrarea în celule, care poate fi supraexprimat pe aceste celule ⁴⁶. Un alt membru al familiei de enterovirus, poliovirusul, a sporit specificitatea pentru diferite tipuri de cancer prin țintirea CD155, un receptor care poate afecta răspunsurile celulelor NK antitumorale și este supraexprimat de unele celule canceroase ²⁶ . Virusul Sindbis, un membru al familiei Togaviridae, vizează celulele canceroase care supraexprimă receptorul de laminină de 67 kDa, care promovează invazia și motilitatea celulelor canceroase ⁴⁷ .

Figura 3

Mecanisme de intrare virală în celulele canceroase.

Virușii oncolitici utilizează mai multe mecanisme pentru a pătrunde în celulele gazdă, inclusiv receptorii de suprafață celulară care sunt frecvent supraexprimați pe celulele canceroase. Unii virusuri sunt capabili să treacă prin mai mult de un receptor, iar unii receptori pot promova pătrunderea mai multor tipuri de virus. Unii virusuri folosesc endocitoza prin fuziunea membranei și formarea sincitiei pentru a pătrunde în celule. Se știe că anumiți virusuri oncolitice țintesc în mod preferențial celulele canceroase, dar receptorul de suprafață celulară pentru intrare nu a fost identificat. CAR, receptor coxsackievirus-adenovirus; DAF, factor de accelerare a dezintegrarii; HVEM1, mediatorul de intrare herpesvirus 1; ICAM-1, moleculă de adeziune intercelulară 1; LDLR, receptor de lipoproteine ​​cu densitate joasă; NDV, virusul bolii de Newcastle; SAR, receptori pentru acid sialic; SLAM, moleculă de activare limfocitară de semnalizare; VSV, virusul stomatitei veziculoase (VSV).

Slide PowerPoint

Virușii oncolitici pot fi, de asemenea, proiectați pentru a viza în mod direct receptorii unici de suprafață celulară exprimați de celulele canceroase. Exemplele includ adenovirusul Ad5/3-A24, care a fost modificat pentru a se lega de integrine care sunt puternic exprimate pe celulele canceroase ovariane și este în prezent investigat în studii clinice ^48 , 49 . Alte exemple de specificităţi modificate includ lentivirusuri pseudotipizate cu glicoproteina E2 modificată din virusul Sindbis, care s-a demonstrat că măreşte specificitatea pentru melanomul uman într-un model de xenogrefă de şoarece ⁵⁰ . Mai mult, virusul rujeolei a fost conceput pentru a exprima un anticorp cu lanț unic care recunoaște antigenul carcinoembrionar (CEA), un antigen tumoral care este exprimat selectiv pe anumite adenocarcinoame ⁵¹ .

Exploatarea căilor de semnalizare aberante în cancer. Un număr de ținte moleculare promovează acumularea și replicarea virusului în celulele tumorale. De exemplu, celulele tumorale supraexprimă frecvent familia de proteine ​​de supraviețuire a limfomului cu celule B (BCL), care este un semn distinctiv al transformării neoplazice. NDV vizează celulele canceroase care supraexprimă BCL-X _L , deoarece supraexprimarea acestei proteine ​​previne apoptoza și astfel permite timpul de incubare necesar virusului pentru a se multiplica și a forma sincitia necesar pentru răspândirea virală ⁵² .

Pe lângă familia BCL, calea de semnalizare RAS reglează multe aspecte ale carcinogenezei, inclusiv rezistența la moartea și proliferarea celulelor ^{53 , 54 , 55 , 56} (Fig. 4). Reovirusul și virusul vaccinia prezintă selectivitate naturală pentru celulele canceroase cu o cale de semnalizare RAS hiperactivă. În celulele normale sănătoase, reovirusul este capabil să intre în celulă și să înceapă să producă ARN virali, care activează calea PKR. PKR activat, la rândul său, inhibă translația proteinelor, prevenind producerea de particule virale și oprind răspândirea virusului ⁵⁷ . Cu toate acestea, celulele canceroase transformate cu RAS nu inițiază calea PKR, făcând celulele canceroase permisive la infecția virală și în cele din urmă la liza celulară ⁵³ . Un virus oncolitic HSV-1 atenuat, în care genele virale care codifică ICP34.5 și glicoproteina 11 scurtă unică (US11) sunt șterse, are ca rezultat liza preferențială a celulelor tumorale în comparație cu celulele normale 74 ^, 79 .. Acest lucru se întâmplă, în parte, deoarece aceste deleții fac HSV-1 incapabil să blocheze fosforilarea PKR, astfel încât se poate replica numai în celulele cu semnalizare PKR defectuoasă ⁸⁷ . Virusul Vaccinia, un membru al familiei poxvirusului, depinde de semnalizarea RAS indusă de receptorul factorului de creștere epidermic (EGFR) pentru replicarea virală ⁵⁴ . Poxvirusurile codifică liganzi care declanșează semnalizarea EGFR și astfel celulele canceroase care supraexprimă EGFR (și, prin urmare, au semnalizare RAS crescută) sunt mai permisive la infecția cu virusul vaccinia ⁵⁴ .

Figura 4

Virușii oncolitici pot viza căile oncogene.

Expresia oncogenelor și a altor proteine ​​aberante ale celulei gazdă în celulele canceroase poate promova replicarea virală și activitatea oncolitică. a | În celulele sănătoase, reglarea intrării și proliferării ciclului celular este asigurată de factori cheie, cum ar fi protein kinaza R (PKR), p16, retinoblastomul (Rb) și supresorul tumoral p53. Aceste elemente promovează apoptoza avortivă atunci când ciclul celular este dereglat. PKR poate ajuta, de asemenea, la reglarea transcripției și la inducerea apoptozei abortive atunci când celulele sunt infectate cu un virus. b| În celulele canceroase, reglarea ciclului celular și proliferarea celulară sunt de obicei perturbate din cauza activității oncogenelor și a pierderii genelor supresoare de tumori. Aceste modificări pot sprijini replicarea virală și pot promova moartea celulară indusă de virusul oncolitic. De exemplu, activarea mutațiilor în mica GTPază RAS crește proliferarea celulară, care este însoțită de creșterea producției de proteine. Acest proces poate fi uzurpat de virusurile oncolitice pentru a se replica mai eficient, așa cum sa raportat pentru virusul bolii Newcastle (NDV) și virusul stomatitei veziculoase (VSV). Mai mult, RAS hiperactiv blochează PKR, un proces care poate facilita replicarea selectivă a virusurilor oncolitice (cum ar fi reovirusul, virusul herpes simplex tip 1 (HSV-1), adenovirusul, virusul vaccinia și virusul gripal), în celulele canceroase mutante RAS. Unii viruși, cum ar fi adenovirusul, reovirusul și parvovirusul, vizează de preferință celulele canceroase mutante p53 sau p53-nule, deoarece celulele sănătoase cu p53 intactă suferă apoptoză abortivă la infecție. De asemenea, expresia aberantă a Rb și p16, care reglează intrarea în ciclul celular, poate face celulele canceroase susceptibile la virusuri oncolitice cum ar fi adenovirusul, HSV-1, virusul vaccinia și reovirusul. De asemenea, celulele canceroase reglează în mod frecvent proteina anti-apoptotică limfomul celulelor B-X_L (BCL-X _L ). Acest proces conferă un avantaj selectiv pentru virusurile oncolitice precum NDV, deoarece permite mai mult timp pentru replicarea virală. CDK, kinază dependentă de ciclină; EGFR, receptorul factorului de creștere epidermic; ERK, kinaza reglată de semnal extracelular; MAPK, protein kinază activată de mitogen; MEK, MAPK/ERK kinaza; PDGFR, receptorul factorului de creștere derivat din trombocite.

Slide PowerPoint

Celulele canceroase au adesea defecte în mecanismul antiviral bazat pe semnalizarea IFN de tip I, oferind unor viruși un avantaj de replicare în celulele canceroase. Acestea includ virusul vaccinia ⁵⁴ , NDV ⁵⁸ , virusul mixomului de iepure ⁵⁹ , oreionul ⁶⁰ , alfavirusurile ⁶⁰ şi variantele virusului stomatitei veziculoase (VSV) ⁶¹ .

IFN-urile de tip I sunt critice pentru răspunsurile antivirale și antitumorale în celulele sănătoase nu numai pentru că promovează răspunsurile imune pentru a elimina virusul, ci și pentru că reduc proliferarea celulară și activează proteina pro-apoptotică p53 (Ref. 62 ) . Mai multe tipuri de cancer inactivează această cale, fie prin reducerea expresiei IFN-urilor de tip I, fie prin limitarea semnalizării IFN-urilor de tip I prin expresia redusă a receptorului sau prin modificarea semnalizării în aval (Figurile 1,​,2).2). Astfel, virusurile oncolitice au o specificitate crescută pentru celulele canceroase și mediile în care răspunsurile IFN de tip I sunt limitate, deoarece în celulele sănătoase virusurile sunt curățate prin răspunsuri mediate de IFN.

Virușii oncolitici pot fi, de asemenea, proiectați pentru a profita de căile de semnalizare anormale din celulele canceroase prin inserarea de promotori care sunt mai activi în celulele canceroase sau care sunt restricționați de țesut. De exemplu, un adenovirus (CV706), în care E1A (o proteină adenovirală care inhibă ciclul celular) a fost plasat sub controlul promotorului pentru antigenul specific de prostată (PSA), este în prezent evaluat la pacienții cu cancer de prostată ⁶³. Acest virus nu produce E1A în celulele sănătoase și aceste celule suferă apoptoză, limitând astfel proliferarea virală în țesutul sănătos. Cu toate acestea, în celulele canceroase de prostată promotorul PSA este foarte activ și E1A este exprimat selectiv, rezultând proliferarea adenovirusului și liza celulară mediată de virus. Într-o manieră similară, adenovirusul oncolitic KH901 a fost proiectat pentru a exprima E1A sub controlul promotorului de transcriptază inversă a telomerazei umane (TERT), care este activat într-un număr mare de cancere ⁶⁴. În plus, două situsuri de legare ale factorului de transcripție E2F1 (un regulator al ciclului celular) au fost incluse în promotorul TERT pentru a restricționa proliferarea la celulele care se divizează activ. Un alt exemplu este adenovirusul oncolitic CG0070, pentru care replicarea este limitată la celulele defecte de retinoblastom (Rb) (o mutație comună în cancer) deoarece expresia E1A a fost plasată sub reglarea promotorului E2F1 ⁶⁵ . În celulele sănătoase, Rb inhibă E2F, inhibând astfel transcripția E1A ⁶⁶. Mai mult, adenovirusurile au fost proiectate pentru a se replica selectiv în medii hipoxice, cum ar fi cele găsite în interiorul tumorilor, prin plasarea genei E1A sub reglare transcripțională de către factorul de transcripție indus de hipoxie HIF-1a; această strategie sa dovedit a fi eficientă într-un model de xenogrefă murină de gliom ⁶⁷ . Mai multe adenovirusuri oncolitice, inclusiv ONYX-015 și H101, au fost proiectate cu o deleție în gena care codifică proteina E1B, care se poate lega și inactiva proteina pro-apoptotică p53 (Ref. 85, 86 ) .). Astfel, celulele sănătoase care sunt infectate cu acești virusuri pot suferi apoptoză abortivă mediată de p53, în timp ce celulele canceroase care inactivează în mod obișnuit p53 rămân susceptibile la infecția virală. În plus, acești adenovirusuri proliferează în mod preferabil și lizează celulele canceroase cu deficit de p53, care reprezintă aproape 50% din toate tipurile de cancer.

O altă abordare pentru îmbunătățirea specificității tumorii post-intrare a fost codificarea secvențelor sintetice de țintire a miARN (miRTS) în regiunea 3′ netradusă (UTR) a genei de fuziune a virusului rujeolic. Aceste secvențe leagă microARN-urile celulare (miARN) și reprimă replicarea virală. Deoarece celulele normale și canceroase prezintă expresie diferențială a elementelor miARN înrudite, virusul oncolitic modificat cu miRTS poate fi blocat de la replicarea în celulele normale în care sunt exprimate miARN-uri specifice. Un astfel de construct a fost proiectat pentru utilizare în gliom, unde s-a demonstrat că limitează replicarea virală în neuronii care exprimă în mod constitutiv niveluri ridicate de miR-7, permițând în același timp proliferarea în celulele gliomului care în mod frecvent reduc miR-7 (Ref. 68 ) .

Atenuarea patogenezei virale.Virușii oncolitici sunt viruși vii care pot provoca toxicitate acută și, în unele cazuri, infecții latente și boli cronice. Deși activitatea oncolitică poate fi cea mai profundă cu virusurile native, potențialul de patogeneză virală poate fi, de asemenea, mare, rezultând un raport beneficiu-risc limitat. Potențiala patogenitate depinde în mare măsură de virus, de prezența factorilor de atenuare naturali sau artificiali (de exemplu, virulență și gene imuno-evazive și care promovează latența) și răspunsul imun al gazdei. Până în prezent, puține evenimente adverse grave au fost raportate în studiile clinice, dar urmărirea pacienților este adesea scurtă sau incompletă. Majoritatea virusurilor oncolitice relevante din punct de vedere clinic utilizează vectori atenuați sau variante mai puțin virulente care apar în mod natural ale anumitor virusuri pentru a preveni toxicitatea acută și pe termen lung.⁶⁹ (vezi Informații suplimentare S1 (tabel) ) și tulpina Edmonston a virusului rujeolic (utilizată în mod obișnuit pentru vaccinarea profilactică împotriva rujeolei), care a fost selectată pentru studiile clinice la pacienții cu GBM (Tabelul 3).

Tabelul 3

Viruși oncolitici cheie în studiile clinice

Slide PowerPoint

Virus	Producător	Modificare	Numărul de studii clinice			cancere
			Faza I	Faza II	Faza III
Adenovirus
Onix-015	Onyx Pharmaceuticals	Himera tip 2/5, ștergere E1B	6	6	0	Cancer la cap și gât, cancer pancreatic, cancer ovarian, cancer colorectal, glioame, metastaze pulmonare și metastaze hepatice
H101	Shanghai Sunwaybio	Ștergere E1B, ștergere parțială E3	1	2	1	Carcinom cu celule scuamoase și cancer de cap și gât
DNX-2401	DNAtrix	Inserarea Δ24-RGD	4	0	0	Glioblastom, cancer ovarian
VCN-01	VCN Biosciences	Inserarea hialuronidază PH20	2	0	0	Cancer pancreatic
Colo-Ad1	PsiOxus Therapeutics	Ad11/3 himeric grupa B	1	2	0	Cancer de colon, NSCLC, cancer renal, cancer de vezică urinară și cancer ovarian
ProstAttack	Advantagene	Inserarea TK	4	1	1	Cancer pancreatic, cancer pulmonar, cancer de sân, mezoteliom și cancer de prostată
Oncos-102	Oncos Therapeutics	Inserarea Δ24-RGD-GM-CSF	1	0	0	Cancerele solide
CG0070	Genesys rece	Ștergerea GM-CSF și E3	1	1	1	Cancerul vezicii urinare
Virusul vaccinului
Pexa-vac (JX-594)	Jennerex Biotherapeutics	Inserarea GM-CSF, perturbarea TK	7	6	0	Melanomul, cancerul hepatic, cancerul colorectal, cancerul mamar și carcinomul hepatocelular
GL-ONC1	Lux general	Perturbarea TK, perturbarea hemaglutinei, perturbarea F14.5L	4	1	0	Cancer pulmonar, cancer de cap și gât și mezoteliom
Herpesvirus
T-LUCRUL	Amgen	Ștergerea ICP34.5, ștergerea US11, inserarea GM-CSF	2	3	2	Melanomul, cancerul capului și gâtului și cancerul pancreatic
G207	Medigen	Ștergere ICP34.5, întrerupere UL39	3	0	0	Glioblastom
HF10	Takara Bio	Ștergerea UL56, selectată pentru o singură copie parțială a UL52	2	1	0	Cancer de sân, melanom și cancer pancreatic
SEPREHVIR (HSV1716)	Virttu Biologics	Ștergerea ICP34.5	5	1	0	Carcinom hepatocelular, glioblastom, mezoteliom, neuroblastom
OrienX010	OrienGene Biotehnologie	Ștergerea ICP34.5, ștergerea ICP47, inserarea GM-CSF	1	0	0	Glioblastom
Reovirus
Reolizină	Biotehnologie oncolitică	Nici unul	15	9	0	Gliom, sarcoame, cancer colorectal, NSCLC, cancer ovarian, melanom, cancer pancreatic, mielom multiplu, cancer la cap și gât
Virusul Valea Seneca
SVV-001	Neotropix	Nici unul	3	1	0	Tumori cu caracteristici neuroendocrine, neuroblastom și cancer pulmonar
Virusul Coxsackie
Cavatak (CVA21)	Viralytics	Nici unul	3	1	0	Melanomul, cancerul de sân și cancerul de prostată

Deschide într-o fereastră separată

GM-CSF, factor de stimulare a coloniilor granulocite-macrofage, NSCLC, cancer pulmonar fără celule mici; RGD, motiv Arg-Gly-Asp; TK, timidin kinaza; US11, 11 glicoproteină scurtă unică.

