Arhive etichetă | pierdere musculară

chimioterapia induce casexie-studiu clinic

Abstract

SCOPUL

Efectele terapiilor antineoplazice specifice asupra progresiei pierderii asociate cancerului rămân necaracterizate. Am selectat o terapie specifică, sorafenib, datorită asocierii raportate cu pierderea în greutate.

PACIENȚII ȘI METODELE Pacienții cu cancer renal metastatic (RCC) care au fost rezistenți la terapia standard (N = 80) au primit sorafenib 400 mg de două ori pe zi sau placebo într-un studiu clinic randomizat, dublu orb. Analiza imaginii tomografice computerizate, care are o mare precizie și specificitate pentru evaluarea mușchilor specifici și a țesuturilor adipoase, a fost utilizată pentru a defini modificarea mușchiului scheletic total și a țesutului adipos.

Rezultate

La includere, 51% dintre pacienți au fost supraponderali sau obezi (adică, indicele de masă corporală [IMC]> 25 kg / m (2)). Doar 5% erau subponderali. pierderea musculară avansată (adică sarcopenia) a fost prezentă la 72% dintre pacienții cu IMC mai mică de 25 și la 34% dintre cei cu IMC mai mare de 25. Pacienții au primit placebo pentru o perioadă medie de 6 luni și au primit sorafenib timp de 1 an.

Pacienții din grupul placebo au avut o greutate corporală stabilă timp de 6 luni (0,8 kg +/- 0,7 kg), fără modificări semnificative ale mușchilor sau grăsimilor. 

Pacienții care au primit sorafenib au pierdut 2,1 kg +/- 0,6 kg (P <0,01) în 6 luni și au pierdut 4,2 kg +/- 0,7 kg (P <.01) cu 1 an.

Pacienții tratați cu sorafenib au pierdut progresiv progresia mușchilor scheletici la 6 luni (scădere de 4,9%, P <.01) și 12 luni (scădere de 8,0%, P <.01). 

CONCLUZIE Sarcopenia este prevalentă la pacienții cu CRC metastatic și este o afecțiune ocultă la pacienții cu BMI normală sau înaltă. Pierderea de mușchi este în mod special exacerbată de sorafenib, în ​​concordanță cu dovezile privind rolul kinazelor în reglarea masei musculare. Pierderea musculară este un efect advers sorafenib care se poate referi la astenie, oboseală și dizabilități fizice.

PMID: 
20085939 
DOI: 
10.1200 / JCO.2009.24.9730
Association of Skeletal Muscle Wasting With Treatment With Sorafenib in Patients With Advanced Renal Cell Carcinoma: Results From a Placebo-Controlled Study
Show LessFrom the Departments of Supportive Care and Medical Oncology, Institut Gustave Roussy, Villejuif, France; and the Department of Oncology, University of Alberta, Edmonton, Canada.

Cancer-casexia-pierderi musculare: ultimele descoperiri in prevenire si tratament

Abstract

Casexia de cancer este o afecțiune clinică severă și dezactivată care însoțește frecvent dezvoltarea multor tipuri de cancer. Pierderea muschilor este semnul distinctiv al cașexiei de cancer și este asociat cu consecințe clinice grave, cum ar fi insuficiența fizică, calitatea scăzută a vieții, toleranța redusă la tratamente și supraviețuirea mai scurtă. Casexia de cancer poate evolua în diferite stadii de relevanță clinică, și anume pre-cașexia, cașexia și cașexia refractară. Având în vedere consecințele sale clinice dăunătoare, apare obligatorie prevenirea și / sau întârzierea progresiei cașexiei cancerului în stadiul său refractar, prin implementarea recunoașterii și tratării timpurii a modificărilor nutriționale și metabolice care apar în timpul cancerului. Cercetările privind mecanismele moleculare care stau la baza pierderii musculare în timpul cașexiei de cancer s-au extins în ultimii ani, permițând identificarea mai multor ținte terapeutice potențiale și dezvoltarea multor medicamente promițătoare. Mai mulți dintre acești agenți au ajuns deja la evaluarea clinică, dar devine din ce în ce mai evident că o singură terapie poate să nu fie complet reușită în tratamentul pierderii musculare cauzate de cancer, având în vedere patogeneza multifactorială și complexă.Acest lucru sugerează că sunt necesare intervenții timpurii și structurate multimodale (inclusiv suplimente nutriționale direcționate, exerciții fizice și intervenții farmacologice) pentru a preveni și / sau trata consecințele devastatoare ale acestei comorbidități de cancer, iar cercetarea viitoare ar trebui să se concentreze asupra acestei abordări.

Logo-ul țării

Link to Publisher's site
Ther Adv Med Oncol . 2017 mai; 9 (5): 369-382.
Publicat online 2017 Mar 8. doi: 10.1177 / 1758834017698643
PMCID: PMC5424865
PMID: 28529552 

Introducere

Pierderea musculară (cu sau fără pierderea de grăsime) este o caracteristică esențială a cașexiei de cancer, o afecțiune multifactorială care afectează negativ prognosticul pacienților și calitatea vieții. 1 , 2 Prezentarea severă și fenotipică a casexiei cauzate de cancer poate varia și deseori pierderea musculară poate fi o afecțiune ocultă. 3 Indiferent de indicele de masă corporală (IMC), depleția mușchilor scheletici este considerată un factor de prognostic semnificativ în timpul cancerului 4 și a fost asociată cu o incidență mai mare a toxicității chimioterapice, cu o perioadă mai scurtă de timp până la progresia tumorii, cu o evoluție chirurgicală mai slabă, cu insuficiență fizică și supraviețuire mai scurtă. 4 – 8

Cachexia de cancer poate rezulta din reducerea aportului de nutrienți și / sau disponibilitatea (secundară anorexiei, malabsorbției sau obstrucției mecanice) și anomaliilor metabolice, declanșate de o rețea complexă de citokine, hormoni și alți factori umorali derivați de tumori și gazdă. În afară de consecințele cancerului per se , efectele adverse ale terapiilor anti-neoplazice pot, de asemenea, să contribuie la exacerbarea acestei afecțiuni. 3 , 9 , 10

Mecanismele moleculare care stau la baza pierderii musculare legate de cancer nu au fost pe deplin elucidate. Dovezile disponibile sugerează că un rol proeminent este jucat de creșterea degradării proteinelor musculare, deși poate contribui, de asemenea, la diminuarea sintezei proteinelor musculare și la micogenizarea defectuoasă. În plus, modificările metabolismului energetic care implică disfuncție mitocondrială au fost implicate în procesul de risipă musculara si energetica. 11 , 12 Prevalența pierderii musculare a fost raportată între 20% și 70%, în funcție de tipul tumorii și de criteriile utilizate pentru evaluare. La pacienții cu cancer avansat, prevalența pierderii musculare s-a dovedit a fi variabilă și dependentă de tipul, etapa și instrumentul de evaluare a tumorii. La pacienții precoce cărora li s-a administrat tratament curativ, prevalența pierderii musculare a variat de la 16% la sân, 14 la 33% la cholangiocarcinom 15 și la 40,3% la pacienții cu carcinom hepatocelular. 16 Pierderea forței ,secundara la pierderea mușchilor este, de asemenea, frecventă la pacienții cu cancer. Chimioterapia poate induce oboseală și o scădere severă a forței musculare, mai ales la mușchii striați, 17 care pot fi agravate în continuare de activitatea fizică redusă. La pacienții care nu au fost pregătiți și li se administrează chimioterapie pentru limfom, s-a raportat o scădere a rezistenței musculare de până la 14,6%. 18 Pierderea rezistenței contractile și a funcției asociate pierderii musculare și apariția oboselii cronice poate duce la scăderea activității fizice, ceea ce la rândul său poate exacerba pierderile musculare prin instigarea unui ciclu vicios. 19

Deși depleția masei musculare este o caracteristică comună a cașexiei cancerului experimental și uman, au fost raportate discrepanțe în mecanismele care au condus la pierderea musculară legată de cancer între diferite modele experimentale, precum și la pacienții cu diferite tipuri de tumori, date disponibile în casexia cancerului uman sărăcăcioasă. 11 , 20 Aceste diferențe provoacă dezvoltarea unor strategii terapeutice eficiente și subliniază necesitatea implementării cercetării asupra pacienților și proiectarea sistemelor preclinice care, pe cât posibil, modelează scenariul clinic, 21 pentru a identifica categoriile de pacienți care mai mult ar putea răspunde la medicamente care vizează căi intracelulare specifice. În plus, dezvoltarea unor tratamente eficiente a fost împiedicată de variația ridicată a designului studiului clinic, incluzând criteriile de selecție diferite ale pacienților, obiectivele clinice, planurile de analiză și definiția celui mai bun tratament de susținere. 22 Timpul de administrare a terapiei este de asemenea critic: până în prezent, majoritatea studiilor clinice privind casexia de cancer au fost efectuate la pacienții foarte avansați în traiectoria bolii lor, iar experții au speculat că acest lucru ar putea fi un motiv pentru care multe medicamente, considerate eficace la pre- nu a prezentat niciun beneficiu în evaluarea clinică. 23 , 24 Într-adevăr, potrivit unui grup internațional de experți, cașexia cancerului poate evolua în trei etape de relevanță clinică: pre-cașexia, cașexia și cașexia refractară. Deși nu toți pacienții au experiență în mod necesar în toate aceste stadii, tratamentele ar trebui să înceapă mai devreme pentru a preveni sau întârzia progresia către cașexia refractară. 1 , 2

În ciuda acestor obstacole, în prezent sunt cercetați mai mulți agenți promițători care acționează asupra unor obiective moleculare specifice. Rezultatele obținute până în prezent sugerează că o singură terapie poate fi insuficientă pentru a contracara cașexia cancerului și că intervențiile timpurii multimodale (inclusiv suplimentele nutriționale vizate, exercițiile fizice și intervențiile farmacologice) ar trebui considerate cea mai bună modalitate de a gestiona aspectele multiple ale acestei comorbidități a cancerului.1 , 9 , 25 , 26

Prezentul articol are ca scop revizuirea celor mai recente descoperiri în prevenirea și tratamentul pierderilor musculare legate de cancer, care pot reprezenta baza pentru dezvoltarea viitoarelor terapii de cașexie.

Opțiuni de prevenire și tratament

Rolul suportului nutrițional

Intervențiile nutriționale ar trebui să fie o parte esențială a abordării multimodale a casexiei cauzate de cancer, deoarece în absența unei alimentări adecvate de energie și nutrienți este puțin probabil ca masele musculare și greutatea corporală să fie mărite sau stabilizate. Deoarece reducerea consumului de alimente este un mecanism patogen important și totuși reversibil, care reprezintă o pierdere a mușchilor legată de cancer, suportul nutrițional și metabolic trebuie început mai devreme decât întârziat, până când există un grad avansat de pierdere în greutate corporală. 1 , 2 , 27 Aceasta implică faptul că atunci când se face diagnosticul de cancer, orice pacient singur trebuie monitorizat nutrițional în paralel cu oncologul de către o unitate clinică de nutriție. 1 Pe parcursul acestei „căi paralele” trebuie să se asigure un suport nutrițional și metabolic continuu, care, în funcție de nevoile pacienților, poate include consiliere nutrițională, administrarea de suplimente orale, nutraceuticale și nutriție artificială. 1

Depășirea rezistenței anabolice: este o problemă clinică?

O caracteristică definitorie a cașexiei cauzate de cancer este că nu poate fi inversată complet prin suportul nutrițional convențional . 2 Cachexia de cancer, într-adevăr, este diferită de foamea simplă, deoarece, conceptual, atât inflamația, cât și anomaliile metabolice pot modifica răspunsul anabolic al mușchiului schelet după ingestia mesei. Dovezi recente, cu toate acestea, sugerează că pacienții cu cancer au un potențial anabolic exploatabil înainte de a ajunge la faza refractară a cașexiei, creând astfel o rațiune puternică pentru intervențiile nutriționale timpurii. 23 , 28 ,29 În acest sens, un studiu clinic euglicemic, hiperinsulinemic la pacienții cu cancer pulmonar fara celule mici cu stadiul III și IV (NSCLC) a arătat un răspuns anabolic în întregul corp în condiții de izoaminoacidemie, dar un anabolic normal al întregului corp raspuns la hiperaminoacidemia, sugerand ca un aport semnificativ de proteine ​​este necesar pentru a induce anabolismul intregului corp in timpul cancerului. 30

În mod consistent, un alt studiu a arătat că o formulare cu conținut ridicat de proteine ​​care conține niveluri ridicate de leucină, oligozaharide specifice și ulei de pește a fost capabilă să stimuleze anabolismul proteinelor musculare la pacienții cu cancer avansat comparativ cu un supliment nutrițional convențional.În sprijinul unui potențial anabolic conservat, un studiu recent a arătat că aportul de 14 g aminoacizi esențiali a determinat un răspuns anabolic la nivelul întregului corp la pacienții cu NSCLC stadiul III / IV. Un astfel de efect a fost comparabil cu cel observat în controalele sănătoase potrivite și independent de pierderea recentă în greutate, masa musculară, inflamația sistemică ușoară până la moderată și supraviețuirea. Un echilibru net pozitiv comparabil în timpul administrării pe cale orală a unei formulări disponibile în comerț a fost observat, de asemenea, la pacienții cu cancer pancreatic casectic și la martori, deși cu un alt cinetic proteic: într-adevăr, în timp ce la pacienții cu boala casectică s-a redus doar defalcarea proteinelor; la pacienții de control au fost modulate atât defalcarea proteinelor, cât și sinteza proteinelor. 33

În ansamblu, aceste studii sugerează că răspunsul anabolic eșuat asociat cu casexia de cancer, dacă este prezent, poate fi cel puțin parțial eludat prin asigurarea unui suport nutrițional adecvat(ANINOACIZI ESENTIALI, LEUCINA ,BCAA, ULEI PESTE). Sunt totuși necesare cercetări clinice in vivo pentru a determina în ce măsură, pe termen lung, pierderea musculară legată de cancer poate fi atenuată și inversată printr-o intervenție nutrițională timpurie și adecvată și pentru a stabili doza optimă, calendarul și compoziția suportul nutrițional.

Pot substantele nutritive să acționeze ca modulatori metabolici în casexia de cancer?

Pe lângă asigurarea cerințelor privind energia și proteinele, intervenția nutrițională ar putea reprezenta, de asemenea, o strategie potențială de a contracara inflamația și de a interfera cu mecanismele moleculare implicate în patogeneza cașexiei cauzate de cancer prin utilizarea unor nutrienți / nutraceutici specifici. 34

Multe studii au examinat efectele acizilor grași derivați din uleiul de pește [acid eicosapentaenoic (EPA) sau acid docosahexaenoic DHA] în prevenirea și tratamentul casexiei cauzate de cancer, dat fiind capacitatea lor potențială de a modula citokinele pro-inflamatorii și de a crește sensibilitatea la insulină. 35 După cum a fost recent analizat, deși nu toate studiile efectuate în trecut au raportat un beneficiu al suplimentării cu ulei de pește pentru cașexia de cancer, rezultate promițătoare au fost obținute în studiile recente. 36 , 37 Întrucât s-a sugerat că posibilele motive pentru astfel de inconsecvențe între studiile ar putea fi variabilitatea în proiectarea studiului, conformitatea cu suplimentul, contaminarea dintre brațele studiului și diferitele metodologii utilizate pentru evaluarea compoziției organismului, sunt necesare 36 de studii bine proiectate în viitor pentru a clarifica potențialul terapeutic al acizilor grași OMEGA-3 pentru pierderea musculară legată de cancer.