Un exemplu de virus oncolitic atenuat proiectat este T-VEC pe bază de HSV-1. Se știe că HSV-1 provoacă neurovirulență și infecție latentă. Toxicitatea este mediată de produsul genei virale ICP34.5, care contracarează răspunsul IFN de tip I și antagonizează calea de semnalizare PKR în celulele care nu se divid ^{56 , 70 , 71 , 72 , 73} . ICP34.5 este șters în T-VEC, ceea ce înseamnă că nu ar trebui să poată crește în neuroni sau să medieze infecția latentă. Până în prezent, nu au existat raportări de infecție latentă cu T-VEC sau alți vectori HSV-1 atenuați ⁷⁴ .

Virusul Vaccinia a fost, de asemenea, atenuat pentru a-și limita activitatea litică la celulele canceroase. În infecțiile cu virus vaccinia neatenuat, o proteină virală numită factor de creștere vaccinia (VGF) este secretată și acționează asupra gazdei EGFR pentru a activa calea de semnalizare RAS. O astfel de activare promovează proliferarea celulară, ceea ce duce la creșterea producției de timidin kinaza (TK), care ajută la promovarea replicării virale. Cu toate acestea, atenuarea virusului vaccinia prin deleția VGF face dificilă replicarea în celulele normale și permite proliferarea virală numai în celulele cu semnalizare aberantă EGFR-RAS, așa cum se găsește frecvent în celulele canceroase ^64 , 75 . O altă componentă care este necesară pentru infectarea celulelor sănătoase este proteina vaccinia B18R, care blochează semnalizarea IFN de tip I ^76, 77 . Prin atenuarea virusului vaccinia prin deleția B18R, celulele sănătoase devin susceptibile la răspunsul antiviral IFN de tip I și infecția este limitată. Cu toate acestea, celulele canceroase perturbă în mod obișnuit calea IFN-ului de tip I pentru a evita sistemul imunitar și, prin urmare, sunt susceptibile la infecție și la liză ulterioară. Mai mult, deleția B18R poate crește activitatea virusului vaccinal oncolitic deoarece IFN-urile de tip I produse ca urmare a infecției cu vaccinia a tumorii nu sunt blocate de ^B18R78 .

Spre deosebire de ștergerea genelor virale patogene, expresia genelor de virulență poate fi, de asemenea, limitată la țesuturile tumorale prin încorporarea de promotori care reglează expresia genelor de virulență. Așa cum s-a descris mai sus, adenovirusurile au fost modificate cu expresia E1A și E1B limitată la celulele tumorale prin reglarea transcripțională de către promotori specifici tumorii. Deși revenirea la un virus nativ prin recombinare omoloagă naturală rămâne o preocupare teoretică, nu există dovezi că acest lucru se întâmplă în clinică.

Creșterea imunității antitumorale. Procesul de eliminare a tumorii prin stimularea imună este esențial pentru activitatea antitumorală a virusurilor oncolitice și au fost concepute mai multe strategii pentru a proiecta virusurile oncolitice, astfel încât acestea să poată stimula mai eficient răspunsurile imune antitumorale. De exemplu, răspunsurile imune anti-tumorale pot fi mărite prin expresia virală a citokinelor proinflamatorii și/sau a moleculelor co-stimulatoare ale celulelor T. Această strategie a fost bine descrisă pentru viruși precum HSV-1, adenovirus și virus vaccinia. Studiile HSV-1 la șoareci au demonstrat respingerea tumorilor de flanc contralaterale, neinjectate numai atunci când GM-CSF, o citokină care promovează acumularea și maturarea celulelor dendritice, a fost introdusă în genomul viral 74 ^, 79 .. Se crede că GM-CSF îmbunătățește prezentarea antigenului tumoral și stimulează răspunsurile robuste ale celulelor T. GM-CSF a fost inclus în T-VEC80 ^, adenovirusurile CG0070 şi CGTG-102 (Ref. 81 ) şi virusul vaccinia JX-594 (Ref. 82 ).

Un adenovirus care exprimă proteina de șoc termic HSP70 în celulele canceroase, care crește însoțirea proteinelor la proteaze care îmbunătățesc degradarea și procesarea proteinelor, a fost utilizat pentru a crește prezentarea antigenului tumoral ⁸³ . Această abordare poate avea, de asemenea, un rol în răspândirea epitopului, deoarece APC-urile preiau în mod preferențial peptidele legate de HSP70.

Pentru virusurile oncolitice pe bază de HSV-1, cum ar fi T-VEC, au fost concepute, de asemenea, strategii pentru a îmbunătăți răspunsurile imune prin ștergerea proteinei HSV-1 ICP47. ICP47 blochează funcția TAP (transportor asociat cu procesarea antigenului) și astfel împiedică celulele infectate să prezinte antigen la celulele T CD8 ^+ 84 .

Unele tipuri de cancer, cum ar fi glioblastomul, sunt în mod inerent rezistente la apoptoză, chiar și atunci când sunt infectate cu viruși, din cauza dereglării căilor apoptotice. Cu toate acestea, sa demonstrat că un parvovirus oncolitic H-1PV ucide celulele gliomului prin activarea căii de moarte imunogene mediată de catepsină ⁸⁸ . Mai mult, parvovirusul poate induce, de asemenea, un răspuns imun împotriva GBM, potențial printr-un efect de observator care implică o creștere a citokinelor inflamatorii (cum ar fi IFNy) și eliberarea de antigen tumoral ^89 , 90 .

Îmbunătățirea activității litice. Includerea „genelor de sinucidere” (gene care fac celulele mai sensibile la apoptoză sau la terapia cu alte medicamente) în virusurile oncolitice le poate spori capacitatea de a ucide direct celulele canceroase ^{93 , 94 , 95} . De exemplu, moleculele pro-apoptotice legate de ligand de inducere a apoptozei (TRAIL) sau TNFa au fost incluse în constructele virale pentru a spori moartea celulară și a declanșa un răspuns imun ^91 , 92 .

Utilizarea promotorilor îmbogățiți cu tumori/specifici țesuturilor pentru a exprima în mod preferențial genele suicidare în celulele canceroase a avut succes în limitarea efectelor secundare și îmbunătățirea eficacității terapeutice a virusurilor oncolitice în mai multe modele preclinice. De exemplu, adenovirusul Ad-OC-HSV-TK, care este în dezvoltare pentru tratamentul tumorilor osoase, codifică gena pentru HSV-1 TK condusă de promotorul osteocalcinei ⁹⁶ . HSV-1 TK convertește analogii timidinei (cum ar fi ganciclovirul) în monofosfați, care sunt încorporați în ADN-ul celulelor care se replic, ducând la încetarea sintezei ADN-ului și, în cele din urmă, la moartea celulelor ⁹⁷. În acest sistem, expresia TK este limitată la celulele cu un promotor activ de osteocalcină, iar acest lucru crește susceptibilitatea acestora la tratamentul cu analogul timidinei ganciclovir. Cu toate acestea, deoarece ganciclovirul poate bloca replicarea virală, această abordare poate inhiba activitatea virusului oncolitic ^98 , 99 .

Alte două gene suicidare care au fost testate sunt citozin deaminaza bacteriană (CD) și proteina morții adenovirusului (ADP) ^100 , 101 . CD poate transforma 5-fluorocitozina în 5-fluorouracil (5-FU), care este citotoxic. ADP este o glicoproteină a membranei nucleare care este necesară în stadiile târzii ale infecției cu adenovirus pentru liza celulară eficientă și eliberarea particulelor virale. Activitate litică sporită a fost raportată pentru un adenovirus oncolitic care a avut gena adp inserată în locusul adenoviral E3, rezultând în supraexprimarea ADP ¹⁰¹ .

Limitarea răspunsurilor imune antivirale. Deși stimularea imună este esențială pentru activitatea antitumorală a virusurilor oncolitice, acest efect este echilibrat de eliminarea potențial rapidă a virusului prin imunitatea antivirală. Mai mult, oamenii sunt expuși în mod natural (sau artificial prin vaccinare) la virusuri oncolitice și, prin urmare, pot avea anticorpi de neutralizare preexistenți sau imunitate celulară împotriva unor virusuri oncolitice.

O strategie de limitare a neutralizării virusului este utilizarea serotipurilor virale alternative. Există mai multe serotipuri atât pentru adenovirusuri, cât și pentru VSV, ceea ce permite schimbarea serotipului între injecții pentru a preveni neutralizarea anticorpilor. Deși virusul rujeolic nu schimbă în mod natural serotipurile, s-a demonstrat că virusurile rujeolice care sunt proiectate pentru a imita schimbarea serotipului limitează titrurile de anticorpi neutralizanți împotriva virusului ¹⁰² . Alte strategii pentru a depăși clearance-ul viral includ PEGilarea (conjugarea covalentă cu polietilen glicol) a învelișului viral (VSV și adenovirus) și acoperirea polimerului (adenovirus) pentru a preveni legarea și neutralizarea anticorpilor 103 ^{, 104 , 105 .}. Acoperirea polimerică a adenovirusului reduce țintirea prin acoperirea proteinelor virale necesare pentru intrarea în celule, dar simultan crește timpul de circulație. De asemenea, anchetatorii au reușit să protejeze virusurile oncolitice de anticorpi prin utilizarea purtătorilor de celule (cum ar fi celulele stem mezenchimale) care sunt infectați ex vivo și apoi transferați înapoi într-o gazdă pentru traficul către locurile tumorale ^106 , 107 .

Răspunsurile celulelor T specifice HSV-1 pot fi atenuate prin exprimarea produsului genei virale US11, care blochează prezentarea antigenului, limitând astfel detectarea de către celulele T și prelungind infecția virală ¹⁰⁸ .

Pe lângă modificarea virusului, s-au făcut încercări de suprimare a sistemului imunitar al gazdei – de exemplu, prin pretratament cu ciclofosfamidă. S-a demonstrat că această strategie sporește eficacitatea oncolitică a HSV- într-un model de gliom ¹⁰⁹ .

Creșterea biodisponibilității virusului. În plus față de strategiile care evită neutralizarea virală, așa cum este descris mai sus, o serie de studii preclinice au investigat și alte metode pentru creșterea biodisponibilității virusului oncolitic. De exemplu, tratamentul cu virusuri oncolitice a fost combinat cu tratamente vasoactive sau vaso-normalizante cum ar fi histamina ¹¹⁰ , nitroglicerina ¹¹⁰ , hipertermia locală ¹¹¹ , paclitaxel în doză mică ¹¹² , bevacizumab ¹¹³ şi bradikinina ¹⁶ pentru a îmbunătăţi livrarea virală.

Penetranța virală poate fi, de asemenea, îmbunătățită prin pretratarea micromediului tumoral cu enzime proteolitice (adică hialuronidază sau colagenază) care pot sparge bariera asemănătoare site-ului reprezentată de matricea extracelulară (ECM) ^114 , 115 . Virușii oncolitici au fost, de asemenea, proiectați pentru a exprima enzime care degradează ECM, cum ar fi hialuronidază, care s-a dovedit că crește diseminarea tumorii și activitatea terapeutică într-un model de xenogrefă de melanom ¹¹⁶ .

Mai mult, virusurile oncolitice sunt selectate și/sau proiectate pentru a depăși barierele fizice ale presiunii interstițiale și mediul acid și hipoxic prezent în tumori prin răspândirea între celulele canceroase după inducerea fuziunii celulare. Acest proces protejează virusul de limitările fizice asociate cu nevoia de propagare extracelulară și limitarea infecției la spațiul intracelular. De exemplu, NDV, coronavirus, orthomyxovirus și paramixovirus folosesc glicoproteine ​​membranare fusogene (FMG) pentru a propaga infecția virală între celule. Mai mult, VSV a fost proiectat pentru a exprima glicoproteina F ^{117 mutantă fusogenă NDV.}iar virusul Sindbis a fost proiectat pentru a exprima glicoproteina de anvelopă hiperfusogenă a virusului leucemiei maimuțelor gibon pentru a transmite propagarea virală pe bază de fusogen ¹¹⁸ . Virusul rujeolic a fost conceput pentru a activa glicoproteina F membranară fusogenă în contextul unor niveluri ridicate de metaloproteinaze matriceale (MMP), așa cum sunt prezente în tumori, mai degrabă decât prin reglarea sa normală de către furină ¹¹⁹ .

Mergi la:

Virușii oncolitici în dezvoltare clinică

Există numeroase virusuri oncolitice în dezvoltare clinică (vezi Informații suplimentare S1 (tabel) ), dintre care majoritatea se află în studii clinice de fază incipientă. Aici, limităm discuțiile detaliate la virușii care sunt în prezent în faza III de dezvoltare. În prezent, adenovirusurile și herpesvirusurile au fost cele mai larg evaluate în clinică.

Virușii herpes simplex. HSV-1 este un membru al familiei alphaherpesvirus, care include specia varicela. HSV-1 este un virus ADN dublu catenar cu un genom mare (152 kb), în care ~ 30 kb codifică gene care nu sunt esențiale pentru infecția virală. Replicarea HSV-1 are loc în nucleu; totuși, HSV-1 nu provoacă mutageneză inserțională. Aceste proprietăți fac HSV-1 un candidat atractiv pentru dezvoltarea virusului oncolitic. Cu toate acestea, HSV-1 este un agent patogen uman major care provoacă leziuni ale pielii și erupții cutanate, în plus, poate infecta nervii periferici și poate intra într-un stadiu latent. HSV-1 poate infecta multe tipuri de celule, inclusiv celulele epiteliale în care intră prin glicoproteinele de suprafață virale, celulele imune prin HVEM și neuronii prin nectinele de suprafață (nectina 1 și nectina 2).

T-VEC este cel mai avansat virus oncolitic bazat pe HSV-1. Pentru a reduce patogenia concomitent cu sporirea infectivității celulelor tumorale selective, T-VEC conține deleții ale genei de neurovirulență ICP34.5 și inhibitorul prezentării antigenului ICP47 (Ref. 74 , 79 ). După cum s-a discutat mai sus, ICP34.5 este esențial pentru blocarea răspunsului antiviral PKR-IFN al gazdei și este necesar pentru infecțiozitatea HSV-1 a neuronilor ¹²⁰. În T-VEC, două gene ICP34.5 sunt șterse și acest lucru îmbunătățește selectivitatea celulelor canceroase și previne infectarea neuronilor, reducând astfel semnificativ patogenia generală a HSV-1. Deleția ICP47 are ca rezultat prezentarea de antigene virale atât de către celulele sănătoase, cât și de către celulele canceroase, ceea ce duce la reținerea infecției în țesuturi sănătoase și la distrugerea mediată imun a celulelor canceroase care propagă selectiv HSV-1 oncolitic. Deleția ICP47 induce, de asemenea, activarea precoce a promotorului US11. HSV-1 US11 blochează fosforilarea PKR și, prin urmare, împiedică celulele canceroase să sufere apoptoză avortivă atunci când sunt infectate ⁸⁷. Astfel, exprimarea HSV-1 US11 mai devreme în ciclul infecției virale crește activitatea terapeutică oncolitică. În cele din urmă, gena care codifică GM-CSF a fost introdusă în genomul viral în locul genelor ICP34.5 pentru a îmbunătăți inducerea imunității antitumorale.

În studiile preclinice, T-VEC a demonstrat efecte litice puternice împotriva mai multor linii celulare tumorale, în special melanomului și celulelor canceroase pancreatice ⁷⁹ . T-VEC a fost evaluat în studii clinice avansate pentru pacienții cu melanom, cancer pancreatic, tumori ale capului și gâtului și la 14 pacienți cu cancer de sân într-un studiu clinic de fază I.

Într-un studiu clinic multi-instituțional de fază II, pacienții cu melanom în stadiul IIIC și IV nerezecabil au fost tratați cu o doză inițială de 106 ^pfu (unități formatoare de placă) per ml T-VEC administrată prin injecție intratumorală pentru a permite seroconversia și au urmat 3 săptămâni mai târziu cu ¹⁰⁸ pfu per ml administrat la fiecare 2 săptămâni după aceea până la răspunsul clinic maxim, toxicitate inacceptabilă sau progresia bolii ^79 , 121. În acest studiu, au fost înrolați 50 de participanți și a fost raportată o rată de răspuns obiectiv de 26% cu toxicitate constituțională în general de grad scăzut, inclusiv febră, oboseală și reacții locale la locul injectării. T-VEC a fost apoi evaluat într-un studiu clinic de fază III prospectiv, randomizat la 436 de pacienți cu melanom în stadiul IIIB, IIIC sau IV nerezecabil ¹²² . Studiul și-a atins obiectivul principal, cu o rată de răspuns durabilă (definită ca un răspuns obiectiv care începe în decurs de 12 luni de tratament și durează cel puțin 6 luni) de 16,3% la pacienții cărora li sa administrat T-VEC, comparativ cu 2,1% la pacienții cărora li s-a administrat MG. -CSF (odds ratio = 8,9; P <0,0001) ³. Aceasta a inclus răspunsuri în toate leziunile, injectate și neinjectate. A fost raportată o rată de răspuns obiectiv de 26,4% (comparativ cu 5,7% pentru participanții tratați cu GM-CSF), cu 10,9% obținând un răspuns complet. În plus, pacienții cărora li sa administrat T-VEC au avut o supraviețuire globală mediană îmbunătățită (23,3 luni față de 18,9 luni pentru pacienții tratați cu GM-CSF), deși studiul nu a fost alimentat pentru supraviețuire. Un efect deosebit de puternic a fost observat la pacienții cu tumori M1a în stadiul III și IV, sugerând că T-VEC ar putea fi deosebit de potrivit pentru tratamentul pacienților în stadiu incipient cu boală viscerală mai puțin extinsă. Tratamentul a fost bine tolerat, majoritatea evenimentelor adverse fiind legate de febră, frisoane, greață, oboseală și reacții locale la locul injectării. Pe baza acestor rezultate, un grup consultativ FDA a votat pentru aprobarea T-VEC,

T-VEC este, de asemenea, studiat în combinație cu imunoterapeutice ipilimumab și pembrolizumab la pacienții cu melanom ( caseta 2 ). Aceste combinații pot fi mai potrivite pentru pacienții cu boală mai avansată și mai intens tratată în prealabil. Datele preliminare dintr-un studiu clinic de fază Ib cu T-VEC și ipilimumab, un anticorp monoclonal care blochează antigenul citotoxic al limfocitelor T (CTLA4), un inhibitor al punctului de control al celulelor T, au raportat rate de răspuns de 50%, cu un răspuns complet de 22% rata ¹²³ . Aceste rezultate sunt acum evaluate într-un studiu clinic randomizat.

Adenovirusuri.Adenovirusul este un virus ADN dublu catenar, gol (neîncapsulat), cu un genom liniar de ~35 Kb încapsulat de o capsidă icosaedrică cu un diametru virion care variază de la 70 la 90 nm. Deoarece are un genom mare, secvențele lungi de ADN pot fi încorporate, permițând astfel mai multe modificări de inginerie. Adenovirusurile infectează în mod obișnuit atât oamenii, cât și animalele și pot fi transmise prin aerosoli și contact direct. Acest lucru are ca rezultat faptul că majoritatea populației este seropozitivă pentru expunerea la adenovirus. Deși asimptomatice la gazdele imuno-competente, infecțiile adenovirale pot provoca boli la nou-născuți și la pacienții imunodeprimați. Adenovirusul intră în celulă folosind receptorul coxsackie-adenovirus (CAR). La intrarea în celulă, adenovirusul circulă către nucleu unde exprimă gene timpurii adenovirale (codifică E1A și E1B), care sunt necesare pentru propagarea virală. În mod specific, E1A și E1B vizează supresorii tumorali p53 și proteina asociată retinoblastomului (pRb) pentru a promova intrarea în ciclul celular. Cu toate acestea, în celulele sănătoase, țintirea regulatorilor ciclului celular gazdă p53 și pRb de către proteinele adenovirale E1A și E1B are ca rezultat apoptoză avortivă și eliminarea virusului.^124 , 125 . Capacitatea de a atenua cu ușurință patogenitatea virală și de a codifica transgene străine mari face ca adenovirusul să fie un vector atractiv pentru dezvoltarea clinică.

Există 57 de serotipuri de adenovirus, care sunt clasificate în categoriile A–G pe baza proprietăților virale de aglutinare și potențial oncogen în modelele de rozătoare. Adenovirusurile din grupa C sunt non-oncogene și, în special, serotipurile 2 și 5 au fost evaluate ca agenți potențiali oncolitici. Rezultatele timpurii din studiile clinice efectuate la sfârșitul anilor 1950 în cancerul de col uterin au demonstrat activitate terapeutică limitată cu adenovirusul viu replicat, care poate fi explicată, parțial, prin expresia limitată a CAR pe celulele canceroase ¹²⁶ . Într-un raport recent, contaminarea cu virusul adeno-asociat (AAV) a unui preparat de adenovirus a dus la o activitate oncolitică îmbunătățită de către adenovirus, care poate fi o strategie pentru îmbunătățirea activității terapeutice ¹²⁷. Până în prezent, studiile clinice au arătat că terapia cu adenovirus oncolitic are ca rezultat puține evenimente adverse, demonstrând un profil de siguranță favorabil.

Genomul adenoviral este relativ ușor de modificat, iar transgenele de până la 10 kb pot fi inserate fără a perturba infecția virală. Prin urmare, adenovirusurile au fost proiectate pentru a viza receptorii de suprafață care sunt mai universal suprareglați pe celulele canceroase. Acest concept este evaluat clinic în cancerul ovarian, folosind un virus Ad5/3-Δ24 modificat ¹²⁸ . Deoarece cancerul ovarian are un model de expresie variabil al CAR, capsida virusului Ad5/3-Δ24 a fost modificată pentru a încorpora un motiv RGD (Arg-Gly-Asp) în bucla HI a butonului de fibre (o porțiune a stratului exterior de adenovirus). capside) ⁴⁸ . Această modificare permite intrarea în celule prin legarea adenovirusului la alți receptori, inclusiv integrinele αvβ3 și αvβ5 ¹²⁹, care sunt foarte exprimate pe celulele canceroase ovariane ⁴⁹ . DNX-2401, un adenovirus cu acest motiv RGD, a intrat în studiile clinice de fază I în gliom. Pentru a îmbunătăți în continuare țintirea adenovirusurilor, mozaicurile (serotipurile combinate) sunt în curs de dezvoltare. În mod specific, adenovirusul serotip 35 (Ad35) utilizează preferenţial CD46 mai degrabă decât CAR pentru intrarea în celule ¹³⁰ . Expresia CD46 împiedică celulele normale să fie recunoscute de complement și ulterior eliminate. S-a demonstrat că celulele canceroase supraexprimă CD46 și subminează recunoașterea în acest mod. Prin urmare, un adenovirus oncolitic mozaic a fost proiectat cu secvența de legare la CAR a lui Ad5 înlocuită cu secvența de legare a CD46 a lui Ad35 (Ref. 131 ).

Un număr de adenovirusuri oncolitice în dezvoltare clinică au fost concepute pentru a profita de căile de semnalizare aberante din celulele canceroase. Exemple sunt adenovirusul cu un E1A condus de PSA care este testat în cancerul de prostată ⁶³ , adenovirusurile proiectate pentru a utiliza promotorul TERT și promotorul E2F1 pentru a regla expresia E1A ⁶⁴ și adenovirusurile ONYX-015 și H101, care au o deleție în porţiunea de E1B care inactivează p53 (Ref. 34 , 118 ).

Virusul ONYX-015 a fost evaluat în mai multe studii clinice de cancer, dar au fost raportate răspunsuri limitate, iar dezvoltarea clinică a fost oprită în 2003 (Ref. 132 ). Poate exista un interes reînnoit pentru acest agent, având în vedere înțelegerea îmbunătățită a virusurilor oncolitice și potențialul pentru scheme de terapie combinată cu alți agenți anticancer.

H101 este un adenovirus eliminat cu E1B care a fost aprobat pentru tratamentul cancerului nazofaringian în China. H101 a fost evaluat într-un studiu clinic randomizat de fază III pe 160 de participanți cu carcinoame cu celule scuamoase avansate ale capului și gâtului sau esofagului ¹³³ . Pacienții au fost randomizați pentru chimioterapie (cisplatină și 5-FU pentru pacienții naivi cu chimioterapie sau adriamicină și 5-FU pentru pacienții care au primit chimioterapie cu platină anterior) cu sau fără adaos de H101 (5 × 10 11 până la 1,5 × 10 ¹² ) ^.particule virale pe zi prin injectare intratumorală) timp de 5 zile consecutiv la fiecare 3 săptămâni. Un total de 123 de participanți au finalizat tratamentul și au fost evaluați pentru răspuns. Pacienții care au fost tratați cu cisplatină/5-FU și H101 au avut o rată de răspuns de 78,8%, comparativ cu 39,6% în cohorta doar cu cisplatină/5-FU. Pacienții care au primit virusul adriamicină/5-FU și H101 și grupul numai cu adriamicină/5-FU au avut o rată de răspuns de 50%, dar numărul de participanți la aceste grupuri a fost mic ( n= 18). A existat o diferență semnificativă în rata de răspuns între toți pacienții cărora li sa administrat H101, comparativ cu pacienții tratați numai cu chimioterapie. Principalele evenimente adverse raportate au inclus febră, reacții la locul injectării și simptome asemănătoare gripei. Pe baza acestor rezultate, agenția de reglementare chineză a aprobat H101 pentru tratamentul carcinomului nazofaringian în combinație cu chimioterapie.

Virusul vaccinului. Virusul Vaccinia este un membru al familiei poxvirus și are un genom dsDNA mare (~190 kb). Deoarece virusul vaccinia se replic în întregime în citoplasma celulelor infectate, preocupările cu privire la potențialul de mutageneză inserțională sunt eliminate. Vaccinia poate infecta, de asemenea, o gamă largă de celule și este extrem de tropicală pentru celulele tumorale ⁵⁴ . Se crede că pătrunde în celulele gazdă printr-un proces endocitar prin membrana celulară. Toate aceste caracteristici fac virusul vaccinia un vector atractiv pentru dezvoltarea virusului oncolitic. În plus, infecțiile cu vaccinia sunt relativ inofensive la persoanele imunocompetente, deși pot duce la boli sistemice la pacienții imunocompromiși. Infecția cu vaccină induce răspunsuri imune celulare și umorale puternice ^{134 , 135, 136} . Potențialul virusului vaccinia de a genera imunitate puternică a fost bine demonstrat prin utilizarea unei versiuni atenuate a virusului vaccinia pentru a vaccina împotriva variolei, ceea ce a condus la eradicarea cu succes a bolii.

Virusul Vaccinia a fost atenuat atât pentru utilizarea sa în vaccinare, cât și ca agent oncolitic. În mod specific, TK viral, factorul de creștere a vaccinului (VGF) și proteina de legare a IFN de tip I vaccinia (B18R) au fost modificate pentru a crește selectivitatea și liza celulelor canceroase ^77 , 137 . Pe baza importanței răspunsului imun și a capacității genomului viral vaccinia de a accepta transgene mari (25 kb), virusul vaccinia a fost conceput pentru a exprima antigene tumorale, molecule co-stimulatoare ale celulelor T și citokine inflamatorii. Mai exact, expresia antigenelor tumorale PSA, CEA sau mucină 1 (MUC1) de către virusul vaccinia are ca rezultat prezentarea antigenului tumoral în contextul unui răspuns antiviral puternic, care generează un răspuns imun antitumoral sporit specific antigenului.^137 , 138 . În plus, expresia virusului vaccinia a moleculei co-stimulatoare B7-1 în sine sau în combinație cu ICAM-1 și antigenul 3 asociat funcției limfocitelor (LFA3) (combinația este denumită TRICOM) asigură semnalizarea co-stimulatoare necesară CD8 antitumoral. ⁺ celulele T și a demonstrat activitate clinică cu un profil de siguranță acceptabil în studiile clinice de fază incipientă ⁷⁷ . Vectorii Vaccinia care codifică antigene tumorale și molecule co-stimulatoare au fost utilizați în dezvoltarea clinică ca vaccinuri sistemice, dar puține studii s-au concentrat pe utilizarea acestor vectori ca agenți oncolitici.

Un virus vaccinia care codifică molecula co-stimulatoare a celulei T B7.1 (rV-B7.1) a fost testat într-un studiu clinic de fază I la pacienți cu melanom avansat. Sa constatat că virusul este sigur, pacienții au dezvoltat răspunsuri specifice celulelor T melanomului și 3 din 12 pacienți au avut dovezi de regresie tumorală, inclusiv un răspuns complet ¹³⁹ . Un virus vaccinia care codifică TRICOM (rV-TRICOM) a fost de asemenea evaluat într-un studiu cu melanom de fază I cu o rată de răspuns de 30,7% ¹⁴⁰ . În aceste studii, evenimentele adverse au fost în general uşoare, constând în simptome asemănătoare gripei şi reacţii locale la locul injectării, mai mulţi pacienţi dezvoltând vitiligo autoimun. Cu toate acestea, dezvoltarea clinică ulterioară a fost în așteptare.

Un virus vaccinia care codifică GM-CSF (JX-594) a intrat, de asemenea, în studii clinice ^{82 , 141 , 142} . Într-un studiu randomizat de stabilire a dozei, 30 de pacienți cu carcinom hepatocelular avansat au primit o doză mică (10 ⁸ pfu; n = 14) sau o doză mare (10 ⁹ pfu; n) .= 16) injecții intra-tumorale în 5 sau mai puține leziuni în zilele 1, 15 și 29. Replicarea virală și expresia GM-CSF au fost observate înainte de răspunsurile terapeutice. În general, o rată de răspuns obiectiv de 15%, inclusiv răspunsuri în leziuni neinjectate la distanță, a fost raportată prin criteriile RECIST modificate (Criterii de evaluare a răspunsului în tumorile solide) și a fost similară la ambele doze. Supraviețuirea mediană, totuși, a fost mai mare la pacienții care au primit doza mare de virus (14,1 luni) comparativ cu pacienții tratați cu doza mică (6,7 luni; hazard ratio 0,39; P = 0,02 ) . Aceste date au fost folosite pentru a justifica un studiu clinic de fază III ¹⁴² .

Virusul Coxsackie. Coxsackievirus este un enterovirus ARN monocatenar neîncapsulat care este membru al familiei Picornaviridae. Virusul Coxsackie se replic în citosol fără o fază de ADN, eliminând posibilitatea mutagenezei de inserție în timpul infecției. Există două subgrupuri de coxsackievirus, A și B, care sunt diferențiate pe baza patogenezei lor în modelele murine. Virusul Coxsackie se distinge în continuare prin peste 23 de serotipuri în grupul A, cu șase serotipuri distincte în grupul B. Infecțiile cu virusul Coxsackie sunt în general asimptomatice, dar uneori se manifestă cu simptome comune asemănătoare răcelii. Virusul Coxsackie utilizează ICAM-1 și DAF pentru intrarea în celule ⁷⁵. Coxsackievirus A21 (Cavatak; Viralytics Ltd) are un tropism natural pentru celulele canceroase deoarece unele celule canceroase, cum ar fi mielomul multiplu, melanomul și celulele canceroase de sân, supraexprimă ICAM-1 și/sau DAF ⁴⁵ .