Aminoacizii cu catenă ramificată (BCAA) s-au dovedit a atenua pierderea musculară în casexia cancerului experimental, posibil prin stimularea sintezei proteinelor și a degradării proteinelor atenuante. În afara rolului propus în ameliorarea anorexiei cancerului39 câteva studii clinice par să susțină ipoteza că BCAA pot ameliora metabolismul proteinelor musculare, dar sunt necesare studii mai mari, randomizate, orb, controlate cu placebo, pentru a confirma efectele benefice ale BCAA la pacienții cu cancer și indică doza optimă. 26 , 28 , 40

Beta-hidroxi-beta-metilbutiratul (BHM/HMB) este un metabolit al leucinei BCAA care, conform studiilor experimentale anterioare, poate atenua pierderea musculară în timpul cașexiei de cancer prin inhibarea degradării proteinelor și / sau stimularea sintezei proteinelor. 41 HMB se dovedeste mai potent decat EPA(HMB nu numai că este capabil să atenueze degradarea proteinelor în mușchiul scheletic al șoarecilor cachectic, ci și stimulează sinteza proteinelor, rezultând o creștere a masei carcasei fără grăsimi) si decat LEUCINA(HMB este cu 60% mai potent decat LEUCINA la aceeasi doza)

Rolul terapeutic al HMB în casexia cancerului la om este, totuși, incert și merită investigații suplimentare, după cum sa observat într-o revizuire sistematică recentă pe această temă. 44

L-carnitina este un derivat de aminoacizi implicat în metabolizarea acizilor grași și în procesele de producere a energiei. 45 , 46 Suplimentarea cu carnitină sa dovedit a fi benefică în casexia cancerului experimental, 47 , 48 , precum și în studiile clinice efectuate pe pacienți cu cancer, unde a fost testată singură 49 sau în asociere cu alte medicamente  ;studiul II; Sunt necesare 50  investigații suplimentare pentru a clarifica potențialul său terapeutic pentru pierderea musculară legată de cancer.

Rolul exercițiului fizic

În plus față de intervențiile nutriționale, exercițiile fizice au fost propuse ca o altă componentă crucială a abordării multimodale a casexiei de cancer. Într-adevăr, activitatea fizică poate modula inflamația și metabolismul musculaturii scheletice51 cu diferențe substanțiale față de modalitatea de exercițiu. În special, în timp ce antrenamentul de anduranță stimulează adaptările metabolice oxidative (cu efect redus asupra masei musculare), formarea de rezistență exercită o acțiune anabolică care duce la hipertrofie musculară. Mai mult, exercițiul fizic îmbunătățește sensibilitatea la insulină, 53 reglează homeostazia celulară prin stimularea metabolismului proteinelor și organelilor 54 și promovează miogeneza. În acest sens, este deosebit de importantă capacitatea exercițiilor fizice de a induce autofagia și mitofagia, sporind eliminarea mitocondriilor deteriorate / îmbătrânite, îmbunătățind astfel echilibrul energiei musculare. 56

Studiile experimentale au arătat că antrenamentul de exerciții fizice atenuează inițierea și progresia cașexiei cancerului la șoareci 57 și că atât efortul de anduranta cât și rezistența pot modula răspunsul inflamator la șobolanii care poartă tumori. 58 , 59 În plus, a fost recent raportat faptul că alergarea voluntară pe roți poate preveni cașexia și crește supraviețuirea la șoarecii purtători de tumori60 și, de asemenea, atenuează pierderea musculară indusă de cisplatină la șoarecii supuși chimioterapiei. 61

Exercitiul fizic este fezabil la pacientii cu cancer?

În timpul cancerului, programele de exerciții fizice sunt frecvent dificil de aplicat și trebuie luate în considerare cu atenție factorii care limitează capacitatea de efort (cum ar fi oboseala cronică, anemia, disfuncția cardiacă și alte comorbidități). De fapt, într-un studiu experimental recent, 2 săptămâni de exerciții de anduranță cu intensitate scăzută nu au îmbunătățit și chiar s-au înrăutățit, pierderea musculară la șoareci purtând carcinomul C26 (un model experimental de cașexie de cancer asociată cu anemie și disfuncție cardiacă). În schimb, tratamentul cu eritropoietină (EPO), în combinație cu exercițiul normal, a salvat hematocritul, a salvat atrofia myofibrelor oxidative, a împiedicat deplasarea oxidativă spre glicolitică a fibrelor musculare și a indus expresia receptorului activat de proliferator de peroxisom (PPAR) -c coactivator-1α (PGC- ), un factor implicat în biogeneza și funcția mitocondrială. Aceste rezultate sugerează că exercițiul fizic ar putea fi un instrument eficient pentru a fi inclus în abordarea multimodală a casexiei cauzate de cancer, cu condiția ca programele de exerciții să fie adaptate nevoilor individuale și că comorbiditățile precum anemia sunt detectate prompt și tratate corespunzător.

Exercițiul fizic și nutriția: o interacțiune strategică?

Disponibilitatea nutrienților și a energiei joacă un rol important în modularea adaptărilor acute și cronice la formarea de anduranta și de rezistență, 64 sugerând că trebuie acordat un suport nutrițional adecvat pacienților pentru a păstra beneficiile potențiale ale exercițiilor fizice. 62 , vice versa descărcarea bluntă creșterea aminoacizilor în sinteza proteinei myofibrilare, susținând în continuare conceptul că hrana și exercițiile fizice pot avea efecte adiționale potențiale, deși acest aspect merită investigații suplimentare în casexia cancerului. Este important să se investigheze ce substanțe nutritive / nutraceuticale ar putea stimula efectul exercițiului în mâncarea musculară legată de cancer. În acest sens, EPA, în combinație cu exercițiul fizic de anduranță, sa dovedit a îmbunătăți masa musculară și rezistența la șoareci purtători ai carcinomului pulmonar Lewis (LLC). 66 Din păcate, datele la om cu cancer nu sunt disponibile.

Este exercițiul fizic eficient?

Dovezile disponibile sugerează că exercițiile fizice pot avea efecte benefice asupra pacienților cu cancer în timpul și după tratamentul activ, cum ar fi îmbunătățirea calității vieții și reducerea oboselii. 67 – 70 Conform unei revizuiri sistematice recente, exercițiul fizic de aerobic și de rezistență, sau o combinație, pot contribui la îmbunătățirea rezistenței musculare la pacienții cu cancer mai mult decât îngrijirea obișnuită, în timp ce masa musculară pare să fie mai favorabil afectată de exercițiul de rezistență,des dovezi sustinere în acest sens sunt încă insuficiente. Mai mult, multe dintre studiile incluse în această revizuire sistematică au fost efectuate la pacienții cu cancer în stadiu incipient (majoritatea cu cancer de sân și de prostată și doar câțiva cu alte tumori solide), iar concluziile nu pot fi extinse la pacienții cu boli avansate. 71 De notat, o recenta recenzie a Cochrane a aratat ca dovezile din studiile controlate randomizate care dovedesc siguranta si eficacitatea exercitiilor la pacientii cu casexie de cancer sunt inca lipsite. Într-adevăr, datele disponibile nu permit să se stabilească dacă pacienții cu cancer inclusi în studiile care testează efectul exercițiilor fizice au fost afectați de pre-cașexie sau de cașexie. Studiile clinice în curs de desfășurare, totuși, explorează beneficiile potențiale ale exercițiilor pentru cașexia cancerului în cadrul unei abordări multimodale. 72

În concluzie, luând în considerare eterogenitatea cașexiei cauzate de cancer și posibila prezență a comorbidităților care limitează capacitatea de efort, ar fi necesară o investigație suplimentară pentru a testa efectele programelor de exerciții personalizate, eventual proiectate în conformitate cu principiile de formare, 73 pentru a optimiza siguranța și eficiența prescripțiilor de exerciții în cadrul abordării multimodale a casexiei cauzate de cancer.

Rolul tratamentelor farmacologice

Dezvoltarea terapiilor farmacologice pentru efectele pierderii musculare a cașexiei de cancer au fost axate pe îmbunătățirea apetitului, modularea inflamației și interferența cu căile anabolice și catabolice implicate în modularea mușchilor scheletici. În plus, noi ținte terapeutice adecvate apar în mod continuu la nivel experimental. Nici un singur agent nu a fost încă dovedit a fi complet eficace, subliniind necesitatea integrării terapiilor farmacologice într-o abordare multimodală capabilă să facă față patogenezei complexe a cașexiei de cancer. 74

Stimulante pentru apetit

S-au testat mai mulți potențiali stimulatori ai apetitului pentru a contracara anorexia cancerului. O revizuire recentă a studiului Cochrane a analizat datele despre acetat de MEGESTROL și a concluzionat că îmbunătățește apetitul și greutatea corporală la pacienții cu cancer, deși este asociat cu evenimente adverse. În plus, creșterea în greutate se datorează în principal unei creșteri a conținutului de grăsimi și a apei, mai degrabă decât în ​​masa corporală slabă (LBM), deși datele din cazexia de cancer experimentală sugerează un posibil efect asupra mușchilor scheletici. 76

Canabinoidele au fost, de asemenea, evaluate. În acest sens, un studiu de fază III asupra pacienților cu cancer avansat nu a arătat nici o diferență semnificativă în apetitul cu privire la placebo, în timp ce un studiu pilot a sugerat câteva efecte benefice potențiale care ar trebui testate în studii mai mari. 78

Agenți care vizează inflamația

Deoarece inflamația este un motor major al pierderii musculare cauzate de cancer, mulți agenți antiinflamatori au fost evaluați în ultimii ani.

Medicamentele antiinflamatoare nesteroidiene (AINS) au fost testate singure sau în combinație și o revizuire sistematică recentă a concluzionat că acestea pot îmbunătăți greutatea corporală sau LBM, deși dovezile care recomandă AINS în afara studiilor clinice sunt încă insuficiente și merită investigații suplimentare.  ieste nteresant faptul că AINS sunt în prezent studiate în cadrul unei abordări multimodale pentru cașexia de cancer care include exerciții fizice și nutriție. Rezultatele preliminare (prezentate ca rezumat) ale unui studiu de fază II, multi-centru, randomizat (pre-MENAC [identificare clinică :NCT01419145 ] sugerează că o intervenție de tip casexie multimodală (inclusiv exerciții fizice, AINS, suplimente nutriționale dense, combinate cu sfaturi privind dieta) poate îmbunătăți greutatea pacienților cu cancer pulmonar sau pancreatic incurabil față de standardele de îngrijire . Pe baza acestor rezultate, un studiu de fază III numit MENAC [identificator clinicTrials.gov: NCT02330926 ] se înscrie în prezent la pacienți. 80

Corticosteroizii sunt medicamente antiinflamatoare puternice frecvent utilizate la pacienții cu cancer;rezultatele obținute în două studii randomizate controlate cu placebo sugerează că, pe termen scurt, ele pot îmbunătăți oboseala și apetitul. Terapia extinsă cu corticosteroizi, cu toate acestea, nu este recomandată, deoarece acestea pot provoca efecte secundare, inclusiv pierderea musculară. 83 , 84

Thalidomida, un agent cu proprietăți imunomodulatoare și antiinflamatoare, a fost de asemenea testată în ultimii ani, în ciuda efectelor secundare grave, dar dovezile sunt încă insuficiente pentru a recomanda acest agent pentru administrarea clinică a cașexiei de cancer. 85 – 87

S-a încercat o abordare mai selectivă antiinflamatorie utilizând anticorpi monoclonali care vizează citokine, dar au fost raportate rezultate incoerente din diferite studii. Aceste discrepanțe s-ar putea datora, cel puțin parțial, varietății și eterogenității citokinelor implicate în diferite tipuri de cancer și pacienți. În ciuda acestor limitări, țintirea citokinelor poate avea unele efecte terapeutice potențiale asupra cașexiei cauzate de cancer, așa cum a sugerat studiile recente folosind noi agenți biologici 89 cum ar fi MABp1 (un anticorp monoclonal adevărat-uman prima dată în clasă care vizează IL-1α). În consecință, este necesară o investigație clinică suplimentară pentru a clarifica rolul blocadei anti-citokinice în pierderea musculară a cancerului în cadrul unei abordări multimodale. 74

Agenți care vizează căile catabolice musculare

O atenție deosebită în ultimii ani a fost acordată dezvoltării agenților care vizează miostatina și receptorul receptorului activin tip II receptorul B (ActRIIB), un regulator negativ al masei musculare, care este activat la legarea miostatinei cât și a altor factori de creștere transformatori -β (TGF-β), incluzând Activin A și factorul de diferențiere a creșterii 11 (GDF-11).Modularea semnalizării miostatinei a fost descrisă atât la animalele purtătoare de cancer, cât și la pacienți.Blocarea acestei căi prin administrarea receptorilor de momeală ActRIIB în casexia de cancer experimental a demonstrat că contracarează pierderea musculară, îmbunătățește rezistența musculară și prelungește supraviețuirea fără a influența creșterea tumorală. 93 , 94 Din păcate, problemele de sângerare asociate cu utilizarea receptorilor de momeală în studiile clinice inițiale efectuate la pacienții cu distrofie musculară au determinat încheierea acestor studii. Cu toate acestea, anticorpi anti-ActRIIB mai selectivi precum Bimagrumab (BYM338) sunt în curs de dezvoltare și sunt testați la pacienți cu cancer pulmonar sau pancreatic [identificator clinic : NCT01433263 ]. Mai mult, un studiu de fază II testează mAb-ul LY2495655 specific pentru miostatină la pacienții cu cancer pancreatic [identificare clinică :NCT01505530 ]. 88

Inhibarea căilor proteolitice (cum ar fi sistemul de proteazom ubiquitin) a fost, de asemenea, investigată ca o posibilă strategie terapeutică. Cu toate acestea, administrarea de bortezomib, un proteazom potent reversibil și selectiv și inhibitor al NF-kB, nu a demonstrat până acum un efect benefic asupra pierderii musculare cauzate de cancer. 95 Prin contrast, MG132, un alt inhibitor al proteazomilor, a îmbunătățit pierderea în greutate a corpului și a mușchilor la șoarecii purtători de tumori, posibil datorită unui mecanism diferit de acțiune al acestui medicament comparativ cu bortezomib. Cu toate acestea, ar trebui recunoscut faptul că în musculare umane, evidența proteolizei mediate de ubiquitină în timpul cașexiei de cancer nu este la fel de robustă ca cea observată pe modele animale – acest lucru este valabil în special pentru NSCLC. 99 Mai mult, sa observat în cancerul gastrointestinal că reglarea bine documentată a markerilor activității sistemului proteazom ubiquitin 100 , 101 poate să apară doar pentru o fereastră mică în timpul progresiei cașexiei. Acest lucru ar putea fi, în parte, responsabil de motivul pentru care inhibitorii proteazomilor au eșuat în mare parte în studiile clinice. Luate impreuna, dovezile disponibile sugereaza ca sunt necesare studii suplimentare inainte ca sistemul de proteazom ubiquitin sa poata fi identificat cu siguranta ca o posibila tinta terapeutica pentru pierderea musculara in cancer.