În plus față de liza directă a celulelor tumorale, s-a demonstrat că virusul coxsackie îmbunătățește răspunsul imun, în parte prin promovarea eliberării DAMP-urilor (de exemplu, HMGB-1, calreticulină și ATP) ¹⁴³ . Infecția cu virusul Coxsackie promovează infiltrarea celulelor efectoare imune, inclusiv a celulelor NK și a celulelor T CD8 ⁺ și îmbunătățește prezentarea antigenului prin activarea celulelor dendritice ¹⁴³ . Mai mult, poate crește eliberarea de IFN-uri de tip I, ceea ce poate spori un răspuns imun antitumoral.

Avantajele cheie ale coxsackievirusului ca agent oncolitic includ faptul că virusul nu necesită manipulare genetică complexă pentru siguranță sau activitate oncolitică și că răspunsurile imune puternice sunt induse de infecție. Un potențial obstacol în calea utilizării virusului coxsackie ca virus oncolitic este faptul că unii oameni ar fi putut fi expuși anterior la virusul coxsackie nativ și pot fi imune la infecție. Cu toate acestea, anticorpii împotriva diferitelor serotipuri nu par a fi reactivi încrucișați; prin urmare, tratamentul alternativ cu diferite serotipuri poate preveni clearance-ul viral prematur. Au fost inițiate studii clinice cu rezultate timpurii promițătoare, sugerând activitate terapeutică în melanom cu un profil de siguranță acceptabil ¹⁴⁴ (vezi Informații suplimentare S1 (tabel)). Sunt anticipate studii combinate de Cavatak și inhibitori ai punctelor de control ale celulelor T în melanom.

Virusul bolii de Newcastle. NDV este un paramixovirus aviar monocatenar învelit cu ARN, care variază în dimensiune de la 100 la 500 nm. NDV infectează celulele prin fuziunea membranei plasmatice sau prin endocitoza directă a virusului. NDV se replică în citoplasmă, astfel încât celulele infectate nu sunt supuse mutagenezei de inserție. Infecția este asimptomatică la om deoarece virusul este foarte sensibil la IFN-urile de tip I ¹⁴⁵ , iar proteinele virale NDV declanșează răspunsuri puternice de tip I IFN ¹⁴⁶ . Ca și în cazul altor virusuri oncolitice, sensibilitatea NDV la IFN-urile de tip I conferă specificitate celulelor canceroase ¹⁴⁵ . Sensibilitatea la apoptoza mediată de NDV este, de asemenea, conferită de supraexprimarea celulelor canceroase a BCL-XL ₍ Ref. 52 ).

NDV induce apoptoza celulelor canceroase și activează direct sistemul imunitar înnăscut prin creșterea producției de citokine (IFN de tip I, RANTES (reglat prin activare, celule T normale exprimate și secretate; cunoscute și sub numele de CCL5), IL-12 și GM-CSF) și prezentarea antigenului îmbunătățită ¹⁴⁷ . Hemaglutinina-neuraminidaza proteinei NDV poate acționa ca un antigen puternic care mărește răspunsurile celulelor T citolitice împotriva celulelor tumorale infectate ¹⁴⁸. Astfel, apoptoza indusă de NDV a celulelor canceroase are ca rezultat conversia unui micromediu tumoral imunosupresor într-un mediu proinflamator care susține răspunsurile imune antitumorale. Interesant, chiar și titrurile scăzute ale NDV pot limita creșterea tumorii, sugerând că un factor cheie în activitatea sa terapeutică poate fi generarea unui răspuns imun antitumoral ¹⁴⁹ . În plus, în ciuda faptului că are un genom relativ mic (~ 15 kb), NDV permite inserția de gene străine. Acestea pot fi inserate în regiuni necodante fără a necesita ștergerea genelor virale NDV, așa cum s-a demonstrat cu expresia GM-CSF ¹⁵⁰ . Sa demonstrat că administrarea locală, mai degrabă decât administrarea sistemică, îmbunătățește răspunsurile antitumorale ¹⁵¹ .

Deși numeroase studii preclinice au sugerat că NDV are activitate antitumorală împotriva unei game largi de tipuri de cancer, în prezent există doar un număr limitat de studii clinice în curs (Tabelul 3; a se vedea informații suplimentare S1 (tabel) ). Spre deosebire de multe alte virusuri oncolitice, seropozitivitatea împotriva NDV este minimă la om. Cu toate acestea, răspunsul imun generat împotriva NDV poate fi puternic, ceea ce a limitat doza maximă tolerată la om ¹⁵² . Astfel, schemele de dozare care utilizează o doză inițială mică urmată de doze mai mari au fost recomandate pentru studiile clinice.

Reovirus. Reovirusurile sunt viruși ARN dublu catenar, neînveliți, cu o capsidă icosaedrică de suprafață exterioară și un miez interior. Proliferarea virală are loc în citoplasma celulelor infectate. În celulele sănătoase, reovirusul începe transcripția prin producerea de ARN virali care ajută la replicare, dar activează și calea PKR ⁵⁷ . Cu toate acestea, în celulele canceroase transformate cu RAS, calea PKR este blocată. Astfel, reovirusul vizează preferenţial cancerele mutante RAS ⁵³ . Acest tropism natural a condus la multe studii clinice împotriva unei multitudini de tipuri de cancer, inclusiv glioame, melanom, cancer ovarian și cancer colorectal (Tabelul 3; a se vedea informații suplimentare S1 (tabel) ). Populația umană este de obicei expusă la reovirus. Deoarece majoritatea celulelor sănătoase sunt rezistente la replicarea reovirală, patologia este de obicei subclinică. Totuși, acest lucru complică utilizarea reovirusului ca potențială terapie virală oncolitică. 70-100% dintre participanții la mai multe studii s-au dovedit a fi seropozitivi pentru anticorpii de neutralizare împotriva reovirusului ^153 , 154 .

Virusul rujeolei.Virusul rujeolei este un paramixovirus ARN cu catenă negativă, cu un diametru de 150 nm, cu un genom (~15 kb) care conține șase gene care codifică opt proteine. Virusul rujeolei folosește receptorul de semnalizare a moleculei de activare limfocitară (SLAM), care este exprimat în principal de limfocite și/sau CD46 pentru a pătrunde în celule. La intrarea în celule, virusul rujeolei rămâne în citoplasmă unde suferă replicare, producând ARN viral și proteine ​​capside. Virusul rujeolei propagă infecția prin fuziunea celulă la celulă, rezultând în formarea de agregate multicelulare și în cele din urmă moartea celulelor. Cu toate acestea, virusul rujeolei cauzează boli grave la oameni, necesitând astfel o vaccinare pe scară largă pentru a preveni îmbolnăvirea. Patologia virusului de tip sălbatic limitează utilizarea acestuia ca agent terapeutic oncolitic; cu toate acestea, tulpinile atenuate sunt mai sigure. Specific,41 , 42 ).

Studiile de caz din anii 1970 au documentat regresia tumorală spontană asociată cu infecția coincidentă cu rujeolă, în special în afecțiunile maligne hematologice ^{155 , 156 , 157} . Mai recent, tulpina Edmonston a virusului rujeolic a fost evaluată în mai multe studii clinice pentru mai multe tipuri de tumori, inclusiv GBM, mielom multiplu și cancer ovarian (Tabelul 3; a se vedea informații suplimentare S1 (tabel) ). Similar altor virusuri oncolitice, terapia cu virusul rujeolic poate fi complicată de anticorpi neutralizanți preexistenți, deoarece mulți pacienți ar fi fost expuși sau vaccinați împotriva virusului rujeolic. Vaccinarea a fost asociată cu anticorpi neutralizanți și cu răspunsuri de memorie pe termen lung, ceea ce poate duce la eliminarea rapidă a virusului. Sunt necesare cercetări clinice suplimentare pentru a defini mai bine activitatea terapeutică a virusurilor rujeolice oncolitice.

Poliovirus. Poliovirusul este un picornavirus ARN monocatenar, neînvelit, care măsoară 30 nm în diametru. Poliovirusul intră în celule prin legarea de CD155 și, după internalizare, virusul suferă replicare în citoplasmă. Poliovirusul este foarte patogen la om, ducând la poliomielita paralitică la <1% dintre persoanele infectate, din cauza distrugerii neuronilor motori ai cornului anterior în urma infecției. Astfel, poliovirusul trebuie atenuat pentru a fi utilizat ca vector oncolitic. O tulpină atenuată (Sabin) a arătat un tropism deosebit pentru celulele gliomului, care este probabil să fie legat de reglarea în sus a CD155 pe aceste celule tumorale ¹⁵⁸ .

Pentru a reduce neurovirulența, poliovirusul poate fi atenuat în continuare prin înlocuirea locului de intrare a ribozomului intern viral (IRES) cu un IRES din virusul rinocerului uman înrudit de tip 2 (HRV2); acest construct a fost denumit PVS-RIPO ¹⁵⁹ . În plus, înlocuirea poliovirusului IRES cu HRV2 IRES îmbunătățește selectivitatea PVS-RIPO pentru GBM. HRV2 IRES se leagă de heterodimerul DRBP76–NF45 (cuprinzând proteina celulară de legare a ARN-ului dublu catenar 76 (DRBP76; cunoscută și sub numele de ILF3) și factorul nuclear al celulelor T activate 45 kDa (NF45; cunoscut și ca ILF2)). Această interacțiune blochează replicarea virală în celulele neuronale sănătoase, dar nu apare în celulele gliom ^160 , 161 . Succesul preclinic al PVS-RIPO în modelele de tumori GBM a condus la studii clinice de fază I în curs de desfășurare în GBM.

Alti virusi. Un număr mare de alți virusuri oncolitice au fost propuși pentru terapia cancerului. Aceasta include VSV/rhabdovirus, Seneca Valley Virus ³² , parvovirus ³³ și retrovirusuri ¹⁶² . Acești agenți sunt în stadii incipiente de dezvoltare clinică și sunt necesare studii clinice suplimentare pentru a valida aceste abordări.

Caseta 2: Abordări ale terapiei combinate

Virușii oncolitici au demonstrat profiluri de siguranță foarte tolerabile, iar capacitatea lor de a modula micromediul tumoral oferă o strategie rațională pentru tratamentul combinat cu alți agenți cancerigeni pentru a îmbunătăți răspunsurile terapeutice. Virușii oncolitici pot fi combinați cu ușurință cu o gamă largă de terapii, inclusiv rezecție chirurgicală, chimioterapie, radioterapie, terapie hormonală, terapii țintite și imunoterapie. Într-adevăr, adenovirusul, reovirusul, virusul herpes simplex tip 1 (HSV-1) și parvovirusul au fost evaluate clinic în combinație cu rezecția chirurgicală, chimioterapie și radioterapie ^{176 , 177 , 178 .}. Motivul pentru aceste combinații s-a bazat pe așteptarea ca virusurile oncolitice să nu fie afectate de aceste terapii și să poată viza cancerul rezidual după tratamentul standard de îngrijire. Acest concept a fost aplicat și cu adenovirusurile în combinație cu terapia hormonală în cancerul de prostată ¹⁷⁹ .

Poate cea mai promițătoare strategie este combinarea virusurilor oncolitice cu inhibitori ai punctelor de control ale celulelor T. Progresele recente în dezvoltarea inhibitorilor punctelor de control sugerează că aceștia sunt agenți potenți cu activitate într-o gamă largă de tipuri de cancer. Studiile sugerează că pacienții cu tumori care exprimă niveluri ridicate de ligand 1 al morții celulare programate 1 (PDL1) pot avea un răspuns îmbunătățit la inhibitorii punctelor de control ale celulelor T ¹⁸⁰ . Deoarece virusurile oncolitice induc adesea eliberarea de interferon (IFN) în micromediul tumoral local, iar IFN-ul este cunoscut că reglează expresia PDL1 pe celulele tumorale, această combinație este deosebit de interesantă ¹⁸¹ . De fapt, modelele preclinice au validat această abordare și mai multe studii clinice sunt în curs de desfășurare ¹⁸². Rapoartele preliminare dintr-un studiu de fază Ib cu T-VEC și ipilimumab susțin un beneficiu terapeutic suplimentar al terapiei combinate ¹²³ .

Mergi la:

Probleme speciale în dezvoltarea medicamentelor

Provocările unice pentru dezvoltarea virusurilor oncolitice ca o nouă clasă de medicamente anticancer includ necesitatea unor proiecte de studii clinice mai practice și criterii de evaluare a răspunsului final, teste farmacodinamice și farmacocinetice (PK/PD) validate, probleme de biosecuritate și reglementări netradiționale, probleme de producție și comercializare.

Considerații farmacodinamice. Virușii oncolitici diferă de medicamentele standard în mai multe moduri unice. Sunt viruși vii și proliferează la administrare clinică; aceasta poate avea ca rezultat doze eficiente variabile. În prezent, sunt disponibile puține date privind corelarea dozei virale cu potențialul de replicare in vivo și răspunsul terapeutic. Investigațiile ulterioare referitoare la replicarea virală și răspunsul clinic în modelele preclinice relevante și în studiile clinice vor fi importante pentru stabilirea unor ghiduri de dozare sigure și eficiente.

Virușii oncolitici nu sunt îndepărtați ca urmare a metabolismului celular sau a legării de proteinele circulante; mai degrabă, ele sunt supuse răspunsurilor imune antivirale ale gazdei. În acest sens, trebuie luați în considerare mai mulți factori, inclusiv titrurile preexistente de anticorpi neutralizanți, răspunsurile celulelor T cu memorie specifice virusului, potențialul de dezactivare a unor viruși prin legarea hemaglutininei și capacitatea înnăscută a unor virusuri de a evita detectarea imună. În plus, multe micromedii tumorale sunt foarte imunosupresoare, ceea ce poate limita răspunsul imun al gazdei. Studiile ulterioare pentru a evalua atât imunitatea antivirală preexistentă, cât și inducerea răspunsurilor imune post-tratament împotriva vectorului viral și a antigenelor asociate tumorii vor fi importante pentru a înțelege mai bine dinamica modului în care virusurile oncolitice sunt curățate și controlate la pacienții cu cancer.

Considerații de biosecuritate. Virusurile oncolitice au fost până acum asociate cu un profil de siguranță relativ tolerabil în numeroase studii clinice efectuate într-o gamă largă de tipuri de cancer. Cu toate acestea, potențialul de replicare al acestor agenți necesită atenție la problemele de control al infecțiilor, inclusiv procedurile de depozitare, pregătire, manipulare și administrare în siguranță a virusului. Adevăratul potențial de infecție depinde de natura virusului și de condițiile comorbide din cadrul pacienților, de contactele apropiate din gospodărie și de lucrătorii din domeniul sănătății care pot fi expuși la virus. În plus, mulți viruși oncolitici conțin elemente ADN recombinant și astfel impactul potențial al unor astfel de segmente de gene și potențialul de recombinare a acestora cu viruși de tip sălbatic în mediu sunt preocupări teoretice.

Deși nu există standarde universal acceptate cu privire la biosecuritatea virusurilor oncolitice, planul de dezvoltare ar trebui să includă politici pentru manipularea și depozitarea în siguranță a agentului. Ar trebui stabilite linii directoare pentru lucrătorii din domeniul sănătății, în special farmaciștii care pregătesc agentul și medicii sau asistentele care administrează agentul. Majoritatea agenților pot fi gestionați în siguranță cu precauții universale standard, dar trebuie dezvoltate materiale educaționale suplimentare. Pentru fiecare virus, ar trebui să existe instrucțiuni clare cu privire la modul de a face față deversărilor accidentale, curățarea camerelor de tratament între vizitele la pacienți și instrucțiuni privind posibilele antidoturi în cazul unei expuneri accidentale. În unele cazuri, ar trebui emise avertismente pentru pacienți și lucrătorii din domeniul sănătății pentru a evita contactul cu agentul. De exemplu, persoanele imunodeprimate și femeile însărcinate nu trebuie expuse la virusul vaccinia. Planurile de gestionare a locului de administrare a virusului ar trebui, de asemenea, definite clar pentru pacienți și lucrătorii din domeniul sănătății. În cazul unei posibile contaminări a bandajelor și a pansamentelor, ar trebui elaborat un plan de eliminare adecvată în instituțiile de îngrijire a sănătății și la domiciliu.

Deoarece virusurile oncolitice sunt agenți noi cu potențial de diseminare, multe planuri ar putea avea nevoie să ia în considerare programe extinse de supraveghere. În prezent, nu este clar modul în care agențiile de reglementare vor gestiona problemele de biosecuritate, dar poate fi indicată luarea în considerare a proceselor de evaluare și atenuare a riscurilor după comercializare (REMS). În ciuda preocupărilor teoretice, trebuie menționat că până în prezent nu au existat rapoarte de transmitere casnică a virusurilor oncolitice în literatură. De asemenea, este important de menționat că mulți virusuri oncolitice sunt atenuate, iar tulpinile native sunt adesea omniprezente în mediu. Au existat, totuși, cazuri izolate de expunere a profesioniștilor din domeniul sănătății în timpul manipulării virusurilor oncolitice în laborator sau înainte de administrarea pacientului.

Proiectarea studiului clinic și evaluarea răspunsului. Dovezi recente au sugerat că cinetica răspunsurilor mediate de imun poate fi mult mai lentă în comparație cu agenții terapeutici care ucid direct celulele tumorale. Activarea sistemului imunitar are ca rezultat o metodă indirectă de ucidere a celulelor tumorale, care necesită amorsarea și extinderea celulelor efectoare imune, în special a celulelor T citotoxice CD8 +, ^și timp pentru ca astfel de celule să sufere expansiune homeostatică, traficul către locurile de creștere a tumorii. , distrugerea litică a celulelor canceroase și eliminarea inflamatorie a tumorii necrotice (Fig. 2). Acest lucru poate duce la ceea ce a fost numit „pseudo-progresie”, iar studiile clinice trebuie să ia în considerare punctele finale netradiționale care pot explica apariția răspunsurilor terapeutice întârziate ¹⁶³ . Pseudo-progresia poate complica interpretarea rezultatelor clinice și ar trebui luată în considerare în studiile viitoare cu virusul oncolitic.

În plus, virusurile oncolitice reprezintă o provocare în ceea ce privește eligibilitatea subiectului, dozarea și evaluarea biodistribuției atunci când se proiectează studiile clinice. Deoarece multe studii clinice au utilizat livrarea locală a virusului la pacienți, tumorile trebuie să fie accesibile pentru injectare. Până în prezent, dozarea virusului s-a bazat în mod obișnuit pe concentrația maximă posibilă de virus, cu tehnicile actuale de purificare și volumul tumorii determinat înainte de fiecare administrare de virus. Acest lucru poate fi destul de greoi și puține studii au explorat în mod adecvat asocierea dintre doza de virus, răspunsul terapeutic și apariția evenimentelor adverse ^{142 , 164 , 165 .}. Cu toate acestea, deoarece virusurile oncolitice se pot replica în țesuturile tumorale, chiar și dozele mici pot duce la o activitate clinică semnificativă, cu condiția ca virusul să nu fie eliminat rapid de sistemul imunitar. Acest lucru a fost observat în studiile clinice cu poliovirusul oncolitic și T-VEC ³. În cele din urmă, sunt necesare teste individuale pentru a evalua distribuția virusului pentru a evalua farmacodinamia eliberării virusului. În mod ideal, acestea ar trebui să includă date despre prezența virusului în celulele țintă (de exemplu, celulele canceroase), lipsa replicării virale în celulele care nu sunt țintă, eliminarea virusului în fluidele corporale, dovezi ale infecției latente, clearance-ul viral și virus- răspunsuri imune umorale și celulare specifice și specifice tumorii. Deși multe studii au făcut progrese în stabilirea unor astfel de teste, nu există un acord standard în domeniu cu privire la modul de validare a acestor puncte finale corelative.

Au fost dezvoltate mai multe strategii pentru evaluarea clinică a virusurilor oncolitice in vivo . Cele mai comune metode pentru determinarea absorbției tisulare au folosit expresia coloranților fluorescenți, cum ar fi proteina fluorescentă verde (GFP) sau luciferaza, în vectorul viral pentru a cuantifica transcripția virală în celulele infectate ¹⁶⁶ . Această tehnică, totuși, este o provocare pentru pacienți, deoarece necesită includerea unei transgene străine cu consecințe clinice necunoscute, potențial de recunoaștere imună și dificultăți în imagistica activității fluorescente din straturile de țesut profund. În schimb, virusul rujeolic și HSV-1 au fost concepute pentru a exprima alte proteine ​​sau enzime care nu se bazează pe fluorescență pentru in vivomonitorizarea. Virusul rujeolic a fost proiectat pentru a codifica domeniul extracelular solubil al CEA umană în amonte de gena nucleoproteinei. Acest lucru permite monitorizarea cantitativă a expresiei genelor virale prin măsurarea în serie a nivelurilor de CEA din sângele periferic ¹⁶⁷ . O altă strategie interesantă a folosit un virus al rujeolei care exprimă simportor de iodură de sodiu tiroidian uman (NIS) ¹⁶⁸ . NIS concentrează iod radioactiv, care poate fi monitorizat utilizând tomografie computerizată cu emisie de foton unic (SPECT) sau imagistica tomografie cu emisie de pozitroni (PET). Un HSV-1 care codifică TK viral și un receptor mutant de dopamină D ₂ a fost folosit pentru a capta trasori radioactivi pentru monitorizarea locației virusului și a capacității de replicare ¹⁶⁹. În acest sistem, fosforilații virali TK au injectat 2′-fluor-2′-deoxi-1-beta-d-arabinofuranosil-5-iodo-uracil (FIAU), marcat cu 131 I radioactiv, care captează semnalul radioactiv în interiorul ^celulei 170 . Dopamina mutantă D ₂receptorul acționează într-un mod similar prin captarea unui trasor radioactiv care poate fi monitorizat folosind imagistica PET. În plus față de imagistică, procedurile de biopsie tumorală pot fi efectuate, atunci când sunt accesibile și adecvate, pentru a determina titrurile virale în țesuturile țintă și non-țintă. Probele de biopsie tumorală pot furniza atât date funcționale, cât și informații despre cinetica și propagarea virusului oncolitic. Colectarea altor țesuturi corporale, inclusiv sânge, salivă și urină, poate oferi, de asemenea, indicatori ai replicării virale și va fi esențială pentru asigurarea siguranței prin determinarea dinamicii de deversare a virusurilor oncolitice terapeutice.

Probleme de reglementare și comercializare. Natura de replicare vii a virusurilor oncolitice pune probleme unice de reglementare și de fabricație. Majoritatea virusurilor sunt propagate în culturi de țesuturi și acest lucru necesită metode pentru producția de virusuri cu titluri mari, testarea agenților patogeni adventiți și evaluarea purității virusului și a potențialului de replicare. Astfel, trebuie luate în considerare procedurile pentru siguranța în laborator în timpul producției și al ambalajului, validarea și puritatea produsului și calitatea designului care rezultă din generarea de substanțe biologice în cultura celulară. Pentru unele viruși a fost dificil să se genereze lizate cu titru foarte mare necesare pentru dozarea clinică, iar aceasta poate fi o provocare pentru fabricarea biotehnologiei. Aceste aspecte au fost revizuite pe larg în altă parte ^{171 , 172 ,173} . Vaccinurile virale au oferit modelele pentru fabricarea și reglarea virusurilor oncolitice. FDA a publicat un proiect de document de orientare intitulat „Ghid pentru industrie: proiectare și analiză a studiilor de eliminare pentru terapie genetică bazată pe virus sau bacterii și produse oncolitice”. Alte documente relevante includ „Directia europeană pentru calitatea medicamentelor, inclusiv substraturi celulare pentru producția de vaccinuri de uz uman” (Ref. 174 ) și „Teste pentru agenți străini în vaccinurile virale de uz uman” (Ref. 175) .). Acestea oferă linii directoare pentru testarea controlului calității tuturor materialelor și celulelor utilizate în generarea virusurilor oncolitice. Mai mult, intermediarii și loturile virale trebuie testate pentru contaminare și eficacitate. Cu toate acestea, îndepărtarea contaminanților, în special a contaminanților microbieni sau virali, se dovedește a fi mai dificilă pentru virusurile oncolitice decât pentru proteinele recombinante, deoarece metodele utilizate pentru îndepărtarea acestor contaminanți pot viza și virusul oncolitic. Calitatea preparării virusului oncolitic poate fi testată în celulele martor cu o citire standard, în combinație cu un anticorp de neutralizare specific virusului pentru a confirma că efectul este mediat de virus. Această abordare a fost adaptată după metodele utilizate pentru testarea vaccinurilor virale umane.

Mergi la:

Directii viitoare

Demonstrarea unei îmbunătățiri semnificative a răspunsurilor durabile pentru pacienții cu melanom care au fost tratați cu T-VEC a revoluționat domeniul terapiei anticancer cu virusuri oncolitice. Cu toate acestea, dezvoltarea virusurilor oncolitice ca agenți terapeutici necesită o atenție deosebită pentru a stabili modele adecvate de studii clinice, regimuri de dozare, teste farmacodinamice, programe educaționale care abordează problemele de biosecuritate, precum și noi căi de producție și reglementare. De asemenea, o atenție deosebită acordată selecției pacienților va fi, de asemenea, un aspect important. De exemplu, pacienții imunocompromiși ar putea să nu fie candidați buni, deoarece imunitatea antitumorală mediată de virusul oncolitic ar putea fi compromisă la acești pacienți.

Cu toate acestea, virusurile oncolitice au fost asociate cu un raport risc-beneficiu foarte favorabil și se poate anticipa dezvoltarea continuă a acestei noi clase de medicamente, cu un interes deosebit pentru abordările combinate. Imunoterapia cu virusul oncolitic este o abordare foarte promițătoare și introduce o nouă clasă de medicamente pentru tratarea pacienților cu cancer.

Informatie suplimentara

(XLSX 13 kb) ^{(13K, xlsx)}

Mergi la:

Mulțumiri

Această lucrare a fost susținută, în parte, de către Institutul Național al Cancerului din SUA Grant UM1 CA186716-01.

Mergi la:

Glosar

Antigenul asociat tumorii	O proteină derivată din celulele tumorale care poate fi recunoscută de sistemul imunitar. Un răspuns imun poate fi declanșat deoarece o celulă T a supraviețuit selecției timice negative pentru antigenul înrudit sau, mai probabil, deoarece proteina gazdă normală a fost mutată în celula canceroasă.
Danger signals	Nuclear and cytosolic proteins that are released by cells during tissue injury or necrosis, and stimulate the innate and adaptive immune system.
Cell antiviral response elements	Intracellular and extracellular components of the inherent cellular response to viral infection, including detection (via protein kinase R (PKR), Toll-like receptors (TLRs), retinoic acid-inducible gene 1 (RIG-1), and others) and initiation of the immune response through the release of cytokines (such as type I interferons), danger-associated molecular pattern signals (DAMPs) (such as high mobility group box 1(HMGB1), heat shock proteins (HSPs), and others), and pathogen-associated molecular patterns (PAMPs; viral products recognized by TLRs).
Epitope spreading	Un proces prin care deteriorarea tisulară în timpul unui răspuns imun inițial împotriva unui antigen poate duce la amorsarea celulelor T și/sau B autoreactive care vizează alte zone (sau epitopi) din antigenul inițial sau împotriva altor antigene.
Neo-antigene	Noi antigene, adesea derivate din proteinele căii metabolice ale celulelor și exprimate în mod obișnuit în celulele tumorale. Neo-antigenele pot apărea ca o consecință a răspândirii epitopului în urma atacului imun inițial asupra unei celule tumorale declanșat de un antigen neînrudit.
Inhibitori ai punctelor de control	Anticorpi monoclonali care inhibă punctele de control imunitare negative. Punctele de control imunitar controlează căi importante de semnalizare intracelulară din sistemul imunitar care fie activează, fie inhibă răspunsurile imune. Inhibitorii punctelor de control s-au dovedit a fi promițători semnificative în tratamentul cancerului. Cel mai important, blocarea antigenului 4 al limfocitelor T citotoxice (CTLA4) și interacțiunile dintre moartea celulară programată 1 (PD1) și moartea celulară programată 1 ligand 1 (PDL1) au avut un impact semnificativ asupra tratamentului melanomului, cancerului pulmonar și, posibil, multor alte cancere.
Calea morții mediată de catepsină	O formă independentă de caspază de moarte celulară. Celulele pot suferi o serie pre-programată de evenimente de semnalizare intracelulară care duc la moartea celulei; acest lucru a fost bine descris pentru inducerea apoptozei prin semnalizare dependentă de caspază. Cu toate acestea, unele celule pot suferi o formă de moarte celulară independentă de caspază. Cathepsina poate induce un program de moarte în celule. Există încă unele controverse cu privire la faptul dacă moartea celulară mediată de catepsină se datorează apoptozei sau altor forme de moarte celulară.

Mergi la:

Biografii

• 

Howard L. Kaufman și-a primit doctoratul de la Universitatea Loyola, Chicago, Illinois, SUA, în 1986 și și-a finalizat stagiul de rezidențiat în chirurgie generală la Universitatea Boston, SUA, în 1995. A absolvit burse în imunologie tumorală și oncologie chirurgicală la US National Cancer Institute, US National Institutes of Health, Bethesda, Maryland, SUA. Și-a început cariera ca profesor asistent la Colegiul de Medicină Albert Einstein, Universitatea Yeshiva, New York, SUA, în 1997 și a devenit profesor asociat și șef, Divizia de Oncologie Chirurgicală la Universitatea Columbia, New York, SUA, în 2001. A devenit profesor titular titular la Universitatea Rutgers, New Brunswick, New Jersey, SUA, în 2014. În prezent, este director asociat pentru știința clinică la Rutgers Cancer Institute din New Jersey și șeful diviziei de oncologie chirurgicală la Rutgers Robert Wood Johnson Medical School. El conduce un program activ de cercetare translațională axat pe dezvoltarea virusurilor oncolitice pentru tratamentul melanomului, servind ca investigator principal sau investigator responsabil pentru peste 15 protocoale clinice locale și naționale active. A publicat peste 30 de capitole de manuale și 150 de lucrări de cercetare originale. El a fost ales Președinte al Societății pentru Imunoterapie a Cancerului și face parte din comitetul executiv al Comisiei pentru Cancer. servind ca investigator principal sau investigator responsabil pentru peste 15 protocoale clinice locale și naționale active. A publicat peste 30 de capitole de manuale și 150 de lucrări de cercetare originale. El a fost ales Președinte al Societății pentru Imunoterapie a Cancerului și face parte din comitetul executiv al Comisiei pentru Cancer. servind ca investigator principal sau investigator responsabil pentru peste 15 protocoale clinice locale și naționale active. A publicat peste 30 de capitole de manuale și 150 de lucrări de cercetare originale. El a fost ales Președinte al Societății pentru Imunoterapie a Cancerului și face parte din comitetul executiv al Comisiei pentru Cancer.• 

Frederick J. Kohlhapp și-a luat doctoratul. în Imunologie de la Universitatea din Chicago, Chicago, Illinois, SUA, în 2012. A absolvit o bursă postdoctorală finanțată de F32 la Northwestern University, Chicago, Illinois, SUA, în 2014, iar în prezent este bursier postdoctoral al Fundației Kirby la Rutgers Cancer. Institutul din New Jersey, New Brunswick, New Jersey, SUA. Cercetările sale se concentrează asupra micromediului tumoral, în special asupra efectelor imunoterapiei și virusurilor oncolitice asupra modificării răspunsurilor imune anti-tumorale și prezentării antigenului.• 

Andrew Zloza și-a obținut doctoratul. în Imunologie/Microbiologie în 2006 și MD în 2009 prin programul de doctorat Rush Physician Scientist MD la Centrul Medical al Universității Rush, Chicago, Illinois, SUA. El a finalizat o bursă postdoctorală finanțată de T32 în imunologie tumorală și proiectare de vaccin împotriva cancerului la Universitatea din Chicago, Chicago, Illinois, SUA, în 2011. În 2012, s-a alăturat facultății Departamentului de Imunologie și Departamentului de Medicină Internă de la Universitatea Rush. Medical Center, Chicago, Illinois, SUA. În prezent, este șef de secție de cercetare în oncologie chirurgicală la Institutul de Cancer Rutgers din New Jersey și profesor asistent în Departamentul de Chirurgie de la Rutgers Robert Wood Johnson Medical School, New Brunswick, New Jersey, SUA.