Agenții beta- β2 au fost de asemenea evaluați ca o potențială terapie anti-catabolică pentru cașexia cancerului, deși posibilele efecte cardiovasculare și-au limitat aplicarea. Cercetătorii s-au concentrat în special asupra formoterolului, un agonist p2 cu un grad ridicat de selectivitate pentru receptorii β2 ai mușchilor scheletici și o toxicitate relativ scăzută. În cazul cașexiei cancerului experimental, s-a demonstrat că Formoterolul ameliorează pierderea musculară, 103 – 105 fără modificarea negativă a funcției cardiace.Fumaratul de Formoterol a fost testat, de asemenea, în asociere cu acetat de Megestrol într-un studiu pilot necontrolat cu un singur braț, pe o cohorta mică de pacienți cu cancer casectic avansat. Deși s-au raportat câteva rezultate încurajatoare pentru cei care au terminat cursul de 8 săptămâni, sunt necesare studii suplimentare în studii clinice randomizate, mai mari și mai mari, pentru a evalua mai bine acest tratament în casexia de cancer. 107

Agenți care vizează căile anabolice ale mușchilor

Eforturi extensive în ultimii ani au fost îndreptate spre studiul ANAMORELIN un agonist selectiv pe cale orală a receptorului GHRELIN GHSR-1a (receptor de segretagogue al hormonului de creștere) cu efecte orexigenice și anabolice. 108 , 109 

Ghrelin induce eliberarea hormonului de creștere (GH), stimulează pofta de mâncare, reglează energia homeostaziei și reduce inflamația. 110 , 111 Pe baza rezultatelor promițătoare obținute în mai multe studii de fază II, 112Anamorelin a fost recent testat în două studii mari dublu-orb, de fază III (ROMANA 1, n = 484; ROMANA 2, n = 495). În aceste studii, pacienții cu NSCLC stadiul III / IV incurabil și cachexia au fost randomizați 2: 1 pentru a primi anamorelin 100 mg sau placebo timp de 12 săptămâni. În ambele studii, anamorelin a îmbunătățit semnificativ masa corporala slaba LBM, greutatea corporală și simptomele asociate cu anorexia-cachexia, dar nu a reușit să îmbunătățească în mod semnificativ rezistența mâinii, un obiectiv final co-primar al studiului. 115 În acest sens, lipsa efectului anamorelinului asupra forței musculare în fața mase corporale slabe LBM îmbunătățită ar putea reflecta relația nu neapărat liniară dintre masa și forța musculară scheletică, aceasta din urmă depinzând de calitatea miofiberului. De asemenea, în aceste studii nu sa înregistrat aportul de alimente și nu se cunoaște dacă ameliorarea anorexiei se traduce într-un aport nutrițional adecvat, care este probabil să fie important pentru a susține (și poate amplifica) acțiunea anabolică a anamorelinului. 118

Pacientii care au incheiat studiile ROMANA 1 sau ROMANA 2 au avut optiunea de a-si continua tratamentul alocat pentru alte 12 saptamani pentru a evalua in continuare eficacitatea si siguranta anamorelinului [ROMANA 3 ClinicalTrials.gov identifier: NCT01395914 ]). În acest studiu de extensie, tratamentul cu anamorelin în decurs de 24 de săptămâni a fost bine tolerat și incidența evenimentelor adverse a fost similară atât la pacienții tratați cu anamorelin, cât și la cei tratați cu placebo. 119

Pe lângă ANAMORELIN, alți agoniști ghrelinici noi (cum ar fi MACIMORELIN) sunt în curs de investigare. 120

Alți agenți anabolizanți pentru prevenirea și tratamentul pierderii musculare legate de cancer sunt modulatorii selectivi ai receptorilor androgenici (SARM), o nouă clasă de medicamente anabolice nesteroidiene, specifice țesutului, care pot mări masa musculară și pot ameliora funcția fizică fără efectele secundare asociate frecvent cu testosteronul sau alte steroizi anabolizanți sintetici neselectivi. 121 În special, Enobosarm, un SARM biodisponibil oral, a fost recent testat într-un studiu dublu-orb, randomizat, controlat, de fază II, asupra pacienților cu cancer care au avut cel puțin 2% pierdere în greutate în ultimele 6 luni. Rezultatele obținute au arătat o creștere semnificativă, comparativ cu valoarea inițială, în LBM total și în puterea medie la scări în rândul pacienților care au primit enobosarm 1 mg și 3 mg, în timp ce nu s-au observat modificări semnificative pentru rezistența la mâner. 121 

Doza de Enobosarm de 3 mg a fost evaluată în continuare în două studii clinice controlate cu placebo, dublu-orb, de fază III, denumite POWER 1 și POWER 2 [identificatori NCT01355484 , NCT01355497 ], în care NSCLC etapa III sau IV au fost randomizați pentru a primi timp de 5 luni o doză zilnică orală de enobosarm 3 mg sau placebo la inițierea chimioterapiei de primă linie (platină + taxan în POWER 1; platină + non-taxan în POWER 2).Rezultatele preliminare au arătat că tratamentul cu enobosarm a fost asociat cu o creștere a LBM și a puterii de urcare pe scări (obiective co-primare) în studiul POWER 1, în timp ce în studiul POWER 2 sa înregistrat o creștere semnificativă a LBM. 123

Multe medicamente, totuși, pot afecta atât anabolismul cât și catabolismul. Espindolol (MT-102), de exemplu, poate scădea catabolismul (prin blocarea beta neselectivă), reduce oboseala și termogeneza (prin antagonismul central 5-HT1a) și crește anabolismul (prin intermediul agonismului receptorului beta 2 ). Studiul de fază II ACT-ONE în stadiul III / IV NSCLC sau pacienții cu cancer colorectal a arătat că espindololul 10 mg de două ori pe zi a îmbunătățit greutatea corporală, LBM și rezistența mâinii. 124

Noi scenarii în tratamentul farmacologic

Perspectivele în baza moleculară a cașexiei de cancer sugerează că contracararea kinazelor intracelulare, cum ar fi proteina kinaza activată de mitogen (MEK), proteina kinază semnal extracelulară (ERK) și traductorii Janus kinază / traductori și activatori ai căii de transcripție (JAK / STAT) , 125 – 127 ar putea reprezenta o abordare promițătoare. În cazul cașexiei cancerului experimental, s-a demonstrat că administrarea PD98059, un inhibitor MEK capabil să blocheze activarea ERK, restabilește miogeneza și atenuează depleția și slăbiciunea musculară. 125 În mod consecvent, Selumetinibul, un inhibitor MEK cu activitate supresivă a tumorii și efecte inhibitoare asupra producției de IL-6, într-un studiu de fază II, a determinat o creștere a mușchiului scheletic la pacienții cu cholangiocarcinom. 127inhibare farmacologica sau genetice a cailor / STAT3 JAK a fost raportata pentru a reduce irosirea musculare in cașexie cancerului experimental. 126

Ruxolitinib este un inhibitor oral, puternic și selectiv JAK1 / 2; utilizarea într-un studiu clinic la pacienții cu mielofibroză a fost asociată cu o creștere a greutății corporale. 128 În prezent, un studiu deschis de faza II studiu [ ClinicalTrials.gov identificatorul: NCT02072057 ] investighează siguranța și eficacitatea ruxolitinib pentru tratamentul cașexiei la pacienții cu boli irosirea tumorale asociate cronice. 26 , 120

Sunitinib, un inhibitor al tirozin kinazei utilizat pentru tratamentul carcinomului cu celule renale, s-a dovedit a preveni cancerul experimental – cașexia prin inhibarea STAT3 activare si RING musculare Finger 1 de proteine (MuRF1) regulare in sus în mușchiul scheletic. 129

Sunt disponibile mai multe rezultate controversate pentru Sorafenibul, un inhibitor al multi-kinazei, care sa dovedit eficient în atenuarea cașexiei cancerului experimental prin inhibarea activității STAT3 și ERK în mușchiul scheletic, 129 , 130 dar arătând că duce la pierderea musculară la pacienții cu celule carcinom renal avansat . 131

Direcționarea modificărilor în metabolismul grăsimilor și al energiei care stau la baza cancerului cașexia atrage, de asemenea, atenția ca o strategie terapeutică potențială. Recent, inhibarea farmacologică a oxidării acidului gras cu Etoxomir (un inhibitor specific al carnitinei palmitoiltransferaza-1) a demonstrat că salvează pierderea musculară în cazexia de cancer experimentală. 132 Inhibarea  brunarii țesutului adipos alb, un proces implicat în creșterea consumului de energie și termogeneza, a fost demonstrat pentru a ameliora cașexia cancerului experimental. 133În mod consecvent, tratamentul cu un anticorp care neutralizează proteina legată de hormonul paratiroidian (PTHrP), un factor derivat din tumoare care promovează exprimarea genelor termogene, a împiedicat pierderea țesutului adipos și rumenirea, precum și pierderea și disfuncția musculară la șoarecii care poartă LLC. 134 Rezultate similare au fost recent obținute prin implantarea LLC la șoarecii cu knock – out-grăsime specifică PTHR (receptorului pentru hormonul paratiroidian și PTHrP). 135

Pe lângă abordările menționate mai sus, obiectivul de disfuncție mitocondrială este o altă posibilitate terapeutică potențială de a normaliza metabolismul energetic în condiții catabolice, dar datele disponibile sunt încă limitate. 136

EXERCITIUL FIZIC este un regulator important al dinamicii mitocondriale si a metabolismului muschilor scheletici, dar programele de instruire nu sunt intotdeauna usor de implementat, de aceea oamenii de stiinta lucreaza la dezvoltarea mimeticii exercitiului fizic137 În această privință, administrarea mimeticului de exercitiu fizic 5-aminoimidazol-4-carboxamidă-1-beta-D-ribofuranoside (AICAR), un adenozin activat-monofosfat protein kinazei (AMPK) activator, s-a dovedit a contracara cașexie și restaurare fluxul autofagic în mușchii scheletici ai șoarecilor care poartă C-26, în mod similar cu Rapamicina (un inhibitor mTOR capabil să declanșeze autofagia) și alergarea voluntară pe roți. 60

Alți agenți noi care vizează mecanisme moleculare diferite sunt, de asemenea, în curs de investigare în casexia de cancer experimental și s-au raportat recent rezultate foarte promițătoare pentru administrarea inhibitorului histone deacetillazei (HDAC) AR-42 138 și anticorpii care vizează factorul de creștere fibroblast-inductibil 14 (Fn-14), membru al familiei TNF139 Ambele tratamente au împiedicat într-adevăr cachexia cancerului și supraviețuirea prelungită la șoarecii purtători de tumori. Trebuie notat totuși că nu toți inhibitorii HDAC au aceeași capacitate de a trata cașexia cancerului, 138 , 140 sugerând că efectele benefice AR-42 sunt, probabil, mediate de efecte specifice intrinseci acestui medicament, care în prezent sunt doar parțial înțelese.

În cele din urmă, modularea microbiotă intestinală(CU PROBIOTICE LACTICE -LACTOBACILLUS)  a fost recent propusă ca potențială oportunitate terapeutică de a contracara risipa musculară legată de cancer, dar datele disponibile sunt încă puține și sunt mai multe cunoștințe despre mecanismele care leagă homeostazia musculară scheletică la microbiota intestinală pentru a stabili dacă aceasta ar putea reprezenta o țintă terapeutică adecvată. 141

În ansamblu, studiile experimentale par să indice o gamă largă de oportunități terapeutice promițătoare pentru pierderea musculară legată de cancer, dar sunt necesare investigații suplimentare pentru a înțelege mai bine potențialul terapeutic al tuturor acestor noi abordări farmacologice.

Concluzii și perspective

În prezent, nu este disponibilă o terapie eficientă împotriva casexiei cauzate de cancer. Din acest motiv, este obligatoriu să se implementeze strategii care vizează prevenirea sau cel puțin întârzierea acestei condiții. În acest sens, cunoașterea tot mai mare a mecanismelor moleculare care stau la baza pierderii musculare cauzate de cancer a permis identificarea mai multor obiective terapeutice potențiale și dezvoltarea multor medicamente promitatoare, dintre care unele au atins faza studiului clinic.

În același timp, totuși, devine clar că o abordare multimodală este obligatorie pentru gestionarea cu succes a pacienților cu cașexie de cancer.

Un alt punct crucial este recunoașterea și tratamentul precoce a alterărilor nutriționale și metabolice care apar în timpul cancerului. Mai multe dovezi, într-adevăr, sugerează că pacienții cu cancer au un potențial anabolic exploatabil. Din acest motiv,ar trebui să se asigure un suport nutrițional adecvat pentru a încetini procesul de risipă. Pe această linie, formarea de exerciții fizice , compatibilă cu capacitatea de efort a pacienților cu cancer, ar putea reprezenta un alt instrument important pentru a stimula efectele anabolice ale suportului nutrițional și pentru a preveni consecințele negative ale inactivității fizice asupra masei și funcției musculare.

Studiile clinice suplimentare sunt, prin urmare, necesare în următorii câțiva ani pentru a optimiza intervențiile multimodale pentru a contracara casexia cauzată de cancer și pentru a oferi cele mai bune îngrijiri pacienților.

Note de subsol

Finanțare: Această cercetare nu a primit niciun grant specific de la nici o agenție de finanțare în sectorul public, comercial sau non-profit.

Declarația privind conflictul de interese: Autorii declară că nu există conflict de interese.

Informații despre colaboratori

Zaira Aversa, Departamentul de Medicină Clinică, Universitatea Sapienza din Roma, Italia.

Paola Costelli, Departamentul de Științe Clinice și Biologice, Universitatea din Torino, Italia.

Maurizio Muscaritoli, Departamentul de Medicină Clinică, Sapienza, Universitatea din Roma, Viale dell’Università 37, 00185 Roma, Italia.