Linkuri conexe

INFORMATII SUPLIMENTARE

 Ghid pentru industrie: proiectarea și analiza studiilor de excreție pentru terapia genică pe bază de virus sau bacterii și produse oncolitice

Diapozitive PowerPoint

Slide PowerPoint pentru Fig. 1 ^{(266K, ppt)} Slide PowerPoint pentru Fig. 2 ^{(278K, ppt)} Slide PowerPoint pentru Fig. 3 ^{(217K, ppt)} Slide PowerPoint pentru Fig. 4 ^{(600K, ppt)}

Slide PowerPoint pentru Tabelul 1 ^{(263K, ppt)} Slide PowerPoint pentru Tabelul 2 ^{(327K, ppt)} Slide PowerPoint pentru Tabelul 3 ^{(358K, ppt)}

Mergi la:

Interese concurente

HLK servește ca consultant pentru Amgen și a primit onorari. Ceilalți autori nu au interese concurente de divulgat.

Mergi la:

Referințe

1. 

Moore AE. Efectul distructiv al virusului encefalitei rusești din Orientul Îndepărtat asupra sarcomului de șoarece transplantabil 180. Cancer. 1949; 2 :525–534. [ PubMed ] [ Google Scholar ]2. 

Moore AE. Efectul inoculării virusurilor gripei A și herpes simplex asupra creșterii tumorilor transplantabile la șoareci. Cancer. 1949; 2 :516–524. [ PubMed ] [ Google Scholar ]3. 

Andtbacka, RH et al. Talimogene laherparepvec îmbunătățește rata de răspuns durabil la pacienții cu melanom avansat. J. Clin. Oncol. 10.1200/JCO.2014.58.3377 (2015). Studiu clinic de fază III care a dus la aprobarea FDA a T-VEC pentru utilizare clinică în Statele Unite pentru melanom.[PubMed ] 4. 

Anthony SJ, et al. O strategie pentru estimarea diversității virale necunoscute la mamifere. mBio. 2013; 4 :e00598–e00513. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar5. 

Hanahan D, Weinberg RA. Semnele distinctive ale cancerului: generația următoare. Celulă. 2011; 144 :646–674. doi: 10.1016/j.cell.2011.02.013. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]6. 

Martuza RL, Malick A, Markert JM, Ruffner KL, Coen DM. Terapia experimentală a gliomului uman prin intermediul unui virus mutant modificat genetic. Ştiinţă. 1991; 252 :854–856. [ PubMed ] [ Google Scholar ]7. 

Garber K. China aprobă prima terapie cu virus oncolitic din lume pentru tratamentul cancerului. J. Natl Cancer Inst. 2006; 98 :298–300. [ PubMed ] [ Google Scholar ]8. 

Alvarez-Breckenridge C, Kaur B, Chiocca EA. Adjuvanți farmacologici și chimici în viroterapie tumorală. Chim. Rev. 2009; 109 :3125–3140. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]9. 

Uchida H, şi colab. Tratamentul eficient al unui model de xenogrefă ortotopică de glioblastom uman folosind un virus herpes simplex oncolitic redirecționat EGFR. Mol. Acolo. 2013; 21 :561–569. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]10. 

Meurs E, et al. Clonarea moleculară și caracterizarea proteinei kinazei umane dublu catenare activate de ARN indusă de interferon. Celulă. 1990; 62 :379–390. [ PubMed ] [ Google Scholar ]11. 

Elde NC, Child SJ, Geballe AP, Malik HS. Protein kinaza R dezvăluie un model evolutiv pentru înfrângerea mimetismului viral. Natură. 2009; 457 :485–489. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]12. 

Clemens MJ. Ținte și mecanisme pentru reglarea translației în transformarea malignă. Oncogene. 2004; 23 :3180–3188. [ PubMed ] [ Google Scholar ]13. 

Zamarin D, et al. Viroterapia oncolitică localizată depășește rezistența sistemică a tumorii la imunoterapia cu blocarea punctelor de control imun. Sci. Transl Med. 2014; 6 :226ra32. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]14. 

Karre K, Ljunggren HG, Piontek G, Kiessling R. Respingerea selectivă a variantelor de limfom cu deficit de H-2 sugerează o strategie alternativă de apărare imunitară. Natură. 1986; 319 :675–678. [ PubMed ] [ Google Scholar ]15. 

Ljunggren HG, Karre K. Rezistența gazdei direcționată selectiv împotriva variantelor de limfom cu deficit de H-2. Analiza mecanismului. J. Exp. Med. 1985; 162 :1745–1759. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]16. 

Ikeda K, și colab. Terapia cu virus oncolitic a tumorilor multiple din creier necesită suprimarea răspunsurilor antivirale înnăscute și provocate. Nat. Med. 1999; 5 :881–887. [ PubMed ] [ Google Scholar ]17. 

Wakimoto H, şi colab. Răspunsul complementului împotriva unui virus oncolitic este specific speciei în căile sale de activare. Mol. Acolo. 2002; 5 :275–282. [ PubMed ] [ Google Scholar ]18. 

Alvarez-Breckenridge CA, et al. Celulele NK împiedică viroterapia glioblastomului prin receptorii naturali de citotoxicitate NKp30 și NKp46. Nat. Med. 2012; 18 :1827–1834. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]19. 

Ruffell B, Affara NI, Coussens LM. Programarea diferențială a macrofagelor în micromediul tumoral. Trends Immunol. 2012; 33 :119–126. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]20. 

Talmadge JE, Gabrilovich DI. Istoricul celulelor supresoare derivate din mieloide. Nat. Rev. Cancer. 2013; 13 :739–752. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]21. 

Gajewski TF, Schreiber H, Fu YX. Celulele imune înnăscute și adaptive în micromediul tumoral. Nat. Imunol. 2013; 14 :1014–1022. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]22. 

Di Paolo NC, et al. Legarea virusului la un receptor al membranei plasmatice declanșează răspunsul macrofagic proinflamator mediat de interleukina-1 α in vivo . Imunitate. 2009; 31 :110–121. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]23. 

Prestwich RJ, et al. Cazul virusurilor oncolitice versus sistemul imunitar: așteptarea judecății lui Solomon. Zumzet. Gene Ther. 2009; 20 :1119–1132. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]24. 

Bridle BW, et al. Potențarea imunoterapiei cancerului folosind un virus oncolitic. Mol. Acolo. 2010; 18 :1430–1439. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]25. 

Kanerva A, et al. Imunitatea celulelor T antivirale și antitumorale la pacienții tratați cu adenovirus oncolitic care codifică GM-CSF. Clin. Cancer Res. 2013; 19 :2734–2744. [ PubMed ] [ Google Scholar ]26. 

Carlsten M, et al. Celulele tumorale umane primare care exprimă CD155 afectează țintirea tumorii prin reglarea în jos a DNAM-1 pe celulele NK. J. Immunol. 2009; 183 :4921–4930. [ PubMed ] [ Google Scholar ]27. 

Snyder A, et al. Baza genetică pentru răspunsul clinic la blocarea CTLA-4 în melanom. N. Engl. J. Med. 2014; 371 :2189–2199. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]28. 

Schietinger A, Philip M, Liu RB, Schreiber K, Schreiber H. Uciderea cancerului de către observatori necesită cooperarea celulelor T CD4 ⁺ și CD8 ⁺ în timpul fazei efectoare. J. Exp. Med. 2010; 207 :2469–2477. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]29. 

Nguyen A, Ho L, Wan Y. Chimioterapia și viroterapie oncolitică: tactici avansate în războiul împotriva cancerului. Față. Oncol. 2014; 4 :145. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]30. 

Mok W, Boucher Y, Jain RK. Metaloproteinazele matriceale-1 și -8 îmbunătățesc distribuția și eficacitatea unui virus oncolitic. Cancer Res. 2007; 67 :10664–10668. [ PubMed ] [ Google Scholar ]31. 

Shen BH, Hermiston TW. Efectul hipoxiei asupra infecției cu Ad5, exprimării și replicării transgenelor. Gene Ther. 2005; 12 :902–910. [ PubMed ] [ Google Scholar ]32. 

Rudin CM, et al. Studiu clinic de fază I al virusului Seneca Valley (SVV-001), un picornavirus competent de replicare, în tumorile solide avansate cu caracteristici neuroendocrine. Clin. Cancer Res. 2011; 17 :888–895. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]33. 

Geletneky K, și colab. Studiu de fază I/IIa al administrării intratumorale/intracerebrale sau intravenoase/intracerebrale a Parvovirusului H-1 (ParvOryx) la pacienții cu glioblastom multiform progresiv primar sau recurent: protocolul ParvOryx01. BMC Cancer. 2012; 12:99 . [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]34. 

Chiocca EA, et al. Un studiu de fază I deschis, cu creșterea dozei, multi-instituțional de injectare cu un adenovirus atenuat cu E1B, ONYX-015, în regiunea peritumorală a gliomelor maligne recurente, în cadru adjuvant. Mol. Acolo. 2004; 10 :958–966. [ PubMed ] [ Google Scholar ]35. 

Eck SL, et al. Tratamentul malignităților avansate ale SNC cu adenovirusul recombinant H5.010RSVTK: un studiu de fază I. Zumzet. Gene Ther. 1996; 7 :1465–1482. [ PubMed ] [ Google Scholar ]36. 

Fueyo J, et al. Un adenovirus oncolitic mutant care vizează calea Rb produce efect anti-gliom in vivo . Oncogene. 2000; 19 :2–12. [ PubMed ] [ Google Scholar ]37. 

Heise C, et al. Un adenovirus E1A mutant care demonstrează eficacitate antitumorală sistemică puternică și selectivă. Nat. Med. 2000; 6 :1134–1139. [ PubMed ] [ Google Scholar ]38. 

Lopez MV, et al. Celulele stromale asociate tumorii joacă un rol critic asupra rezultatului eficacității oncolitice a adenovirusurilor cu replicare condiționată. Plus unu. 2009; 4 :e5119. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]39. 

Zamarin D, Palese P. Virusul bolii oncolitice de Newcastle pentru terapia cancerului: provocări vechi și direcții noi. Viitorul Microbiol. 2012; 7 :347–367. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]40. 

Yu Z, și colab. Expresie îmbunătățită a nectinei-1 și sensibilitate la herpes oncolitic în carcinomul extrem de migrator și invaziv. Clin. Cancer Res. 2005; 11 :4889–4897. [ PubMed ] [ Google Scholar ]41. 

Dorig RE, Marcil A, Chopra A, Richardson CD. Molecula umană CD46 este un receptor pentru celula virusului rujeolic (tulpina Edmonston). 1993; 75 :295–305. [ PubMed ] [ Google Scholar ]42. 

Anderson BD, Nakamura T, Russell SJ, Peng KW. Densitatea ridicată a receptorilor CD46 determină uciderea preferențială a celulelor tumorale de către virusul rujeolic oncolitic. Cancer Res. 2004; 64 :4919–4926. [ PubMed ] [ Google Scholar ]43. 

Guo P, şi colab. ICAM-1 ca țintă moleculară pentru cancerul de sân triplu negativ. Proc. Natl Acad. Sci. STATELE UNITE ALE AMERICII. 2014; 111 :14710–14715. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]44. 

Au GG, Lincz LF, Enno A, Shafren DR. Virusul Coxsackie oncolitic A21 ca terapie nouă pentru mielomul multiplu. Br. J. Haematol. 2007; 137 :133–141. [ PubMed ] [ Google Scholar ]45. 

Shafren DR, et al. Terapia sistemică a tumorilor maligne de melanom uman de către un enterovirus comun care produce răceală, virusul coxsackie a21. Clin. Cancer Res. 2004; 10 :53–60. [ PubMed ] [ Google Scholar ]46. 

​​Shafren DR, Sylvester D, Johansson ES, Campbell IG, Barry RD. Oncoliza cancerelor ovariene umane prin ecovirus tip 1. Int. J. Cancer. 2005; 115 :320–328. [ PubMed ] [ Google Scholar ]47. 

Rea VE, et al. Receptor de laminină de 67 kDa: structură, funcție și rol în cancer și infecție. Infez Med. 2012; 20 (Supl. 2):8–12. [ PubMed ] [ Google Scholar ]48. 

Tu Z, et al. Expresia receptorului Coxsackievirus-adenovirus în liniile celulare de cancer ovarian este asociată cu eficiență crescută de transducție a adenovirusului și expresie transgenă. Gena cancerului Ther. 2001; 8 :168–175. [ PubMed ] [ Google Scholar ]49. 

Liapis H, Adler LM, Wick MR, Rader JS. Exprimarea integrinei α _v β3 este mai puțin frecventă în tumorile epiteliale ovariene cu potențial malign scăzut, în contrast cu carcinoamele ovariene. Zumzet. Pathol. 1997; 28 :443–449. [ PubMed ] [ Google Scholar ]50. 

Morizono K, et al. Redirecționarea vectorului lentiviral către glicoproteina P pe melanomul metastatic prin injecție intravenoasă. Nat. Med. 2005; 11 :346–352. [ PubMed ] [ Google Scholar ]51. 

Hammond AL, et al. Anticorpul cu un singur lanț afișat pe un virus recombinant al rujeolei conferă intrarea prin antigenul carcinoembrionar asociat tumorii. J. Virol. 2001; 75 :2087–2096. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]52. 

Mansour M, Palese P, Zamarin D. Specificitatea oncolitică a virusului bolii Newcastle este mediată de selectivitatea pentru celulele rezistente la apoptoză. J. Virol. 2011; 85 :6015–6023. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]53. 

Strong JE, Coffey MC, Tang D, Sabinin P, Lee PW. Baza moleculară a oncolizei virale: uzurparea căii de semnalizare Ras de către reovirus. EMBO J. 1998; 17 :3351–3362. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]54. 

Parato KA, et al. Poxvirusul oncolitic JX-594 se reproduce selectiv și distruge celulele canceroase conduse de căi genetice activate în mod obișnuit în cancere. Mol. Acolo. 2012; 20 :749–758. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]55. 

Farassati F, Yang AD, Lee PW. Oncogenele din calea de semnalizare Ras dictează permisivitatea celulei gazdă față de virusul herpes simplex 1. Nat. Cell Biol. 2001; 3 :745–750. [ PubMed ] [ Google Scholar ]56. 

Cuddington BP, Mossman KL. Permisivitatea celulelor canceroase umane la herpesvirusul bovin oncolitic 1 este mediată parțial de activitatea KRAS. J. Virol. 2014; 88 :6885–6895. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]57. 

Bischoff JR, Samuel CE. Mecanismul de acțiune a interferonului. Activarea proteinei kinazei P1/eIF-2 α umană de către ARNm de clasă s reovirus individuale: ARNm s1 este un activator puternic în raport cu ARNm s4. Virologie. 1989; 172 :106–115. [ PubMed ] [ Google Scholar ]

58. Wilden H, Fournier P, Zawatzky R, Schirrmacher V. Expression of RIG-I, IRF3, IFN-β and IRF7 determines resistance or susceptibility of cells to infection by Newcastle Disease Virus. Int. J. Oncol. 2009;34:971–982. [PubMed] [Google Scholar]

59. Bell JC, Lichty B, Stojdl D. Getting oncolytic virus therapies off the ground. Cancer Cell. 2003;4:7–11. [PubMed] [Google Scholar]

60. Vaha-Koskela MJ, Heikkila JE, Hinkkanen AE. Oncolytic viruses in cancer therapy. Cancer Lett. 2007;254:178–216. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

61. Stojdl DF, et al. Exploiting tumor-specific defects in the interferon pathway with a previously unknown oncolytic virus. Nat. Med. 2000;6:821–825. [PubMed] [Google Scholar]62. 

Takaoka A, et al. Integrarea semnalizării interferon-α/β la răspunsurile p53 în suprimarea tumorii și apărarea antivirală. Natură. 2003; 424 :516–523. [ PubMed ] [ Google Scholar ]63. 