Referințe

1. Muscaritoli M, Molfino A, Gioia G și colab. „Calea paralelă”: o nouă abordare nutrițională și metabolică a pacienților cu cancer . Intern Emerg Med 2011; 6 : 105-112. PubMed ]
2. Fearon K, Strasser F, Anker SD, et al. Definirea și clasificarea cașexiei cancerului: un consens internațional . Lancet Oncol 2011; 12 : 489-495. PubMed ]
3. Fearon KC, Glass DJ, Guttridge DC. Canceria cailor: mediatori, semnalizare și căi metabolice . Cell Metab 2012; 16 : 153-166. PubMed ]
4. Martin L, Birdsell L., Macdonald N, și colab. Canicexia de cancer în epoca obezității: depleția mușchilor scheletici este un factor de prognostic puternic, independent de indicele de masă corporală . J Clin Oncol2013; 31 : 1539-1547. PubMed ]
5. Prado CM, Lieffers JR, McCargar LJ și colab. Prevalența și implicațiile clinice ale obezității saropenice la pacienții cu tumori solide ale tractului respirator și gastro-intestinal: un studiu pe bază de populație . Lancet Oncol 2008; 9 : 629-635. PubMed ]
6. Prado CM, Baracos VE, McCargar LJ, și colab. Sarcopenia ca determinant al toxicității chimioterapice și a timpului până la progresia tumorii la pacienții cu cancer de sân metastazat care au primit tratament cu capecitabină . Clin Cancer Res 2009; 15 : 2920-2926. PubMed ]
7. Tan BH, Birdsell LA, Martin L. și colab. Sarcopenia la un pacient supraponderal sau obez este un factor prognostic advers în cancerul pancreatic . Clin Cancer Res 2009; 15 : 6973-6979. PubMed ]
8. Salarii JR, Bathe OF, Fassbender K, și colab. Sarcopenia se asociază cu o infecție postoperatorie și cu o întârziere de recuperare după intervenția chirurgicală de rezecție a cancerului colorectal . Br. J Cancer2012; 107 : 931-936. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
9. Muscaritoli M, Bossola M, Aversa Z, și colab. Prevenirea și tratamentul cazhexiei cauzate de cancer: noi perspective asupra unei probleme vechi . Eur J Cancer 2006; 42 : 31-41. PubMed ]
10. Fearon K, Arends J, Baracos V. Înțelegerea mecanismelor și opțiunilor de tratament în cazexia de cancer . Nat Rev Clin Oncol 2013; 10 : 90-99. PubMed ]
11. Johns N, Stephens NA, Fearon KC. Musculare pierde în cancer . Int J Biochem Cell Biol 2013; 45 : 2215-2229. PubMed ]
12. Argilés JM, Busquets S, Stemmler B, și colab. Cachexia de cancer: înțelegerea bazei moleculare . Nat Rev Cancer 2014; 14 : 754-762. PubMed ]
13. Ryan AM, Power DG, Daly L și colab. Cancerul asociat malnutriției, cașexiei și sarcopeniei: scheletul din dulapul spitalului după 40 de ani . Proc Nutr Soc 2016; 75 : 199-211. PubMed ]
14. Villasenor A, Ballard-Barbash R, Baumgartner K, și colab. Prevalența și efectul prognostic al sarcopeniei la supraviețuitorii cancerului de sân: Studiul HEAL . J Cancer Surviv 2012; 6 : 398-406.Articol gratuit PMC ] PubMed ]
15. Otsuji H, Yokoyama Y, Ebata T, și colab. Saropenia preoperatorie afectează negativ rezultatele postoperatorii după hepatectomia majoră cu rezecția extrahepatică a ductului biliar . World J Surg 2015; 39: 1494-1500. PubMed ]
16. Harimoto N, Shirabe K, Yamashita YI și colab. Sarcopenia ca predictor al prognosticului la pacienții care urmează hepatectomie pentru carcinom hepatocelular . Br J Surg 2013; 100 : 1523-1530. PubMed ]
17. Gilliam LA, St Clair DK. Chimioterapia indusă de slăbiciune și oboseală în mușchiul scheletic: rolul stresului oxidativ . Antiox Redox Signal 2011; 15 : 2543-2563. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
18. Vermaete N, Wolter P, Verhoef G, și colab. Activitatea fizică și aptitudinea fizică la pacienții cu limfom înainte, în timpul și după chimioterapie: un studiu prospectiv longitudinal . Ann Hematol 2014; 93 : 411-424. PubMed ]
19. Biolo G, Cederholm T, Muscaritoli M. Disfuncția contractilă și disfuncția metabolică a mușchilor este o caracteristică comună a sarcopeniei îmbătrânirii și a bolilor cronice: de la obezitatea saropenică la cachexiaClin Nutr 2014; 33 : 737-748. PubMed ]
20. Mueller TC, Bachmann J, Prokopchuk O, și colab. Căile moleculare care duc la pierderea masei musculare scheletice în cazexia de cancer – pot fi traduse la om la pacienții cu rezultate din modele animale? BMC Cancer 2016; 16 : 75. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
21. Penna F, Busquets S, Argilés JM. Cachexia cancerului experimental: strategii care evoluează pentru apropierea de scenariul uman . Semin Cell Dev Biol 2016; 54 : 20-27. PubMed ]
22. Fearon K, Argiles JM, Baracos VE și colab. Cerere de îndrumare de reglementare pentru studiile de intervenție în cazexia de cancer . J Cachexia Sarcopenie Muscle 2015; 6 : 272-274. Articol gratuit PMC ]PubMed ]
23. Prado CM, Sawyer MB, Ghosh S, și colab. Principiul central al terapiei cu cancer de cachexie: pacienții cu cancer avansat au un potențial anabolic exploatabil? Am J Clin Nutr 2013; 98 : 1012-1019. PubMed ]
24. Martin L, Sawyer MB. Cancerul cardiac: evidențierea probelor preclinice și calea către studiile clinice . J Natl Cancer Inst 2015; 107 : djv322. PubMed ]
25. Muscaritoli M, Molfino A, Lucia S, și colab. Cachexia: o comorbiditate de cancer care poate fi prevenită. O abordare TARGET . Crit Rev Oncol Hematol 2015; 94 : 251-259. PubMed ]
26. Madeddu C, Mantovani G, Gramignano G, și colab. Avansuri în strategiile farmacologice pentru cașexia cancerului . Expert Opin Pharmacother 2015; 16 : 2163-2177. PubMed ]
27. Martin L, Senesse P, Gioulbasanis I și colab. Criterii de diagnosticare pentru clasificarea pierderii în greutate asociată cancerului . J Clin Oncol 2015; 33 : 90-99. PubMed ]
28. Chevalier S, Winter A. Pacienții cu cancer avansat au vreun potențial pentru anabolismul proteinic ca răspuns la terapia cu aminoacizi? Curr Opin Clin Nutr Metab Care 2014; 17 : 213-218. PubMed ]
29. Engelen MP, van der Meij BS, Deutz NE. Rezistența anabolică a proteinelor la cancer: într-adevăr există? Curr Opin Clin Nutr Metab Care 2016; 19 : 39-47. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
30. Iarna A, MacAdams J, Chevalier S. Răspuns normal al proteinelor anabolice la hiperaminoacidemia la pacienții cu insulină rezistentă, cu cașexie de cancer pulmonar . Clin Nutr 2012; 31 : 765-773. PubMed ]
31. Deutz NE, Safar A, Schutzler S, și colab. Sinteza proteinei sanguine la pacienții cu cancer poate fi stimulată cu un aliment medical special formulat . Clin Nutr 2011; 30 : 759-768. Articol gratuit PMC ]PubMed ]
32. Engelen MP, Safar AM, Bartter T și colab. Potențialul anabolic ridicat al amestecurilor esențiale de aminoacizi în cancerul pulmonar cu celule mici avansate . Ann Oncol 2015; 26 : 1960-1966.Articol gratuit PMC ] PubMed ]
33. van Dijk DP, van de, Poll MC, Moses AG și colab. Efectele hrănirii pe cale orală a proteinelor asupra defalcării proteinei întregului corp și a sintezei proteinelor la pacienții cu cancer pancreatic cachectic . J Cachexia Sarcopenie Muscle 2015; 6 : 212-221. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
34. Laviano A, Seelaender M, Sanchez-Lara K, și colab. Dincolo de anorexie-cașexie. Nutriția și modularea metabolismului pacienților cu cancer: terapie complementară, complementară sau alternativă anti-neoplazică? Eur J Pharmacol 2011; 668 ( Suppl 1 ): S87-S90. PubMed ]
35. Dewey A, Baughan C, Dean T, și colab. Acidul eicosapentaenoic (EPA, un acid gras omega-3 din uleiurile de pește) pentru tratamentul cazexiei de cancer . Cochrane Database Syst Rev 2007; CD004597.PubMed ]
36. Pappalardo G, Almeida A, Ravasco P. Acidul eicosapentaenoic în cancer îmbunătățește compoziția corporală și modulează metabolismul . Nutriție 2015; 31 : 549-555. PubMed ]
37. Sánchez-Lara K, Turcott JG, Juárez-Hernández E, și colab. Efectele unui supliment nutrițional oral conținând acid eicosapentaenoic asupra rezultatelor nutriționale și clinice la pacienții cu cancer pulmonar cu celule mici avansate: studiu randomizat . Clin Nutr 2014; 33 : 1017-1023. PubMed ]
38. Eley HL, Russell ST, Tisdale MJ. Efectul aminoacizilor cu catenă ramificată asupra atrofiei musculare în cazexia de cancer . Biochem J 2007; 407 : 113-120. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
39. Laviano A, Muscaritoli M, Cascino A, și colab. Aminoacizi cu catenă ramificată: cel mai bun compromis pentru a realiza anabolismul? Curr Opin Clin Nutr Metab Care 2005; 8 : 408-414. PubMed ]
40. Bozzetti F, Bozzetti V. Suplimentarea intravenoasă a aminoacizilor la pacienții cu cancer este adecvată? O apreciere critică a literaturii . Clin Nutr 2013; 32 : 142-146. PubMed ]
41. Smith HJ, Mukerji P, Tisdale MJ. Atenuarea proteolizelor induse de proteazom în mușchii scheletici de către {beta} -hidroxi- {beta} -metilbutiratul în pierderea musculară indusă de cancer . Cancer Res 2005; 65: 277-283. PubMed ]
42. Aversa Z, Bonetto A, Costelli P, și colab. β-hidroxi-β-metilbutirat (HMB) atenuează pierderea masei musculare și a greutății corporale în cazexia cancerului experimental . Int J Oncol 2011; 38 : 713-720.PubMed ]
43. Mirza KA, Pereira SL, Voss AC, și colab. Compararea efectelor anticatabolice ale leucinei și Ca-β-hidroxi-β-metilbutiratului în modele experimentale de cașexie de cancer . Nutriție 2014; 30 : 807-813.PubMed ]
44. Molfino A, Gioia G, Rossi Fanelli F, et al. Suplimentarea beta-hidroxi-beta-metilbutiratului în sănătate și boală: o revizuire sistematică a studiilor randomizate . Aminoacizi 2013; 45 : 1273-1292. PubMed ]
45. Stephens FB, Constantin-Teodosiu D, Greenhaff PL. Perspective noi privind rolul carnitinei în reglarea metabolismului combustibilului în mușchii scheletici . J Physiol 2007; 581 : 431-444.Articol gratuit PMC ] PubMed ]
46. Silvério R, Laviano A, Rossi Fanelli F, și colab. L-carnitina induce recuperarea metabolismului lipidelor hepatice în cazexia cancerului . Aminoacizi 2012; 42 : 1783-1792. PubMed ]
47. Laviano A, Molfino A, Seelaender M, și colab. Administrarea carnitinei reduce nivelul de citokine, îmbunătățește aportul alimentar și ameliorează compoziția corporală la șobolanii care poartă tumori . Cancer Invest 2011; 29 : 696-700. PubMed ]
48. Busquets S, Serpe R, Toledo M, și colab. L-carnitina: un supliment adecvat pentru o terapie multi-target-anti-irosire in cancer . Clin Nutr 2012; 31 : 889-895. PubMed ]
49. Kraft M, Kraft K, Gärtner S, și colab. Suplimentarea L-carnitinei în cancerul pancreatic avansat (CARPAN) – un studiu multicentric randomizat . Nutr J 2012; 11 : 52. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
50. Madeddu C, Dessì M, Panzone F, și colab. Randomizat, studiu clinic de fază III, al unui tratament combinat cu carnitină + celecoxib ± megestrol acetat pentru pacienții cu sindrom anorexie / cachexie asociat cancerului . Clin Nutr 2012; 31 : 176-182. PubMed ]
51. Gould DW, Lahart I, Carmichael AR și colab. Prevenirea cașexiei de cancer prin exerciții fizice: mecanisme moleculare . J Cachexia Sarcopenia Muscle 2013; 4 : 111-124. Articol gratuit PMC ]PubMed ]
52. Camera DM, Smiles WJ, Hawley JA. Cale de semnalizare a mușchilor scheletici induse de efort și performanțele atletice umane . Radic gratuit Biol Med 2016; 98 : 131-143. PubMed ]
53. Mann S, Beedie C, Balducci S, și colab. Modificări ale sensibilității la insulină ca răspuns la diferite modalități de exercitare: o revizuire a probelor . Diabetul Metab Res Rev 2014; 30 : 257-268. PubMed ]
54. Vainshtein A, Grumati P, Sandri M, și colab. Mușchi scheletici, autofagie și activitate fizică: ménage à trois de reglementare metabolică în sănătate și boală . J Mol Med 2014; 92 : 127-137. PubMed ]
55. Snijders T, Nederveen JP, McKay BR și colab. Celulele satelit în plasticitatea mușchilor scheletici umane . Front Physiol 2015; 6 : 283. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
56. Vainshtein A, Hood DA. Reglarea autofagiei în timpul efortului fizic în mușchii scheletici . J Appl Physiol (1985) 2016; 120 : 664-673. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
57. Puppa MJ, White JP, Velázquez KT, și colab. Efectul exercitării asupra cașexiei induse de IL-6 la șoarecele Apc (Min / +) . J Cachexia Sarcopenie Muscle 2012; 3 : 117-137. Articol gratuit PMC ]PubMed ]
58. Donatto FF, Neves RX, Rosa FO și colab. Testarea rezistenței modulează profilul plasmatic al lipidelor și conținutul de citokine în țesutul adipos al șobolanilor care poartă tumori . Cytokine 2013; 61 : 426-432.PubMed ]
59. Lira FS, Antunes Bde M, Seelaender M, și colab. Potențialul terapeutic al exercițiilor pentru tratarea cașexiei . Curr Opin Suport Palliat Care 2015; 9 : 317-324. PubMed ]
60. Pigna E, Berardi E, Aulino P, și colab. Exercitarea aerobă și tratamentele farmacologice contracarează cașexia prin modularea autofagiei în cancerul de colon . Sci Rep 2016; 31; 6 : 26991. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
61. Hojman P, Fjelbye J, Zerahn B, și colab. Activitatea voluntară previne pierderea musculară indusă de cisplatină în timpul chimioterapiei la șoareci . PLoS One 2014; 9 : e109030. Articol gratuit PMC ]PubMed ]
62. Argilés JM, Busquets S, López-Soriano FJ, și colab. Există vreo avantaje în formarea exercițiilor fizice în cazexia de cancer? J Cachexia Sarcopenie Muscle 2012; 3 : 73-76. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
63. Pin F, Busquets S, Toledo M, și colab. Combinația de exerciții fizice și eritropoietină previne alterările musculare induse de cancer . Oncotarget 2015; 6 : 43202-43215. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
64. Smiles WJ, Hawley JA, Camera DM. Efectele disponibilității energiei musculare scheletice asupra răspunsurilor la metabolismul proteic la exercițiu . J Exp Biol 2016; 219 : 214-225. PubMed ]
65. Glover EI, Phillips SM. Exercițiu de rezistență și nutriție adecvată pentru a contracara pierderea musculară și pentru a promova hipertrofia musculară . Curr Opin Clin Nutr Metab Care 2010; 13 : 630-634. PubMed ]
66. Penna F, Busquets S, Pin F, și colab. Abordare combinată pentru contracararea cazexiei cancerului experimental: acidul eicosapentaenoic și exercițiul de antrenament . J Cachexia Sarcopenie Muscle 2011; 2: 95-104. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
67. Speck RM, Courneya KS, Mâse LC și colab. O actualizare a studiilor de control fizic asupra supravietuitorilor de cancer: o revizuire sistematica si meta-analiza . J Cancer Surviv 2010; 4 : 87-100.PubMed ]
68. Mishra SI, Scherer RW, Geigle PM și colab. Exercitiile de interventie pe calitatea vietii legate de sanatate pentru supravietuitorii de cancer . Cochrane Database Syst Rev 2012; 8 : CD007566. PubMed ]
69. Mishra SI, Scherer RW, Snyder C, și colab. Exercitarea intervențiilor privind calitatea vieții legate de sănătate pentru persoanele cu cancer în timpul tratamentului activ . Cochrane Database Syst Rev 2012; 8 : CD008465. PubMed ]
70. Puetz TW, MP Herring. Efectele diferențiate ale exercițiilor asupra oboselii legate de cancer în timpul și după tratament: o meta-analiză . Am J Prev Med 2012; 43 : e1-e24. PubMed ]
71. Stene GB, Helbostad JL, Balstad TR, și colab. Efectul exercițiului fizic asupra masei musculare și a rezistenței la pacienții cu cancer în timpul tratamentului – o revizuire sistematică . Crit Rev Oncol Hematol2013; 88 : 573-593. PubMed ]
72. Grande AJ, Silva V, Riera R și colab. Exercitarea cașexiei la adulți . Cochrane Database Syst Rev 2014; 11 : CD010804. PubMed ]
73. Sasso JP, Eves ND, Christensen JF și colab. Un cadru pentru baza de prescriptie medicala in exercitiu-oncologie de cercetare . J Cachexia Sarcopenie Muscle 2015; 6 : 115-124. Articol gratuit PMC ]PubMed ]
74. Molfino A, Formiconi A, Rossi Fanelli F, și colab. Canceria cailor: spre intervenții terapeutice integrateExpert Opin Biol Ther 2014; 14 : 1379-1381. PubMed ]