DeWeese TL, et al. Un studiu de fază I a CV706, un adenovirus oncolitic selectiv cu PSA, competent pentru replicare, pentru tratamentul cancerului de prostată recurent local după radioterapie. Cancer Res. 2001; 61 :7464–7472. [ PubMed ] [ Google Scholar ]64. 

Chang J, şi colab. Un studiu de fază I al KH901, un factor de stimulare a coloniilor de granulocite-macrofage cu replicare condiționată: adenovirus oncolitic armat pentru tratamentul cancerelor de cap și gât. Cancer Biol. Acolo. 2009; 8 :676–682. [ PubMed ] [ Google Scholar ]65. 

Ramesh N, și colab. CG0070, un factor de stimulare a coloniilor de macrofage granulocite cu replica condiționată – adenovirus oncolitic armat pentru tratamentul cancerului de vezică urinară. Clin. Cancer Res. 2006; 12 :305–313. [ PubMed ] [ Google Scholar ]66. 

Neuman E, Flemington EK, Sellers WR, Kaelin WG., Jr. Transcrierea genei E2F-1 este făcută dependentă de ciclul celular de situsurile de legare la ADN-ul E2F din promotorul său. Mol. Celulă. Biol. 1994; 14 :6607–6615. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]67. 

Post DE, et al. Terapia genică a cancerului țintită folosind un adenovirus oncolitic dependent de factor inductibil de hipoxie, înarmat cu interleukină-4. Cancer Res. 2007; 67 :6872–6881. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]68. 

Leber MF, et al. Virușii rujeolici oncolitici sensibili la microARN pentru tropismul vectorial specific cancerului. Mol. Acolo. 2011; 19 :1097–1106. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]69. 

Freeman AI, et al. Studiu de fază I/II a virusului oncolitic NDV-HUJ intravenos în glioblastomul multiform recurent. Mol. Acolo. 2006; 13 :221–228. [ PubMed ] [ Google Scholar ]70. 

Brown SM, MacLean AR, McKie EA, Harland J. Factorul de virulență al virusului herpes simplex ICP34.5 și complexul de proteină celulară MyD116 cu antigenul nuclear celular în proliferare prin domeniul de 63 de aminoacizi conservat în ICP34.5, MyD116, și GADD34. J. Virol. 1997; 71 :9442–9449. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]71. 

Harland J, Dunn P, Cameron E, Conner J, Brown SM. Proteina virusului herpes simplex (HSV) ICP34.5 este o componentă virion care formează un complex de legare ADN cu antigenul nuclear celular în proliferare și proteinele de replicare a HSV. J. Neurovirol. 2003; 9 :477–488. [ PubMed ] [ Google Scholar ]72. 

Orvedahl A, et al. HSV-1 ICP34.5 conferă neurovirulență prin țintirea proteinei autofagie Beclin 1. Microbul gazdă celulară. 2007; 1 :23–35. [ PubMed ] [ Google Scholar ]73. 

Davis, KL, Korom, M. & Morrison, LA Herpes simplex virus 2 ICP34.5 conferă neurovirulență prin reglarea răspunsului la interferon de tip I. Virologie 468–470, 330–339 (2014). [ PubMed ]74. 

Liu BL, et al. ICP34.5 a șters virusul herpes simplex cu proprietăți oncolitice îmbunătățite, de stimulare a imunității și antitumorale. Gene Ther. 2003; 10 :292–303. [ PubMed ] [ Google Scholar ]75. 

Shafren DR, Dorahy DJ, Ingham RA, Burns GF, Barry RD. Coxsackievirus A21 se leagă de factorul de accelerare a dezintegrarii, dar necesită molecula de adeziune intercelulară 1 pentru intrarea în celule. J. Virol. 1997; 71 :4736–4743. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]76. 

Colamonici OR, Domanski P, Sweitzer SM, Larner A, Buller RM. Gena B18R a virusului Vaccinia codifică o proteină de legare a interferonului de tip I care blochează semnalizarea transmembranară a interferonului α. J. Biol. Chim. 1995; 270 :15974–15978. [ PubMed ] [ Google Scholar ]77. 

Gulley JL, şi colab. Studiu pilot al vaccinării cu vaccinuri recombinate pe bază de poxviral CEA-MUC-1-TRICOM la pacienții cu carcinom metastatic. Clin. Cancer Res. 2008; 14 :3060–3069. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]78. 

Kirn DH, Wang Y, Le Boeuf F, Bell J, Thorne SH. Direcționarea interferonului-β pentru a produce un virus specific al vaccinului oncolitic multi-mecanist. PLoS Med. 2007; 4 :e353. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]79. 

Toda M, Martuza RL, Rabkin SD. Inhibarea creșterii tumorii prin inocularea intratumorală a vectorilor virusului herpes simplex defecte care exprimă factorul de stimulare a coloniilor granulocite-macrofage. Mol. Acolo. 2000; 2 :324–329. [ PubMed ] [ Google Scholar ]80. 

Hu JC, şi colab. Un studiu de fază I al OncoVEXGM-CSF, un virus herpes simplex oncolitic de a doua generație care exprimă factor de stimulare a coloniilor de macrofage granulocitare. Clin. Cancer Res. 2006; 12 :6737–6747. [ PubMed ] [ Google Scholar ]81. 

Burke JM, et al. Un prim studiu în faza 1 umană a CG0070, un GM-CSF care exprimă adenovirusul oncolitic, pentru tratamentul cancerului vezicii urinare non-invazive musculare. J. Urol. 2012; 188 :2391–2397. [ PubMed ] [ Google Scholar ]82. 

Mastrangelo MJ, et al. Virusul care codifică GM-CSF recombinant intratumoral ca terapie genică la pacienții cu melanom cutanat. Gena cancerului Ther. 1999; 6 :409–422. [ PubMed ] [ Google Scholar ]83. 

Li JL, şi colab. Un studiu de fază I de administrare intratumorală a adenovirusului oncolitic recombinant care supraexprimă HSP70 la pacienții cu tumori solide avansate. Gene Ther. 2009; 16 :376–382. [ PubMed ] [ Google Scholar ]84. 

Tomazin R, et al. Virusul herpes simplex tip 2 ICP47 inhibă TAP uman, dar nu TAP la șoarece. J. Virol. 1998; 72 :2560–2563. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]85. 

Heise C, et al. ONYX-015, un adenovirus atenuat de gena E1B, provoacă citoliză specifică tumorii și eficacitate antitumorală care poate fi sporită de agenți chimioterapeutici standard. Nat. Med. 1997; 3 :639–645. [ PubMed ] [ Google Scholar ]86. 

Yuan ZY, Zhang L, Li S, Qian XZ, Guan ZZ. Siguranța unui adenovirus cu deleție E1B administrat intratumoral la pacienții cu cancer. Ai Zheng. 2003; 22 :310–313. [ PubMed ] [ Google Scholar ]87. 

Poppers J, Mulvey M, Khoo D, Mohr I. Inhibarea activării PKR de către domeniul de legare a ARN bogat în prolină al proteinei Us11 de tip 1 a virusului herpes simplex. J. Virol. 2000; 74 :11215–11221. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]88. 

Di Piazza M, et al. Activarea citosolică a catepsinelor mediază uciderea indusă de parvovirus H-1 a celulelor gliom rezistente la cisplatină și TRAIL. J. Virol. 2007; 81 :4186–4198. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]89. 

Grekova S, et al. Celulele imune participă la activitatea oncosupresivă a parvovirusului H-1PV și sunt activate ca urmare a infecției lor abortive cu acest agent. Cancer Biol. Acolo. 2010; 10 :1280–1289. [ PubMed ] [ Google Scholar ]90. 

Bar S, Daeffler L, Rommelaere J, Nuesch JP. Ieșirea veziculoasă a parvovirusurilor litice neîncapsulate depinde de funcționarea gelsolinei. PLoS Pathog. 2008; 4 :e1000126. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]91. 

Sova P, et al. Un vector de adenovirus oncolitic țintit și replicat condiționat, care exprimă TRAIL pentru tratamentul metastazelor hepatice. Mol. Acolo. 2004; 9 :496–509. [ PubMed ] [ Google Scholar ][PubMed] 92. 

Hirvinen M, et al. Efectele imunologice ale unui adenovirus oncolitic cu factor de necroză tumorală α. Zumzet. Gene Ther. 2015; 26 : 134–144. [ PubMed ] [ Google Scholar93. 

Freytag SO, Rogulski KR, Paielli DL, Gilbert JD, Kim JH. O nouă abordare în trei direcții pentru a ucide celulele canceroase în mod selectiv: virale concomitente, genă dublă sinucigașă și radioterapie. Zumzet. Gene Ther. 1998; 9 :1323–1333. [ PubMed ] [ Google Scholar ]94. 

Freytag SO, et al. Studiu de fază I a terapiei genice dublu sinucidere mediată de adenovirus, competentă în replicare, pentru tratamentul cancerului de prostată recurent local. Cancer Res. 2002; 62 :4968–4976. [ PubMed ] [ Google Scholar ]95. 

Foloppe J, et al. Livrarea țintită a unei gene suicidare la tumorile colorectale umane de către un virus vaccinia cu replicare condiționată. Gene Ther. 2008; 15 :1361–1371. [ PubMed ] [ Google Scholar ]96. 

Kubo H, şi colab. Studiu clinic de fază I cu escaladare a dozei de vector adenovirus purtător de timidină kinază a virusului herpes simplex condus de promotorul osteocalcinei în cancerul de prostată refractar la hormoni localizat și metastatic. Zumzet. Gene Ther. 2003; 14 :227–241. [ PubMed ] [ Google Scholar ]97. 

Alvarez RD, Curiel DT. Un studiu de fază I al eliberării intraperitoneale mediate de vector de adenovirus recombinant a genei timidin kinazei virusului herpes simplex (HSV-TK) și a ganciclovirului intravenos pentru pacienții cu cancer ovarian și extraovarian tratați anterior. Zumzet. Gene Ther. 1997; 8 :597–613. [ PubMed ] [ Google Scholar ]98. 

Aghi M, Chou TC, Suling K, Breakefield XO, Chiocca EA. Tratamentul multimodal al cancerului mediat de un virus oncolitic replicat care furnizează terapii genice cu timidin kinază a virusului oxazafosforină/șobolan P450 2B1 și ganciclovir/virus herpes simplex. Cancer Res. 1999; 59 :3861–3865. [ PubMed ] [ Google Scholar ]99. 

Boviatsis EJ, et al. Supraviețuirea pe termen lung a șobolanilor care adăpostesc neoplasme cerebrale tratați cu ganciclovir și un vector virus herpes simplex care păstrează o genă intactă a timidin kinazei. Cancer Res. 1994; 54 :5745–5751. [ PubMed ] [ Google Scholar ]100. 

Freytag SO, şi colab. Studiu de fază I al terapiei genetice dublu-suicidă mediată de adenovirus, competentă în replicare, în combinație cu radioterapie conformă tridimensională cu doză convențională pentru tratamentul cancerului de prostată cu risc mediu până la înalt nou diagnosticat. Cancer Res. 2003; 63 :7497–7506. [ PubMed ] [ Google Scholar ]101. 

Doronin K, et al. Vectori de adenovirus specifici tumorii, competenți de replicare, care supraexprimă proteina morții adenovirusului. J. Virol. 2000; 74 :6147–6155. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]102. 

Cattaneo R, Miest T, Shashkova EV, Barry MA. Viruși reprogramați ca terapii împotriva cancerului: țintiți, înarmați și protejați. Nat. Rev. Microbiol. 2008; 6 :529–540. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]103. 

Tesfay MZ, et al. PEGilarea virusului stomatitei veziculoase extinde persistența virusului în circulația sanguină a șoarecilor imunizați pasiv. J. Virol. 2013; 87 :3752–3759. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]104. 

O’Riordan Catherine R., Lachapelle Amy, Delgado Cristina, Parkes Vincent, Wadsworth Samuel C., Smith Alan E., Francis Gillian E. PEGylation of Adenovirus with Retention of Infectivity and Protection from Neutralizing Antibody in Vitro and in Vivo. Terapia genică umană. 1999; 10 (8):1349–1358. [ PubMed ] [ Google Scholar ]105. 

Morrison J, şi colab. Viroterapia cancerului ovarian cu adenovirus acoperit cu polimeri redirecționat către receptorul factorului de creștere epidermic. Mol. Acolo. 2008; 16 :244–251. [ PubMed ] [ Google Scholar ]106. 

Mader EK, et al. Purtătorii de celule stem mezenchimale protejează virusurile oncolitice ale rujeolei de neutralizarea anticorpilor într-un model de terapie ortotopică a cancerului ovarian. Clin. Cancer Res. 2009; 15 :7246–7255. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]107. 

Willmon C, et al. Purtători celulari pentru virusuri oncolitice: Fed Ex pentru terapia cancerului. Mol. Acolo. 2009; 17 :1667–1676. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]108. 

Berger C, şi colab. Exprimarea virusului herpes simplex ICP47 și a citomegalovirusului uman US11 împiedică recunoașterea produselor transgene de către limfocitele T citotoxice CD8 ⁺ . J. Virol. 2000; 74 :4465–4473. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]109. 

Fulci G, et al. Ciclofosfamida îmbunătățește viroterapie cu gliom prin inhibarea răspunsurilor imune înnăscute. Proc. Natl Acad. Sci. STATELE UNITE ALE AMERICII. 2006; 103 :12873–12878. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]110. 

Bilbao R, et al. O barieră a tumorii sângelui limitează transferul de gene la cancerul hepatic experimental: efectul compușilor vasoactivi. Gene Ther. 2000; 7 :1824–1832. [ PubMed ] [ Google Scholar ]111. 

Eisenberg DP, et al. Hipertermia potențează uciderea virală a herpesului oncolitic a cancerului pancreatic printr-o cale proteică a șocului termic. Interventie chirurgicala. 2010; 148 :325–334. [ PubMed ] [ Google Scholar ]112. 

Ingemarsdotter CK, et al. Paclitaxelul în doză mică face sinergie cu adenovirusurile oncolitice prin alunecare mitotică și apoptoză în cancerul ovarian. Oncogene. 2010; 29 :6051–6063. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]113. 

Deguchi T, et al. Combinația dintre inhibitorul de angiogeneză tumorală bevacizumab și injecții intratumorale cu virusul herpes oncolitic ca strategie de tratament pentru cancerele gastrice umane. Hepatogastroenterologie. 2012; 59 :1844–1850. [ PubMed ] [ Google Scholar ]114. 

McKee TD, et al. Degradarea colagenului fibrilar într-o xenogrefă de melanom uman îmbunătățește eficacitatea vectorului virusului herpes simplex oncolitic. Cancer Res. 2006; 66 :2509–2513. [ PubMed ] [ Google Scholar ]115. 

Ganesh S, Gonzalez-Edick M, Gibbons D, Van Roey M, Jooss K. Coadministrarea intratumorală a enzimei hialuronidază și adenovirusurilor oncolitice crește potența virusului în modelele de tumori metastatice. Clin. Cancer Res. 2008; 14 :3933–3941. [ PubMed ] [ Google Scholar ]116. 

Guedan S, et al. Expresia hialuronidază de către un adenovirus oncolitic sporește răspândirea sa intratumorală și suprimă creșterea tumorii. Mol. Acolo. 2010; 18 :1275–1283. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]117. 

Ebert O, et al. Inducerea Syncytia sporește potențialul oncolitic al virusului stomatitei veziculoase în viroterapie pentru cancer. Cancer Res. 2004; 64 :3265–3270. [ PubMed ] [ Google Scholar ]118. 

Zhang J, Frolov I, Russell SJ. Terapia genică pentru gliom malign folosind vectori Sindbis care exprimă o glicoproteină membranară fusogenă. J. Gene Med. 2004; 6 :1082–1091. [ PubMed ] [ Google Scholar ]119. 

Springfeld C, et al. Eficacitatea oncolitică și siguranța sporită a virusului rujeolic activat de metaloproteinazele matricei secretate de tumori. Cancer Res. 2006; 66 :7694–7700. [ PubMed ] [ Google Scholar ]120. 

He B, Gross M, Roizman B. Proteina γ ₁ 34,5 a virusului herpes simplex 1 se formează cu proteina fosfataza 1α pentru a defosforila subunitatea α a factorului 2 de inițiere a translației eucariote și a împiedica oprirea sintezei proteinelor de către ARN-ul dublu catenar -protein kinaza activata. Proc. Natl Acad. Sci. STATELE UNITE ALE AMERICII. 1997; 94 :843–848. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]121. 

Kaufman HL, et al. Imunitatea locală și la distanță indusă de vaccinarea intralezională cu un virus herpes oncolitic care codifică GM-CSF la pacienții cu melanom în stadiul IIIc și IV. Ann. Surg. Oncol. 2010; 17 :718–730. [ PubMed ] [ Google Scholar ]122. 

Kaufman HL, Bines SD. Studiu OPTIM: un studiu de fază III al unui virus herpes oncolitic care codifică GM-CSF pentru melanomul în stadiul III sau IV nerezecabil. Viitorul Oncol. 2010; 6 :941–949. [ PubMed ] [ Google Scholar ]123. 

Puzanov I, et al. Tipare de supraviețuire, siguranță și răspuns într-un studiu multicentric de fază 1b cu talimogene laherparepvec (T-VEC) și ipilimumab (ipi) în melanom în stadiul IIIB-IV, nerezecat anterior, netratat. J. Clin. Oncol. 2015; 33 :S9063. [ Google Scholar ]124. 

Bischoff JR, et al. Un mutant de adenovirus care se reproduce selectiv în celulele tumorale umane cu deficit de p53. Ştiinţă. 1996; 274 :373–376. [ PubMed ] [ Google Scholar ]

125. Rao L, et al. The adenovirus E1A proteins induce apoptosis, which is inhibited by the E1B 19-kDa and Bcl-2 proteins. Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1992;89:7742–7746. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

126. Huebner RJ, Rowe WP, Schatten WE, Smith RR, Thomas LB. Studies on the use of viruses in the treatment of carcinoma of the cervix. Cancer. 1956;9:1211–1218. [PubMed] [Google Scholar]

127. Laborda E, Puig-Saus C, Cascallo M, Chillon M, Alemany R. Adeno-associated virus enhances wild-type and oncolytic adenovirus spread. Hum. Gene Ther. Methods. 2013;24:372–380. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

128. Kim KH, et al. A phase I clinical trial of Ad5/3-Δ24, a novel serotype-chimeric, infectivity-enhanced, conditionally-replicative adenovirus (CRAd), in patients with recurrent ovarian cancer. Gynecol. Oncol. 2013;130:518–524. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

129. Dmitriev I, et al. An adenovirus vector with genetically modified fibers demonstrates expanded tropism via utilization of a coxsackievirus and adenovirus receptor-independent cell entry mechanism. J. Virol. 1998;72:9706–9713. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

130. Shayakhmetov DM, Lieber A. Dependence of adenovirus infectivity on length of the fiber shaft domain. J. Virol. 2000;74:10274–10286. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

131. Takagi-Kimura M, et al. Enhanced antitumor efficacy of fiber-modified, midkine promoter-regulated oncolytic adenovirus in human malignant mesothelioma. Cancer Sci. 2013;104:1433–1439. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

132. Chen GX, et al. Clinical utility of recombinant adenoviral human p53 gene therapy: current perspectives. OncoTargets Ther. 2014;7:1901–1909. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

133. Xia ZJ, et al. Phase III randomized clinical trial of intratumoral injection of E1B gene-deleted adenovirus (H101) combined with cisplatin-based chemotherapy in treating squamous cell cancer of head and neck or esophagus. Ai Zheng. 2004;23:1666–1670. [PubMed] [Google Scholar]

134. Xu R, Johnson AJ, Liggitt D, Bevan MJ. Cellular and humoral immunity against vaccinia virus infection of mice. J. Immunol. 2004;172:6265–6271. [PubMed] [Google Scholar]

135. Tang J, et al. Human T-cell responses to vaccinia virus envelope proteins. J. Virol. 2006;80:10010–10020. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

136. Kim JH, et al. Systemic armed oncolytic and immunologic therapy for cancer with JX-594, a targeted poxvirus expressing GM-CSF. Mol. Ther. 2006;14:361–370. [PubMed] [Google Scholar]

137. Scholl SM, et al. Recombinant vaccinia virus encoding human MUC1 and IL2 as immunotherapy in patients with breast cancer. J. Immunother. 2000;23:570–580. [PubMed] [Google Scholar]

138. Cole DJ, et al. Phase I study of recombinant CEA vaccinia virus vaccine with post vaccination CEA peptide challenge. Hum. Gene Ther. 1996;7:1381–1394. [PubMed] [Google Scholar]

139. Kaufman HL, et al. Targeting the local tumor microenvironment with vaccinia virus expressing B7.1 for the treatment of melanoma. J. Clin. Invest. 2005;115:1903–1912. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

140. Kaufman HL, et al. Local delivery of vaccinia virus expressing multiple costimulatory molecules for the treatment of established tumors. Hum. Gene Ther. 2006;17:239–244. [PubMed] [Google Scholar]141. 

Park, SH et al. Studiu de fază Ib a Pexa-Vec intravenos bisăptămânal (JX-594), un virus vaccinia oncolitic și imunoterapeutic în cancerul colorectal. Mol. Acolo. 10.1038/mt.2015.109 (2015). [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ]142. 

Heo J, şi colab. Studiu clinic randomizat de determinare a dozei de vaccinia imunoterapeutică oncolitică JX-594 în cancerul hepatic. Nat. Med. 2013; 19 :329–336. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]143. 

Miyamoto S, et al. Coxsackievirus B3 este un virus oncolitic cu proprietăți imunostimulatoare care este activ împotriva adenocarcinomului pulmonar. Cancer Res. 2012; 72 :2609–2621. [ PubMed ] [ Google Scholar ]144. 

Andtbacka RHI, et al. Date finale de la CALM: Un studiu de fază II al imunoterapiei cu virusul oncolitic Coxsackievirus A21 (CVA21) la pacienții cu melanom avansat. J. Clin. Oncol. 2015; 33 :S9030. [ Google Scholar ]145. 

Elankumaran S, et al. Virusul recombinant al bolii Newcastle de tip I sensibil la interferon pentru viroterapie oncolitică. J. Virol. 2010; 84 :3835–3844. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]146. 

Ito Y, Nagai Y, Maeno K. Producția de interferon în celulele splinei de șoarece și fibroblaste de șoarece (celule L) stimulate de diferite tulpini ale virusului bolii Newcastle. J. Gen. Virol. 1982; 62 :349–352. [ PubMed ] [ Google Scholar ]147. 

Washburn B, Schirrmacher V. Infecția celulelor tumorale umane prin virusul bolii de Newcastle duce la reglarea HLA și a moleculelor de adeziune celulară și la inducerea interferonilor, chemokinelor și în final a apoptozei. Int. J. Oncol. 2002; 21 :85–93. [ PubMed ] [ Google Scholar ]148. 

Ertel C, Millar NS, Emmerson PT, Schirrmacher V, von Hoegen P. Hemaglutinina virală mărește răspunsurile celulelor T citotoxice specifice peptidei. EURO. J. Immunol. 1993; 23 :2592–2596. [ PubMed ] [ Google Scholar ]149. 

Bian H, Wilden H, Fournier P, Peeters B, Schirrmacher V. Eficacitatea in vivo a țintirii tumorii sistemice a unui vector ARN viral cu proprietăți oncolitice folosind o proteină adaptor bispecific. Int. J. Oncol. 2006; 29 :1359–1369. [ PubMed ] [ Google Scholar ]150. 

Janke M, şi colab. Virusul recombinant al bolii Newcastle (NDV) cu genă inserată care codifică GM-CSF ca un nou vector pentru terapia imunogene a cancerului. Gene Ther. 2007; 14 :1639–1649. [ PubMed ] [ Google Scholar ]151. 

Apostolidis L, Schirrmacher V, Fournier P. Efectul antitumoral mediat de gazdă al virusului bolii Newcastle oncolitice după aplicarea locoregională. Int. J. Oncol. 2007; 31 :1009–1019. [ PubMed ] [ Google Scholar ]152. 

Pecora AL, et al. Studiu de fază I de administrare intravenoasă a PV701, un virus oncolitic, la pacienții cu cancere solide avansate. J. Clin. Oncol. 2002; 20 :2251–2266. [ PubMed ] [ Google Scholar ]153. 

Minuk GY, Paul RW, Lee PW. Prevalența anticorpilor împotriva reovirusului de tip 3 la adulții cu boală hepatică colestatică idiopatică. J. Med. Virol. 1985; 16 :55–60. [ PubMed ] [ Google Scholar ]154. 

Minuk GY, et al. Infecția cu reovirus tip 3 la pacienții cu ciroză biliară primară și colangită sclerozantă primară. J. Hepatol. 1987; 5 :8–13. [ PubMed ] [ Google Scholar ]155. 

Bluming AZ, Ziegler JL. Regresia limfomului Burkitt în asociere cu infecția cu rujeolă. Lancet. 1971; 2 :105–106. [ PubMed ] [ Google Scholar ]156. 

Pasquinucci G. Efectul posibil al rujeolei asupra leucemiei. Lancet. 1971; 1 :136. [ PubMed ] [ Google Scholar ]157. 

Taqi AM, Abdurrahman MB, Yakubu AM, Fleming AF. Regresia bolii Hodgkin după rujeolă. Lancet. 1981; 1 :1112. [ PubMed ] [ Google Scholar ]158. 

Merrill MK, şi colab. Receptorul poliovirusului CD155-țintit oncoliza gliomului. Neuro Oncol. 2004; 6 :208–217. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]159. 

Gromeier M, Lachmann S, Rosenfeld MR, Gutin PH, Wimmer E. Intergeneric poliovirus recombinants for the treatment of malign gliom. Proc. Natl Acad. Sci. STATELE UNITE ALE AMERICII. 2000; 97 :6803–6808. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]160. 

Merrill MK, Dobrikova EY, Gromeier M. Reprimarea specifică tipului celular a activității site-ului de intrare în ribozom intern prin proteina de legare a ARN-ului dublu catenar 76. J. Virol. 2006; 80 :3147–3156. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]161. 

Merrill MK, Gromeier M. Heterodimerul heterodimer 76:NF45 de legare la ARN dublu catenar inhibă inițierea translației la locul de intrare în ribozom intern al rinovirusului de tip 2. J. Virol. 2006; 80 :6936–6942. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]162. 

Lu YC, şi colab. Replicarea vectorilor retrovirali pentru viroterapie oncolitică a carcinomului hepatocelular experimental. Oncol. Rep. 2012; 28 :21–26. [ PubMed ] [ Google Scholar ]163. 

Hales RK, et al. Evaluarea beneficiului oncologic în studiile clinice cu agenți de imunoterapie. Ann. Oncol. 2010; 21 :1944–1951. [ PubMed ] [ Google Scholar ]164. 

Small EJ, et al. Un studiu de fază I a CG7870 intravenos, un adenovirus oncolitic cu antigen specific de prostată, selectiv pentru replicare, pentru tratamentul cancerului de prostată metastatic, refractar la hormoni. Mol. Acolo. 2006; 14 :107–117. [ PubMed ] [ Google Scholar ]165. 

Laurie SA, et al. Un studiu clinic de fază 1 al administrării intravenoase a PV701, un virus oncolitic, folosind desensibilizarea în două etape. Clin. Cancer Res. 2006; 12 :2555–2562. [ PubMed ] [ Google Scholar ]166. 

Haddad D, et al. Caracteristicile imagistice, distribuția tisulară și răspândirea unui nou virus oncolitic vaccinia purtător de iodură de sodiu uman. Plus unu. 2012; 7 :e41647. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]167. 

Hasegawa K, et al. Terapia duală a cancerului ovarian folosind virusuri rujeolice care exprimă antigenul carcinoembrionar și simportor de iodură de sodiu. Clin. Cancer Res. 2006; 12 :1868–1875. [ PubMed ] [ Google Scholar ]168. 

Dingli D, et al. Radioviroterapie ghidată de imagini pentru mielomul multiplu utilizând un virus recombinant al rujeolei care exprimă simportorul tiroidian de iodură de sodiu. Sânge. 2004; 103 :1641–1646. [ PubMed ] [ Google Scholar ]169. 

Kummer C, şi colab. Imagistica tomografică cu emisie de pozitroni multitracer a expresiei genelor exogene mediată de un vector amplicon virus herpes simplex universal 1. Mol. Imag. 2007; 6 :181–192. [ PubMed ] [ Google Scholar ]170. 

Tjuvajev JG, et al. Imagistica neinvazivă a transferului și expresiei genei timidin kinazei virusului herpesului: o metodă potențială pentru monitorizarea terapiei genetice clinice. Cancer Res. 1996; 56 :4087–4095. [ PubMed ] [ Google Scholar ]171. 

Grampp G, Ramanan S. Gestionarea evenimentelor neașteptate în fabricarea medicamentelor biologice. Biomedicamente. 2013; 27 :305–316. [ PubMed ] [ Google Scholar ]172. 

Chen D. Asigurarea siguranței pentru produsele biologice fabricate în culturi de celule de mamifere: o strategie pe mai multe niveluri. Adv. Biochim. ing. Biotehnologia. 2014; 139 :167–183. [ PubMed ] [ Google Scholar ]173. 

Martin-Moe S, şi colab. O nouă foaie de parcurs pentru dezvoltarea produselor medicamentoase biofarmaceutice: integrarea dezvoltării, validării și calității prin proiectare. J. Pharm. Sci. 2011; 100 :3031–3043. [ PubMed ] [ Google Scholar ]174. 

Direcția Europeană pentru Calitatea Medicamentului. Teste pentru agenți străini în vaccinurile virale pentru uz uman. European Pharmacopeia 4th ed 415–418 (Consiliul Europei, 2002). Orientări stabilite pentru producția de virusuri utilizați în producția de vaccinuri care pot constitui precedentul pentru producerea virusului oncolitic.175. 

Direcția Europeană pentru Calitatea Medicamentului. Teste pentru agenți străini în vaccinurile virale pentru uz uman. Farmacopeea Europeană 4th ed 148–149 (Consiliul Europei, 2002). Orientări stabilite pentru producția de virusuri utilizați în producția de vaccinuri care pot constitui precedentul pentru producerea virusului oncolitic.176. 

Lolkema MP, et al. Un studiu de fază I al combinației dintre reovirusul intravenos de tip 3 Dearing și gemcitabină la pacienții cu cancer avansat. Clin. Cancer Res. 2011; 17 :581–588. [ PubMed ] [ Google Scholar ]177. 

Harrow S, et al. Injectarea HSV1716 în creierul adiacent tumorii după rezecția chirurgicală a gliomului de grad înalt: date de siguranță și supraviețuire pe termen lung. Gene Ther. 2004; 11 :1648–1658. [ PubMed ] [ Google Scholar ]178. 

Herman JR, et al. Terapia genică in situ pentru adenocarcinomul de prostată: un studiu clinic de fază I. Zumzet. Gene Ther. 1999; 10 :1239–1249. [ PubMed ] [ Google Scholar ]179. 

Teh BS, et al. Studiu de fază I/II care evaluează radioterapia combinată și terapia genică in situ cu sau fără terapie hormonală în tratamentul cancerului de prostată – un raport preliminar. Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Fiz. 2001; 51 :605–613. [ PubMed ] [ Google Scholar ]180. 

Herbst RS, et al. Corelații predictive ale răspunsului la anticorpul anti-PD-L1 MPDL3280A la pacienții cu cancer. Natură. 2014; 515 :563–567. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]181. 

Bellucci R, et al. Activarea JAK1 și JAK2 indusă de interferon-γ suprimă susceptibilitatea celulelor tumorale la celulele NK prin reglarea în sus a expresiei PD-L1. Oncoimunologie. 2015; 4 :e1008824. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]182. 

Terawaki S, et al. IFN-α promovează direct transcripția programată a morții celulare-1 și limitează durata imunității mediate de celulele T. J. Immunol. 2011; 186 :2772–2779. [ PubMed ] [ Google Scholar ]