75. Ruiz Garcia V, López-Briz E, Carbonell Sanchis R și colab. Acetat de megestrol pentru tratamentul sindromului anorexie-cașexie . Cochrane Database Syst Rev 2013; 3 : CD004310. PubMed ]
76. Argilés JM, Anguera A, Stemmler B. O nouă perspectivă asupra unui medicament vechi pentru tratamentul cazexiei de cancer: acetat de megestrol . Clin Nutr 2013; 32 : 319-324. PubMed ]
77. Strasser F, Luftner D, Possinger K, și colab. Compararea extractului de canabis administrate oral și a delta-9-tetrahidrocanabinolului la tratarea pacienților cu sindrom de anorexie-cazhexie asociată cancerului: un studiu clinic randomizat, dublu-orb, randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo, din studiul Cannabis-In-Cachexia -Grup . J Clin Oncol 2006; 24 : 3394-3400. PubMed ]
78. Brisbois TD, de Kock IH, Watanabe SM, și colab. Delta-9-tetrahidrocanabinolul poate ameliora percepția chemosenzorială modificată la pacienții cu cancer: rezultatele unui studiu pilot randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo . Ann Oncol 2011; 22 : 2086-2093. PubMed ]
79. Solheim TS, Fearon KC, Blum D, și colab. Tratamentul antiinflamator nesteroidian în cazexia de cancer: o revizuire sistematică a literaturii . Acta Oncol 2013; 52 : 6-17. PubMed ]
80. Kaasa S, Solheim T, Laird BJA și colab. Un studiu randomizat, deschis, al unei intervenții multimodale (exercițiu, nutriție și medicamente antiinflamatorii), plus o îngrijire standard față de îngrijirea standard în monoterapie pentru prevenirea / atenuarea cașexiei la pacienții cu cancer avansat supuși chimioterapiei . J Clin Oncol 2015; 33 ( Suppl. ): Abstract 9628.
81. Yennurajalingam S, Frisbee-Hume S, Palmer JL, și colab. Reducerea oboselii legate de cancer cu dexametazonă: un studiu dublu-orb, randomizat, controlat cu placebo, la pacienții cu cancer avansat . J Clin Oncol 2013; 31 : 3076-3082. PubMed ]
82. Paulsen O, Klepstad P, Rosland JH, et al. Eficacitatea metilprednisolonei privind durerea, oboseala și pierderea apetitului la pacienții cu cancer avansat care utilizează opiacee: un studiu randomizat, controlat cu placebo, dublu-orb . J Clin Oncol 2014; 32 : 3221-3228. PubMed ]
83. Fardet L, Flahault A, Kettaneh A, și colab. Evenimente adverse clinice induse de corticosteroizi: frecvența, factorii de risc și opinia pacientului . Br J Dermatol 2007; 157 : 142-148. PubMed ]
84. Hasselgren PO, Alamdari N, Aversa Z, și colab. Corticosteroizii și pierderea musculară: rolul factorilor de transcripție, cofactorii nucleari și hiperacetilarea . Curr Opin Clin Nutr Metab Care 2010; 13 : 423-428.Articol gratuit PMC ] PubMed ]
85. Reid J, Mills M, Cantwell M, și colab. Thalidomidă pentru administrarea cașexiei de cancer . Cochrane Database Syst Rev 2012; 4 : CD008664. PubMed ]
86. Davis M, Lasheen W, Walsh D, și colab. Un studiu de fază II de titrare a dozei de talidomidă pentru anorexie asociată cancerului . J Pain Symptom Manage 2012; 43 : 78-86. Articol gratuit PMC ]PubMed ]
87. Yennurajalingam S, Willey JS, Palmer JL, și colab. Rolul talidomidei și placebo pentru tratamentul simptomelor de anorexie-cașexie legate de cancer: rezultate ale unui studiu randomizat dublu-orb controlat cu placebo . J Palliat Med 2012; 15 : 1059-1064. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
88. Cohen S, Nathan JA, Goldberg AL. Pierderea mușchilor în boală: mecanisme moleculare și terapii promițătoare . Nat Rev Drug Discov 2015; 14 : 58-74. PubMed ]
89. Ma JD, Heavey SF, Revta C, și colab. Cercetări biologice noi pentru tratamentul cazexiei cauzate de cancer . Expert Opin Biol Ther 2014; 14 : 1113-1120. PubMed ]
90. Hong DS, Hui D, Bruera E și colab. MABp1, un anticorp uman adevărat, de primă clasă, care vizează interleukina-1α în cazurile de cancer refractar: ​​un studiu deschis, de fază 1 de escaladare a dozei și expansiune . Lancet Oncol 2014; 15 : 656-666. PubMed ]
91. Costelli P, Muscaritoli M, Bonetto A, și colab. Semnalarea musatocinei musculare este îmbunătățită în cazexia cancerului experimental . Eur J Clin Invest 2008; 38 : 531-538. PubMed ]
92. Aversa Z, Bonetto A, Penna F, și colab. Modificări ale semnalizării miostatinei la pacienții cu cancer fără pierdere în greutate . Ann Surg Oncol 2012; 19 : 1350-1356. PubMed ]
93. Zhou X, Wang JL, Lu J și colab. Inversarea canhexiei și a pierderii musculare de către antagoniștii ActRIIB duce la supraviețuirea prelungită . Cell 2010; 142 : 531-543. PubMed ]
94. Benny Klimek, ME, Aydogdu T, Link MJ, și colab. Inhibarea acută a proteinelor familiei myostatin păstrează mușchii scheletici în modelele de șoareci de cancer de cașexie . Biochem Biophys Res Commun2010; 391 : 1548-1554. PubMed ]
95. Jatoi A, Alberts SR, Foster N, și colab. Este bortezomibul, un inhibitor proteazom, eficient în tratarea cancerului asociat cu pierderea în greutate? Rezultatele preliminare ale Grupului de tratament central pentru cancerul de Nord . Suport Care Cancer 2005; 13 : 381-386. PubMed ]
96. Chacon-Cabrera A, Fermoselle C, Urtreger AJ, și colab. Strategii farmacologice în cazexia indusă de cancer pulmonar: efecte asupra proteolizei musculare, autofagiei, structurii și slăbiciunii . J Cell Physiol2014; 229 : 1660-1672. PubMed ]
97. Penna F, Bonetto A, Aversa Z, și colab. Efectul inhibitorului proteazom specific bortezomib asupra pierderii musculare legate de cancer . J Cachexia Sarcopenie Muscle 2016; 7 : 345-354.Articol gratuit PMC ] PubMed ]
98. Zhang L, Tang H, Kou Y și colab. Inhibarea mediată de MG132 a căii ubiquitin-proteazom ameliorează cașexia cancerului . J Cancer Res Clin Oncol 2013; 139 : 1105-1115. PubMed ]
99. Op den Kamp CM, Langen RC, Minnaard R și colab. Pre-cașexia la pacienții cu stadiul I-III non-cancer pulmonar cu celule mici: inflamație sistemică și insuficiență funcțională fără activarea sistemului proteazomului ubiquitin al mușchilor scheletici . Cancer pulmonar 2012; 76 : 112-117. PubMed ]
100. Bossola M, Muscaritoli M, Costelli P, și colab. Creșterea nivelelor de mRNA ubiquitin musculare la pacienții cu cancer gastric . Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 2001; 280 : R1518-R1523.PubMed ]
101. Bossola M, Muscaritoli M, Costelli P, și colab. Creșterea activității proteazomului muscular se corelează cu severitatea bolii la pacienții cu cancer gastric . Ann Surg 2003; 237 : 384-389.Articol gratuit PMC ] PubMed ]
102. Khal J, Hine AV, Fearon KC, și colab. Creșterea expresiei subunităților de proteazom în mușchii scheletici ai pacienților cu cancer cu pierdere în greutate . Int J Biochem Cell Biol 2005; 37 : 2196-2206.PubMed ]
103. Busquets S, Figueras MT, Fuster G, și colab. Efectele anticachetice ale formoterolului: un medicament pentru tratamentul potențial al pierderii musculare . Cancer Res 2004; 64 : 6725-6731. PubMed ]
104. Busquets S, Toledo M, Sirisi S, și colab. Formoterolul și pierderea mușchilor de cancer la șobolani: efectele asupra forței musculare și a activității fizice totale . Exp Ther Med 2011; 2 : 731-735.Articol gratuit PMC ] PubMed ]
105. Toledo M, Busquets S, Penna F, și colab. Inversarea completă a pierderii musculare în cazexia cancerului experimental: efectele aditive ale inhibiției receptorului activ II și ale agonistului β-2 . Int J Cancer 2016; 138 : 2021-2029. PubMed ]
106. Toledo M, Springer J, Busquets S, și colab. Formoterol în tratamentul cașexiei cancerului experimental: efecte asupra funcției cardiace . Cachexia Sarcopenia Muscle 2014; 5 : 315-320.Articol gratuit PMC ] PubMed ]
107. Greig CA, Johns N, Gray C, și colab. Studiu de fază I / II privind fumaratul de formoterol combinat cu acetat de megestrol la pacienții cu boală cachectică cu malignitate avansată . Suport Care Cancer 2014; 22 : 1269-1275. PubMed ]
108. Esposito A, Criscitiello C, Gelao L, și colab. Mecanismele de sindrom anorexie-cașexie și raționale pentru tratamentul cu agonist selectiv al receptorilor de ghrelină . Cancer Treat Rev 2015; 41 : 793-797.PubMed ]
109. Zhang H, Garcia JM. Anamorelin clorhidrat pentru tratamentul cancerului-anorexie-cașexie în NSCLC . Expert Opin Pharmacother 2015; 16 : 1245-1253. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
110. Molfino A, Formiconi A, Rossi Fanelli F, și colab. Ghrelin: de la descoperire până la tratamentul cu cașexie împotriva cancerului . Curr Opin Clin Nutr Metab Care 2014; 17 : 471-476. PubMed ]
111. Reano S, Graziani A, Filigheddu N. Administrarea ghrelinului acilat și neacilat la risipirea musculară . Curr Opin Clin Nutr Metab Care 2014; 17 : 236-240. PubMed ]
112. Garcia JM, Friend J, Allen S. Potențialul terapeutic al anamorelinului, un roman, mimetic ghrelin oral, la pacienții cu cașexie legată de cancer: un studiu pilot multicentric, randomizat, dublu-orb, crossover . Asistență pentru îngrijirea cancerului 2013; 21 : 129-137. PubMed ]
113. Garcia JM, Boccia RV, Graham CD, și colab. Anamorelin pentru pacienții cu cachexie de cancer: o analiză integrată a două studii clinice randomizate, controlate cu placebo, dublu-orb, de fază 2 . Lancet Oncol 2015; 16 : 108-116. PubMed ]
114. Temel J, Bondarde S, Jain M, și colab. Eficacitatea și siguranța rezultă dintr-un studiu de fază II a anamorelin HCI, un agonist al receptorilor de ghrelin, la pacienții cu NSCLC (Abstract 5e01) . J Cachexia Sarcopenia Muscle 2013; 4 : 295-343.
115. Temel JS, Abernethy AP, Currow DC, și colab. Anamorelin la pacienții cu cancer pulmonar cu celule mici și cașexie (ROMANA 1 și ROMANA 2): rezultate din două studii randomizate, dublu-orb, de fază 3 . Lancet Oncol 2016; 17 : 519-531. PubMed ]
116. Mitchell WK, Williams J, Atherton P, și colab. Sarcopenie, dynapenie și impactul îmbătrânirii vârstei asupra mărimii și forței musculare scheletice umane; o analiză cantitativă . Front Physiol 2012; 3 : 260. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
117. Chen L, Nelson DR, Zhao Y și colab. Relația dintre masa musculară și forța musculară și impactul comorbidităților: un studiu transversal bazat pe populație a adulților în vârstă din Statele Unite . BMC Geriatr 2013; 13 : 74. Articol gratuit de la PMC ] PubMed ]
118. Muscaritoli M. Direcționarea cașexiei cu cancer: suntem pe drum . Lancet Oncol 2016; 17 : 414-415.PubMed ]
119. Currow D, Temel J, Fearon K, și colab. Un studiu privind extinderea siguranței anamorelinului la pacienții cu cancer pulmonar fără celule mici cu cachexie avansată: ROMANA 3 . J Clin Oncol 2015; 33 ( Suppl. ): Abstract e20715.
120. Dingemans AM, de Vos-Geelen J, Langen R, și colab. Medicamente de fază II care sunt în curs de dezvoltare pentru tratamentul cașexiei . Expert Opin Investig Drugs 2014; 23 : 1655-1669. PubMed ]
121. Dobs AS, Boccia RV, Croot CC, și colab. Efectele enobosarmului asupra pierderii musculare și a funcției fizice la pacienții cu cancer: un studiu dublu-orb, randomizat, controlat de fază 2 . Lancet Oncol2013; 14 : 335-345. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
122. Crawford J, Prado CM, Johnston MA, și colab. Studiu de proiectare și raționament pentru programul de dezvoltare clinică de fază 3 a enobosarmului, un modulator selectiv al receptorilor androgenici, pentru prevenirea și tratamentul pierderii musculare la pacienții cu cancer (studiile POWER) . Curr Oncol Rep2016; 18 : 37. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
123. Crawford J, Johnston MA, Taylor RP, și colab. Enobosarm și masa corporală slabă la pacienții cu cancer pulmonar fără celule mici . J Clin Oncol 2014; 32 ( Suppl. 5 ): abstract 9618.
124. Stewart Coats AJ, Ho GF, Prabhash K, și colab. Espindolol pentru tratamentul și prevenirea cașexiei la pacienții cu cancer pulmonar nemetal cu stadiul III / IV sau cancer colorectal: un studiu clinic randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo, internațional, multicentric, de fază II (studiul ACT-ONE) . J Cachexia Sarcopenie Muscle 2016; 7 : 355-365. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
125. Penna F, Costamagna D, Fanzani A, și colab. Pierderea musculară și miogeneza afectată la șoarecii purtători de tumori sunt prevenite prin inhibarea ERK . PLoS One 2010; 5 : e13604.Articol gratuit PMC ] PubMed ]
126. Bonetto A, Aydogdu T, Jin X și colab. Inhibarea căii JAK / STAT3 blochează pierderea mușchilor scheletici în aval de IL-6 și în cazexia de cancer experimentală . Am J Physiol Endocrinol Metab 2012; 303: E410-E421. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
127. Prado CM, Bekaii-Saab T, Doyle LA, și colab. Anabolismul mușchilor scheletici este un efect secundar al terapiei cu inhibitorul MEK: selumetinib la pacienții cu cholangiocarcinom . Br. J Cancer 2012; 106 : 1583-1586. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
128. Harrison C, Kiladjian JJ, Al-Ali HK și colab. Inhibarea JAK cu ruxolitinib față de cea mai bună terapie disponibilă pentru mielofibroza . N Engl J Med 2012; 366 : 787-798. PubMed ]
129. Pretto F, Ghilardi C, Moschetta M, și colab. Sunitinib previne cașexia și prelungește supraviețuirea șoarecilor care suferă de cancer renal prin restrângerea activării STAT3 și MuRF-1 în mușchi . Oncotarget2015; 6 : 3043-3054. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
130. Toledo M, Penna F, Busquets S, și colab. Comportamentul distinct al sorafenibului în tumorile care provoacă cazexia experimentală: rolul STAT3 . PLoS One 2014; 9 : e113931. Articol gratuit PMC ]PubMed ]
131. Antoun S, Birdsell L., Sawyer MB, et al. Asocierea pierderii musculare scheletice cu tratamentul cu sorafenib la pacienții cu carcinom renal avansat: rezultă dintr-un studiu controlat cu placebo . J Clin Oncol2010; 28 : 1054-1060. PubMed ]
132. Fukawa T, Yan-Jiang BC, Min-Wen JC și colab. Oxidarea excesivă a acizilor grași induce atrofie musculară în cazexia de cancer . Nat Med 2016; 22 : 666-671. PubMed ]
133. Petruzzelli M, Schweiger M, Schreiber R, și colab. Trecerea de la grăsime albă la brună crește consumul de energie în cazexia asociată cancerului . Cell Metab 2014; 20 : 433-447. PubMed ]
134. Kir S, White JP, Kleiner S, și colab. Proteina legată de proteina PTH derivată din țesuturi provoacă rumenirea țesutului adipos și carachexia cancerului . Natura . 2014; 513 : 100-104. Articol gratuit PMC ]PubMed ]
135. Kir S, Komaba H, Garcia AP și colab. Receptorul PTH / PTHrP mediază cașexia în modelele de insuficiență renală și cancer . Cell Metab 2016; 23 : 315-323. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
136. Atașarea D, Pichard C, Baracos VE. Pierderea muschilor: este disfuncția mitocondrială o țintă cheie? Curr Opin Clin Nutr Metab Care 2015; 18 : 213-214. PubMed ]
137. Penna F, Pin F, Ballarò R, și colab. Progrese noi de medicamente experimentale care imita exerciții pentru tratamentul cașexiei . Expert Opin Investig Drugs 2016; 25 : 63-72. PubMed ]
138. Tseng YC, Kulp SK, Lai IL, și colab. Analiza preclinică a noului inhibitor al deacetilazei histonei AR-42 în tratamentul cașexiei induse de cancer . J Natl Cancer Inst 2015; 107 : djv274. PubMed ]
139. Johnston AJ, Murphy KT, Jenkinson L. și colab. Direcționarea Fn14 previne cașexia indusă de cancer și prelungește supraviețuirea . Celula 2015; 162 : 1365-1378. PubMed ]
140. Bonetto A, Penna F, Minero VG și colab. Inhibitorii deacetilazei modulează axa myostatin / follistatin fără a îmbunătăți cașexia la șoarecii purtători de tumori . Curr Cancer Drug Targets 2009; 9 : 608-616.PubMed ]
141. Varian BJ, Goureshetti S, Poutahidis T, și colab. Bacteriile benefice inhibă cașexia . Oncotarget 2016; 7 : 11803-11816. Articol gratuit PMC ] PubMed ]

Articolele de la Avansurile terapeutice în oncologia medicală sunt oferite aici prin amabilitatea publicațiilor SAGE

O formulă nouă pe bază de plante, SGE, induce moartea celulelor canceroase mediate de stres reticulului endoplasmatic și ameliorează simptomele de Cașexie induse de adenocarcinomul colonului-26

Abstract

Casexia la pacienții cu cancer, caracterizată printr-o pierdere gravă involuntară în greutate și o afectare a funcției fizice, este asociată cu un prognostic nesatisfăcător ca răspuns la tratamentul canceros alopat/ convențional și cu o creștere a mortalității legate de cancer. Prevenirea pierderii mușchilor scheletici în casexia indusă de cancer prin inhibarea factorilor pro-casectici, precum și o reducere a masei tumorale a fost considerată o intervenție farmacologică și nutrițională rezonabilă pentru tratarea pacienților cu cancer. În acest studiu, am construit o formulă de plante noua, SGE, care conține Ginseng Radix alba, Atractylodis Rhizoma alba și Hoelen , și-a examinat eficacitatea anti-cancer și anti-casexia.

plantele medicinale traditionale chinezesti TCM / CHM si koreene si formulele derivate cu si din acestea le cautati dupa nume pe

http://www.activeherb.com/

http://www.activeherb.com/chineseherbs

În experimente in vitro , SGE a indus moartea celulelor carcinomului de colon murin CT-26 prin stresul reticulului endoplasmatic și a suprimat producția de citokine inflamatorii în celulele macrofage murine 264.7. În plus, tratamentul cu SGE a atenuat atrofia celulelor musculare scheletale C2C12 indusă de CT-26, precum și reducerea acumulării lipidelor în adipocit 3T3-L1 indusă de CT-26.

La șoarecii cu tumori CT-26, administrarea pe cale orală zilnică de 10 și 50 mg / kg SGE a atenuat remarcabil simptomele legate de cașexie, inclusiv greutatea corporală și pierderea mușchiului, comparativ cu tratamentul cu soluție salină, în timp ce aportul alimentar nu a fost afectat. Aceste date colectiv sugerează că SGE este benefic ca adjuvant anti-cancer pentru a trata pacienții cu cancer cu scădere gravă în greutate.

 

 

INTRODUCERE

Cancerul colorectal (CRC) este al treilea cel mai frecvent diagnosticat cancer și a doua cauză principală a deceselor legate de cancer la adulți din SUA [ 1 , 2 ]. In 2017, Societatea Americana de Cancer a estimat 95.520 de cazuri noi de cancer de colon si 39.910 de cazuri noi de cancer rectal diagnosticate in SUA [ 3 ].Pe măsură ce tumorile cresc, pacienții cu CRC prezintă diferite simptome, cum ar fi sângerarea rectală, disconfortul persistent abdominal, modificări ale obiceiurilor intestinale, inclusiv constipație sau diaree, slăbiciune sau oboseală și scăderea apetitului [ 4 ]. În mod special, mai mult de 50% din pacienții cu CRC suferă o pierdere neintenționată în greutate, cu pierdere musculară severă, iar această afecțiune, distinctă de pierderea mușchilor și a mușchilor legați de vârstă, nu poate fi prevenită sau recuperată prin suport nutrițional convențional [ 5 , 6 ]. La pacienții cu cancer, sindromul de risipă, inclusiv anorexia, modificările metabolice și endocrine, oboseala și pierderea masei corporale slabe, este cunoscută sub denumirea de cașexie de cancer, iar această afecțiune diminuează eficacitatea chimioterapiei și radioterapiei convenționale, reduce calitatea vieții și agravează prognosticul pacienților cu cancer. De fapt, cel puțin 20% dintre pacienții cu cancer mor din cauza simptomelor cachectice, cum ar fi pierderea în greutate [ 7 – 9]. Prin urmare, pentru a depăși cancerul de colon, este necesară suprimarea directă a celulelor canceroase și controlul simptomelor casectice induse de cancer, în special pentru conservarea masei corporale slabe.

În ultimii ani, mecanismele patofiziologice care stau la baza pierderii mușchilor scheletici și a țesutului adipos în timpul cașexiei de cancer au fost investigate intens și au fost identificate procese-cheie și ținte terapeutice, inclusiv mediatori pro-inflamatori (de exemplu, IL-6, TNF-a, IL 6, IL-1 și IFN-y) și mediatori de proteoliză (de exemplu, myostatin, factor de inducere a proteolizei, angiotensin II și sistemul proteazom ubiquitin) secretați din celulele tumorale și celulele gazdă ca răspuns la tumori [ , 10 , 11 ]. Au fost efectuate mai multe studii medicamentoase pentru a controla cașexia cancerului, utilizând medicamente sintetice care stimulează pofta de mâncare, suprimă răspunsul inflamator, reduc proteoliza și sporesc sinteza proteinelor [ 12-14 ]; cu toate acestea, utilizarea acestora este limitată datorită efectelor lor neașteptate și a eficacității scăzute in vivo . În plus, anticorpii sau peptidele sintetice care vizează mediatorii casectici au fost eficienți în inversarea condițiilor de cașexie15 , 16 ]; totuși, acești agenți au un cost ridicat și lipsa datelor clinice pentru eficacitatea și siguranța acestora. Recent, medicamentele pe bază de plante s-au dovedit a fi benefice pentru gestionarea simptomelor de cașexie induse de cancer, incluzând anorexia, scăderea în greutate, oboseala și pierderea musculară, la șoarecii purtători de tumori, datorită acțiunilor lor farmacologice multimodale și toxicității scăzute17-19 ] .

În acest studiu, am formulat un cocktail de plante noua, SGE, compus din Ginseng Radix alba, Atractylodis Rhizoma alba și Hoelen .

Ginseng Radix alba , rădăcină de ginseng neprocesată numită ginseng alb, a fost folosită de mii de ani ca tonic pentru a ridica starea de spirit și pentru a reduce oboseala și a fost raportată că are antidiabetic, antihipertensiv, anti-hiperglicemic, antidepresiv și efectele hemopoietice [ 20-22 ].

Atractylodis Rhizoma alba este o plantă medicinală frecvent utilizată cu activități antiinflamatorii, anti-osteoporotice, anti-canceroase și antimelanogene [ 23-25 ].

Hoelen este o ciupercă subterană care crește pe rădăcinile pinilor și a fost folosită de mult timp ca diuretic, sedativ și remediu pentru bolile gastrice în medicina tradițională orientală [ 26 ].

În ciuda numeroaselor proprietăți farmacologice, eficacitatea acestor componente împotriva cașexiei induse de cancer, fie singură, fie în combinație ca un cocktail pe bază de plante, nu a fost demonstrată.

În studiul de față, am analizat dacă SGE suprimă creșterea tumorală și ameliorează simptomele de cașexie la șoareci purtând carcinoame de colon CT-26. Mai mult, am elucidat în detaliu mecanismele anti-cancer și anti-casectice utilizând celule carcinom de colon CT-26 murine, celule asemănătoare macrofagelor 264.7, myoblaste C2C12 și adipocite 3T3-L1.

REZULTATE

SGE inhibă proliferarea și induce moartea celulelor apoptotice în celulele carcinomului de colon murin CT-26

Pentru a examina dacă SGE poate afecta proliferarea și viabilitatea celulelor CT-26, am măsurat celulele viabile prin analiza CCK-8 după tratarea celulelor cu concentrații crescătoare de SGE timp de 24 de ore.După cum se arată în Figura 1A 1A și 1B ,1B , SGE a inhibat proliferarea celulară și a indus o citotoxicitate severă într-o manieră dependentă de doză la concentrații de 100 pg / ml sau mai mare și morfologia celulelor a fost aproape complet prăbușită la o concentrație de 1000 pg / ml (F = 339,4, p <0,0001, ANOVA cu sens unic). În cadrul testului de imagine celulară LIVE / DEAD, tratamentul cu SGE a indus o scădere semnificativă a celulelor vii fluorescente verde și o creștere concomitentă a celulelor moarte fluorescente roșii (Figura 1C ). Western blot a arătat că SGE a stabilit în mod semnificativ nivelurile de proteine ​​anti-apoptotice, incluzând Bcl-2 și XIAP, și a reglat în sus nivelurile proteinelor pro-apoptotice, inclusiv Bax, Bad și PARP scindate, în doză și timp – maniere dependente (Figura 1D și 1E ). Deoarece SGE este un amestec de plante format din trei ierburi Ginseng Radix alba , Atractylodis Rhizoma alba și Hoelen , am examinat în continuare efectele extractelor de etanol din fiecare planta asupra viabilității celulare. După cum se arată în figura 1 , tratamentul cu extracte de etanol din fiecare plantă și co-tratamentul cu cele trei plante până la 500 μg / ml nu au determinat citotoxicitatea, indicând faptul că aceste plante exercită o activitate antiproliferativă mai mare atunci când sunt utilizate împreună într-un cocktail din plante .

Un fișier extern care deține o imagine, ilustrație, etc. Numele obiectului este oncotarget-09-16284-g001.jpg

SGE scade viabilitatea și induce moartea apoptotică în celulele carcinomului de colon murin CT-26

(A) Celulele CT-26 însămânțate în plăci de cultură cu 96 de godeuri au fost incubate cu SGE (10-1000 pg / ml) timp de 48 de ore și apoi a fost măsurată viabilitatea celulară utilizând kitul CCK-8. Datele sunt reprezentative pentru trei experimente independente efectuate în triplicat și sunt exprimate ca mijloace ± SD. ** p <0,01 față de controlul netratat. (B) Modificările morfologice ale celulelor CT-26 tratate cu SGE au fost observate sub un microscop inversat la o mărire de x 200. (C) CT-26 celuloză pe plăci de cultură cu 12 godeuri au fost incubate cu SGE (0,500, 1000 pg / ml) timp de 36 ore. După etichetarea celulelor utilizând setul de imagistică celulară LIVE / DEAD, celulele vii (verde) și moarte (roșu) au fost observate sub un microscop fluorescent. (DE)Nivelurile proteinelor legate de moartea celulară au fost analizate prin Western blot în celulele tratate cu concentrațiile indicate de SGE timp de 24 ore (D) sau în celulele tratate cu SGE de 500 μg / ml timp de 24 și 36 ore (E). Intensitățile banda relativă au fost calculate utilizând software-ul ImageJ după normalizarea la exprimarea tubulinei.

SGE induce fosforilarea MAPK și AMPK, precum și stresul ER, în celulele carcinomului de colon murin CT-26

S-a raportat că stresul ER prelungit poate declanșa moartea celulelor datorită unui răspuns defectuos al proteinei [ 27 ], iar activarea MAPK a fost implicată în moartea celulară indusă de stresul ER [ 28 ]. În plus, AMPK care cuprinde o subunitate catalitică a a și două subunități de reglare (β și γ) este activată sub stres metabolic, determinând în final moartea celulei [ 29 ]. Așa cum se arată în Figura 2A ,2A , Western blot a arătat că tratamentul cu SGE a crescut rapid nivelele de p38 și ERK fosforilate la 30 min după tratament și a scăzut treptat aceste niveluri după 1 h. Între timp, SGE a indus, de asemenea, fosforilarea JNK și AMPK, până la 24 ore. În plus, proteinele legate de stres ER, incluzând Bip, CHOP, Ero1-Lα, IRE1α și PERK, au fost remarcabil crescute prin SGE, dar PDI nu a fost afectat (Figura 2B ). Pentru a investiga rolul activării MAPK și AMPK în moartea celulară mediată de SGE, celulele CT-26 au fost pre-tratate cu inhibitori farmacologici ai p38 (SB203580), ERK (PD98059), JNK (SP600125) și AMPK Tratamentul cu SGE. După cum se arată în Figura 2C și Figura 2 , tratamentul prealabil cu compusul C protejează eficient celulele CT-26 de moartea celulară mediată de SGE la aproximativ 80% la 500 pg / ml SGE, în timp ce PD98059 și SP600125 au indus o protecție slabă și SB203580 efect mic. Aceste date indică faptul că activarea AMPK urmată de stresul ER este crucială pentru moartea celulară mediată de SGE în celulele CT-26.

Un fișier extern care deține o imagine, o ilustrație, etc. Numele obiectului este oncotarget-09-16284-g002.jpg

SGE creste fosforilarea MAPK si AMPK si induce stresul ER

(A) Celulele CT-26 au fost tratate cu 500 ug / ml SGE timp de 0,5, 1, 3 și 6 ore, iar nivelurile p38, ERK, JNK și AMPK totale și fosforilate au fost examinate prin Western blot. (B) Nivelurile de proteine ​​legate de stres ER au fost măsurate prin Western blot în celule CT-26 după tratarea cu SGE de 500 pg / ml timp de 3, 6, 12 și 18 ore. Datele sunt reprezentative pentru trei experimente independente, iar intensitățile relative ale benzii au fost calculate utilizând software-ul ImageJ după normalizarea la expresia tubulinei. (C) Celulele pretreate cu sau fără compusul C (5 pM) timp de 1 oră au fost tratate cu 250 și 500 pg / ml SGE. După incubare timp de 24 de ore, viabilitatea celulară a fost evaluată prin analiza CCK, iar morfologia celulară a fost observată sub un microscop inversat. ** p <0,01 față de controlul netratat.

SGE suprimă producția indusă de LPS a citokinelor inflamatorii și NO, exprimarea iNOS și activarea MAPK și NF-κB în macrofagele murine

S-a demonstrat că răspunsul inflamator cronic la pacienții cu cancer poate provoca și accelera simptomele de cașexie induse de cancer, inclusiv anorexia, pierderea în greutate, greața, lipoliza și pierderea musculară [ 8 , 30 ]. Prin urmare, limitarea răspunsului inflamator este considerată o strategie eficientă anti-casectică. Apoi am examinat dacă SGE poate inhiba producerea de citokine pro-inflamatorii și pro-cachectice cum ar fi IL-1, IL-6 și TNF-a în macrofagele stimulate cu LPS. Așa cum se arată în Figura 3A ,3A , SGE la concentrații de până la 100 pg / ml nu a induce citotoxicitate în macrofagele peritoneale murine; astfel, am tratat macrofagele cu 5, 10, 25 și 50 μg / ml SGE în acest studiu. Nivelurile mRNA de IL-1a, IL-6 și TNF-a au crescut semnificativ după stimularea cu LPS, în timp ce ele au scăzut considerabil prin pretratarea SGE într-o manieră dependentă de doză (IL-1; F = 6,574e + 008, p <0.0001, IL-6, F = 1.198e + 008, p <0.0001, TNF-a, F = 4.45e + 008, p <0.0001, ANOVA cu o singură cale). În supernatantele de cultură, nivelele secretate ale IL-1p, IL-6 și TNF-a au fost, de asemenea, remarcabil scăzute la celulele tratate cu SGE comparativ cu celulele martor netratate, similare cu efectele dexametazonei, utilizate ca martor pozitiv (IL- 1, F = 539,3, p <0,0001, IL-6, F = 206,3, p <0,0001, TNF-a, F = 111,6, p <0,0001, ANOVA unidirecțională ). În plus, în celulele 264.7 Raw, SGE a redus eficient producția de NO produsă de LPS și expresia iNOS atât la nivelul mRNA, cât și la nivelul proteinei, în măsurarea nivelurilor comparabile cu cele induse de dexametazonă (producția de NO, F = 2926, p <0,0001, mRNA iNOS, F = 258,0, p <0,0001, proteină iNOS, F = 132,6, p <0,0001, ANOVA cu sens unic) (Figura 4A și 4B ). După cum sa raportat în studiile anterioare, producția de citokine inflamatorii a fost inhibată considerabil prin tratamentul cu extract de etanol cu ​​plante unice, dar eficacitatea SGE a fost superioară celei a unei plante unice. În special, eficacitatea fiecărei plante la 16,7 μg / ml, adică concentrația corespunzătoare SGE 50 μg / ml, a fost nesemnificativă, ceea ce indică faptul că aceste plante au o activitate antiinflamatorie mai mare atunci când sunt utilizate ca un cocktail pe bază de plante ( Figura 3 ). S-a demonstrat că activarea MAPK și NF-κB este critică pentru producerea indusă de LPS a citokinelor proinflamatorii. Am constatat că stimularea LPS a crescut semnificativ nivelele p38, ERK și JNK fosforilate în celulele 264.7 Raw, în timp ce pre-tratamentul SGE a scăzut în mod eficient nivelurile lor într-o manieră dependentă de doză. În plus, fosforilarea indusă de LPS și degradarea IkBa au fost, de asemenea, remarcabil scăzute în celulele tratate cu SGE (p-p38, F = 75,28, p <0,0001, p-ERK, F = 70,46, p <0,0001, p-JNK; = 34,05, p <0,0001, pIkBa / IkBa; F = 144,7, p <0,0001, ANOVA cu sens unic) (Figura ( Figura 4C4C ).

Un fișier extern care deține o imagine, o ilustrație, etc. Numele obiectului este oncotarget-09-16284-g003.jpg

SGE inhibă producția indusă de LPS a citokinelor inflamatorii în macrofagele peritoneale murine

(A) După însămânțarea macrofagelor peritoneale pe plăci de cultură cu 96 de godeuri, SGE (10-500 pg / ml) a fost adăugat în godeuri și incubat timp de 24 de ore. Viabilitatea celulelor a fost determinată utilizând kitul CCK-8. Datele sunt exprimate ca mijloace ± SD efectuate în triplicat. (B) Celulele pretreate cu sau fără 10, 25 și 50 pg / ml SGE timp de 1 h au fost stimulate cu LPS (200 ng / ml) timp de 6 ore și nivelele mRNA ale IL-1a, IL-6 și TNF -α au fost determinate prin RT-PCR. Intensitățile benzii relative la cele ale celulelor netratate cu SGE au fost normalizate la GAPDH și au fost exprimate ca mijloace ± SD de la două experimente independente. (C) Celulele au fost pre-tratate cu sau fără 5, 10, 25 și 50 pg / ml SGE sau dexametazonă (10 pM) timp de 1 h și stimulate cu LPS (200 ng / ml) timp de 24 de ore. După colectarea supernatanților de cultură, nivelele de IL-1p, IL-6 și TNF-a au fost măsurate prin ELISA și exprimate ca mijloace ± SD efectuate în triplicat. # p <0,01 față de controlul netratat, ** p <0,01 față de controlul netratat cu SGE.

Un fișier extern care deține o imagine, o ilustrație, etc. Numele obiectului este oncotarget-09-16284-g004.jpg

SGE inhibă producția de NO induse de LPS și activarea MAPK / NF-κB în celulele 264.7 Raw

(A) Celulele au fost pretratate cu sau fără concentrațiile indicate de SGE sau dexametazonă (10 uM) timp de 1 oră și apoi au fost stimulate cu LPS (200 ng / ml). După 24 de ore, s-au măsurat nivelele de NO în supernatantele de cultură. Datele sunt reprezentative pentru trei experimente independente și sunt exprimate ca mijloace ± SD efectuate în triplicat. (B) nRNA și nivelurile de proteină ale iNOS în celulele tratate așa cum s-a descris în (A) au fost examinate prin RT-PCR și, respectiv, Western blotting. Datele au fost exprimate ca mijloace ± SD a două experimente independente. (C) Celule pre-tratate cu sau fără concentrațiile indicate de SGE timp de 1 oră au fost stimulate cu LPS (200 ng / ml) timp de 1 h și apoi supuse la Western blotting.Intensitățile benzii relative la celulele netratate cu SGE au fost determinate și reprezentate ca mijloace ± SD de la două experimente independente. # p <0,01 față de controlul netratat, * p <0,05 și ** p <0,01 față de controlul netratat cu SGE.

SGE atenuează inhibiția mediată de CT-26 CM a proliferării myoblastului C2C12 și a pierderii de miocub C2C12 mediată de CT-26 CM

În studiile anterioare, tratamentul cu CT-26 CM a suprimat proliferarea și diferențierea mioblastelor în miotuburi și degradarea miotubului accelerat, sugerând că factorii derivați de la tumori, cum ar fi myostatina și IL-6, promovează pierderea mușchilor scheletici [ 31 , 32 ]. Pentru a examina efectele SGE asupra pierderii musculare induse de tumori, am măsurat mai întâi proliferarea myoblastului C2C12 după tratamentul cu CT-26 CM tratat cu SGE sau CT-26 CM neautentic diluat 1: 5 în GM timp de 48 de ore.După cum este arătat în Figura Figura 5A ,5A , CT-26 CM netratată cu SGE a suprimat sever proliferarea myoblastului C2C12 cu aproximativ 65% comparativ cu martor GM, în timp ce tratamentul cu CT-26 CM tratat cu SGE de 10, 25 și 50 pg / nu afectează în mod semnificativ proliferarea myoblastului C2C12 (F = 523,4, p <0,0001, ANOVA cu sens unic). În mod special, celulele incubate în 25 și 50 pg / ml CM tratate cu SGE au fost afectate în mod similar cu cele incubate în martor GM. Apoi, am analizat dacă SGE atenuează atrofia musculară mediată de CT-26 CM prin inhibarea diferențierii mioblastelor C2C12 în miotuburi și miotuburi C2C12 degradante. Similar studiilor anterioare, am observat că CT-26 CM de control netratat cu SGE a afectat semnificativ diferențierea C2C12 în comparație cu DM de control, însoțită de numerele micotuburilor reduse și expresia MyH. Între timp, CT-26 CM tratată cu SGE nu a împiedicat sever diferențierea mioblastului C2C12, prezentând o formare a miotubului mai crescută și o expresie MyH în comparație cu CM controlul CT-26 (Figura 5B ). Când miotuburile C2C12 diferențiate au fost tratate cu CT-26 CM sau TNF-a, ele au fost remarcabil degradate în morfologie, iar nivelurile de MyH în miotuburi au fost reduse. Totuși, tratamentul cu CT-26 CM sau SGE tratat cu SGE înainte de stimularea cu TNF-a a împiedicat aproape complet degradarea miotuburilor și scăderea expresiei MyH (Figura 5C ).În plus, s-a evaluat efectul SGE asupra lipolizei mediate de CT-26 CM în adipocite bine diferențiate. După cum se arată în Figura 5D ,5D , incubarea adipocitelor 3T3-L1 cu CT-26 CM a scăzut acumularea de lipide la aproximativ 28% din nivelele lipidelor din adipocitele 3T3-L1 tratate cu mediu de cultură proaspăt, în timp ce CT-26 CM tratat cu SGE scăderea acumulării lipidelor la aproximativ 65-73%, sugerând că SGE inhibă lipoliza mediată de CT-26 CM (F = 50,17, p <0,0001, ANOVA cu sens unic).

Un fișier extern care deține o imagine, o ilustrație etc. Numele obiectului este oncotarget-09-16284-g005.jpg

SGE atenuează atrofia musculară indusă de CT-26 CM în celulele C2C12 și lipoliza adipocitelor 3T3-L1

(A) Myoblastele C2C12 au fost tratate cu CT-26 CM tratate cu SGE sau netratate după diluare cu GM și incubate timp de 48 de ore. Celulele au fost observate sub un microscop inversat, iar celulele viabile au fost măsurate prin analiza CCK-8. Datele sunt exprimate ca mijloace ± SD efectuate în triplicat. (B) Pentru a induce diferențierea miogenică, mioblastele C2C12 s-au incubat în DM sau în CT-26 CM tratate cu SGE sau după diluare cu DM. După 3 zile, celulele au fost observate sub un microscop inversat și expresia MyH a fost detectată prin Western blotting. (C) Miotubele C2C12 diferențiate în DM timp de 3 zile au fost incubate suplimentar în DM sau în CT-26 CM tratate cu SGE sau timp de 48 de ore. În plus, miotuburile C2C12 au fost tratate cu TNF-a (20 ng / ml) timp de 48 de ore în prezența sau absența SGE. S-au observat celule și expresia MyH a fost determinată prin Western blotting. Intensitățile benzii relative au fost calculate utilizând software-ul ImageJ după normalizarea la tubulină. (D) Adipocitele mature 3T3-L1 au fost tratate cu CT-26 CM tratate cu SGE sau netratate timp de 48 de ore și acumularea de lipide în celule a fost măsurată prin colorarea Oil Red O. Datele sunt reprezentative pentru trei experimente independente și sunt exprimate ca mijloace ± SD efectuate în triplicat. # p <0,01 față de controlul netratat CT-26 CM, ** p <0,01 față de controlul netratat cu SGE.

Administrarea orală zilnică a SGE la șoarecii purtători de tumori CT-26 a atenuat scăderea în greutate și creșterea tumorilor suprimate

În experimentele in vitro , SGE a indus moartea celulelor CT-26 și a inhibat pierderea musculară mediată de CT-26, lipoliza și răspunsul inflamator indus de LPS. Prin urmare, am examinat în continuare eficienta in vivo a tratamentului cu SGE în termenii efectelor sale anti-canceroase și anti-casectice la șoarecii purtători de tumori CT-26. Așa cum este arătat în Figura 6A ,6A , greutatea corporală a șoarecilor normali sănătoși a crescut constant în timpul perioadei experimentale, în timp ce sarcina tumorală CT-26 a redus greutatea corporală cu aproximativ 5,7% la 5 zile după injectarea tumorii; diferența de greutate corporală între șoarecii normali și cei care suferă de tumori a fost de aproximativ 10% indiferent de greutatea tumorii. Pe de altă parte, greutatea corporală a fost semnificativ crescută la șoarecii cu tumori CT-26 tratați cu SGE de 10 și 50 mg / kg, indicând o recuperare de aproximativ 95% și 93,3% din greutatea corporală a șoarecilor normali, respectiv 20). În concordanță cu efectul inhibitor al SGE asupra proliferării celulelor CT-26 in vitro , am observat că administrarea SGE de 10 și 50 mg / kg a suprimat în mod semnificativ creșterea tumorii cu 44,2% și, respectiv, 48,8% în șoarecii cu tumori CT-26, comparativ cu șoarecii de control tratați cu soluție salină în ziua 20 (Figura 6B ). Șoarecii de control au avut o greutate medie a tumorii de 1,88 ± 0,89 g, în timp ce șoarecii tratați cu 10 și 50 mg / kg SGE aveau greutăți medii ale tumorii de 0,79 ± 0,36 g și 0,84 ± 0,20 g, indicând suprimarea respectivă de 57,98% și respectiv 55,32% = 5.881, p = 0.0166, ANOVA cu sens unic). După cum se arată în figura 6C ,6C , în momentul sacrificării, parametrii legati de cașexie, inclusiv greutățile din masa corporală finală, carcasă, grăsime epididimală, grăsime subcutanată abdominală, mușchi gastrocnemius și inimă, doza / zi / șoarece au fost semnificativ reduse la șoarecii de control tratați cu soluție salină comparativ cu cei la șoarecii normali. În plus, nivelul IL-6 al serului a fost în mod dramatic crescut la soarecii tratați cu CT-26 cu șoareci purtători de tumori. Prin contrast, administrarea orală de SGE de 10 și 50 mg / kg a împiedicat considerabil pierderile în greutatea corporală finală (F = 6,270, p = 0,0137), greutatea carcasei (F = 6,862, p = 0,0103) , p = 0,0654), pierderea țesutului adipos (F = 9,562, p = 0,0033) și a mușchilor scheletici (F = 8,001, p = 0,0062) -26 soareci purtatori de tumori, in timp ce tratamentul cu SGE nu a restabilit pofta de mancare.Aceste rezultate arată în mod colectiv că SGE a redus povara tumorală, a reprimat răspunsurile inflamatorii și a atenuat simptomele de cașexie indusă de tumoarea CT-26.

Un fișier extern care deține o imagine, o ilustrație etc. Numele obiectului este oncotarget-09-16284-g006.jpg

Administrarea SGE ameliorează scăderea în greutate și întârzie creșterea tumorii la șoarecii purtători de tumori CT-26

(A-B) Șoarecii BALB / c masculi (n = 15) au fost inoculați subcutanat cu celule CT-26 (3 x 106 / șoarece).După 5 zile, șoarecii purtători de tumori au fost repartizați aleatoriu în trei grupe (n = 5 per grup) și s-au administrat zilnic salină sau SGE în doze de 10 și 50 mg / kg timp de 15 zile. De asemenea, șoarecii normali cu șobolani fără șoareci (n = 5) au fost de asemenea administrați un volum egal de soluție salină zilnic în timpul experimentului. Greutatea corporală și volumul tumorii au fost măsurate la fiecare 3 zile și au fost exprimate ca mijloace ± SD pentru fiecare grup. * p <0,05 față de controlul tratat cu soluție salină. (C) în ziua 20 șoarecii au fost sacrificați, tumorile excizate și carcasa, grăsimea epididimală, grăsimea subcutanată abdominală, mușchiul gastrocnemius și inima cântărită. Nivelurile IL-6 din ser au fost determinate prin ELISA. Datele sunt reprezentative pentru trei experimente independente și sunt exprimate ca mijloace ± SD pentru fiecare grup. # p<0,01 față de grupul normal, * p <0,05 și ** p <0,01 față de controlul tratat cu soluție salină.

DISCUŢIE

Cuvântul „cașexia” provine din cuvintele grecești kakos, ceea ce înseamnă rău și hexia, ceea ce înseamnă starea și descrie un sindrom de risipă multifactorială caracterizat prin pierderea excesivă în greutate și epuizarea grăsimii și a mușchilor scheletici. Casexia apare la 10-40% dintre pacienții cu afecțiuni cronice, inclusiv insuficiența renală și hepatică, boala pulmonară obstructivă cronică, sindromul imunodeficienței dobândite, artrita reumatoidă și cancerul și afectează mai mult de 5 milioane de persoane din SUA [ 5,33 ].În special, cașxia indusă de cancer este unul dintre factorii cei mai critici care reprezintă morbiditatea și mortalitatea ridicată la până la 80% dintre pacienții cu cancer avansat și aproape 20% dintre pacienții cu cancer mor direct din pierderea în greutate indusă de cașexie. În plus, cașexia indusă de cancer cauzează răspunsuri slabe la chimioterapia convențională și la radioterapie în ceea ce privește eficacitatea și efectele adverse și scade supraviețuirea și calitatea vieții [ 34 , 35 ]. Mai mulți agenți prezintă eficacitate considerabilă în gestionarea cașexiei cancerului prin stimularea apetitului (de exemplu, acetat de megesterol, canabinoide, corticosteroizi și ghrelin) și reglarea mediatorilor pro-cachectici (de exemplu, medicamentele antiinflamatoare nesteroidiene, acidul eicosapentaenoic și beta- β-metilbutirat) [ 7 ]. Cu toate acestea, aceste medicamente au arătat limitări în ceea ce privește biodisponibilitatea lor scăzută și efectele secundare nedorite și până în prezent nu au existat tratamente aprobate pentru cașexia.

Există dovezi considerabile care arată că inversarea greutății și a pierderii masei musculare reprezintă obiectivul terapeutic pentru cașexia cancerului, mai degrabă decât stimularea apetitului [ 36-38 ]. Recent, câteva medicamente pe bază de plante, inclusiv Hochuekkito (TJ-41) și Coptidis rhizoma , au demonstrat atenuarea cașexiei cancerului prin reducerea producției de IL-6, care este un mediator critic al pierderii musculare [ 39 , 40 ]. În plus, ZBHP, cuprinzând ierburile Rhizoma Anemarrheana și Cortex Phellodendri , a crescut greutatea corporală și a suprimat atrofia musculară indusă de tumori prin inhibarea citokinelor proinflamatorii și a catabolismului muscular într-un model C2619 ]. În studiile noastre anterioare, extractul de coajă Citrus unshiu și formula tradițională orientală Sosiho-tang (Xiaochaihu-tang în chineză, Sho-saiko-to în japoneză) au îmbunătățit eficient simptomele legate de cașexie în șoarecii cu tumori CT-26 prin reducerea sistemică inflamația și degradarea mușchiului32 , 41 ]. În unele cazuri, simptomele de cașexie au fost atenuate prin inhibarea creșterii tumorale, stimularea apetitului și eliminarea factorilor proacachetici derivați din tumori, cum ar fi IL-6 și miostatina42 ]. Deoarece cașexia cancerului este un sindrom complex care implică factori diferiți de gazdă și tumori, medicamentele multidisciplinare pe bază de plante pot fi un remediu bun pentru tratamentul acestuia.

În studiul actual, am formulat un amestec de plante numit SGE, compus din Ginseng Radix alba , Atractylodis Rhizoma alba și Hoelen , bazat pe efectele anticanceroase, antiinflamatorii, anti-oboseală și imună pentru fiecare plante. S-a constatat că SGE la o concentrație mai mare de 100 pg / ml a determinat moartea celulelor CT-26 indusă eficient prin reglarea expresiei proteinelor anti- și pro-apoptotice și inducerea stresului ER, iar activarea AMPK a fost esențială pentru moartea celulară mediată de SGE Figurile1 și 2 ). Interesant, SGE a prezentat o activitate anti-proliferativă mai puternică ca amestec pe bază de plante, comparativ cu fiecare plante medicinale sau tratamentul lor co-tratament ( Figura 1 ). În plus, SGE a inhibat remarcabil producția citokinelor proinflamatorii prin suprimarea expresiei iNOS și activarea MAPK / NF-kB în celulele Raw 264.7 (Figura 3 și 4 ). Mai mult, CT-26 CM tratat cu SGE nu a afectat sever proliferarea sau diferențierea myoblastului C2C12, dar a împiedicat în mod eficient degradarea miocubului C2C12, într-o măsură similară cu cea indusă de GM sau DM normale. În plus, CT-26 CM tratat cu SGE a arătat un efect redus asupra acumulării lipidelor în adipocitele 3T3-L1 (Figura 5 ). Așa cum s-a demonstrat în experimentele in vitro în care SGE posedă activități anticanceroase, antiinflamatoare, anti-musculare și anti-lipoliză, administrarea SGE la șoarecii cu tumori CT-26 a dus la recuperarea considerabilă a greutății corporale și suprimarea semnificativă a în comparație cu tratamentul cu soluție salină (Figura 6A și 6B ).Masele musculare scheletice, masa de grăsime și greutatea inimii scăzute prin sarcina CT-26 au fost de asemenea crescute prin administrarea de SGE, în timp ce aportul de alimente a fost similar între șoarecii tratați cu soluție salină și SGE. În plus, nivelul serului IL-6 crescut de sarcina tumorală a fost, de asemenea, redus dramatic prin administrarea SGE, susținând efectele benefice ale SGE asupra simptomelor de cașexie indusă de cancer (Figura 6C ). Pe de altă parte, administrarea de SGE la șoareci normali sănătoși fără tumori nu a arătat niciun efect semnificativ al creșterii greutății corporale în comparație cu grupul martor administrat cu soluție salină ( Tabelul suplimentar 2 ). În plus, administrarea SGE a avut un efect redus asupra modificărilor de greutate ale organelor majore și a parametrilor asociați cu toxicitatea hepatică și renală, consolidând eficacitatea SGE pentru a atenua pierderea de greutate indusă de cancer, fără efecte adverse ( tabelele suplimentare 3 și 4 ).

În plus față de cașexia indusă de cancerul în sine, agenții anti-cancer provoacă, de asemenea, simptome de cașexie însoțite de greutate și pierdere de mușchi, care pot afecta eficacitatea agenților și rata de supraviețuire a pacienților. Cisplatina este un agent chimioterapeutic utilizat pe scară largă pentru tratamentul mai multor tumori solide. Recent, cisplatina a activat sistemul p38 / CEBP-β și proteome / autophagy, creșterea miostatinei și citokinelor inflamatorii și scăderea Akt și miogenin / myoD, ceea ce a dus în cele din urmă la proteoliză sporită, scăderea masei și a forței musculare, ]. Prin urmare, agenții care atenuează simptomele de cașexie induse de cisplatină pot fi aplicate chimioterapiei ca adjuvanți anti-cancer. În acest sens, medicamentele pe bază de plante care au activități farmacologice multimodale pot fi utile pentru depășirea acestor condiții și este justificată cercetarea eficacității preventive și terapeutice a SGE împotriva cașexiei induse de cisplatină.

În rezumat, studiul prezent a demonstrat că SGE reduce masa tumorală, inflamația sistemică și simptomele de cașexie la șoarecii purtători de tumori CT-26, urmată de prevenirea mușchilor induse de cancer și a degradării grăsimilor. Aceste date indică faptul că SGE este un tratament eficace pe bază de plante pentru pacienții cu cancer atunci când este combinat cu agenți chimioterapeutici anti-cancer.

MATERIALE SI METODE

Linii celule

Celulele carcinoame de colon murine CT-26 (ATCC) CRL-2638), celulele macrofage murine macrofage 264.7 (ATCC TIB-71), myoblastele murine C2C12 (ATCC CRL-1772) și pre-murine 3T3-L1 -adipocite (ATCC CL-173) au fost achiziționate de la ATCC (Manassas, VA, USA) și au fost menținute la 37 ° C într-o atmosferă de 5% C02. Mediul de mediu Eagle modificat de Dulbecco (DMEM) sau mediul Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 (Lonza, Walkersville, MD, USA) conținând 10% ser fetal de bovine (FBS, Biotechnics Research, Lake Forest, CA) a fost utilizat streptomicină (Cellgro, Manassas, VA, SUA) pentru celulele CT-26 și C2C12 sau, respectiv, celulele 264,7 Raw.

animale

Șoareci BALB / c de sex masculin în vârstă de șase săptămâni au fost achiziționați de la Taconic Farms (Samtako Bio Korea, Osan, Coreea) și au fost adăpostiți în condiții de patogeni specifici (ciclu de lumină / întuneric 12 h / 12 h, 22 ± 1 ° C, 55 ± 5% umiditate). Experimentele pe animale au fost aprobate de Comitetul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor din Institutul Coreei de Medicină Orientală (KIOM, Daejeon, Coreea, numerele de referință 13-100, # 14-074 și # 15-011) și au fost efectuate în conformitate cu liniile directoare ale Comitetului pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de la KIOM.

Prepararea macrofagelor peritoneale murine

Pentru prepararea macrofagelor peritoneale, șoarecii BALB / c masculi au fost injectați fiecare intraperitoneal cu 300 ui de tioglicolat de sodiu 3% steril (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA). În ziua 3, macrofagele au fost recoltate prin irigarea cavității abdominale cu 10 ml soluție salină tamponată cu fosfat rece (PBS) și celulele roșii sanguine (RBCs) au fost lizate cu tampon de liză RBC și apoi celulele suspendate în mediu FBS / RPMI 10% au fost incubat într-un incubator de 5% C02 la 37 ° C peste noapte.După adăugarea unui mediu proaspăt, s-au utilizat celule atașate la suprafața plăcii de cultură.

Reactivi și anticorpi

Lipopolizaharida (LPS) din Escherichia coli și factorul de necroză tumorală murină recombinantă-a (rmTNF-a) au fost obținute de la Sigma Chemical Co. și Promokine (Heidelberg, Germania). Albuminul seric bovin alb (BSA) și Tween 20 au fost achiziționate de la GenDEPOT Inc. (Barker, TX, SUA) și AMRESCO (Solon, OH, SUA). Anticorpii împotriva polimerazei ribose polimerazice ADP polimerazice Bcl-2, XIAP, Bax, Bad, poly ADP ribose (PARP), sintaza oxidului nitric inductibil (iNOS), p38, p38 (Thr180 / Tyr182), kinaza reglată extracelulară (ERK) (AMPK), p-AMPK (Thr172), IkBa, pIkBa (Thr202 / Tyr204), kinaza N-terminală c-jun (JNK) Ser32) și tubulină au fost achiziționate de la Cell Signaling Technology (Danvers, MA, SUA). Un anticorp anti-miozin cu lanț greu (MyH) și kitul de anticorpi ER de stres, incluzând anticorpi împotriva Bip, ER oxidoreductază 1 (Ero1) -La, enzima care necesită inozitol (IRE) 1α, izomerază proteică disulfurică (PDI) Proteina omoloagă (CHOP) și kinaza ER de tip kinază de proteină kinază (PERK), au fost obținute de la R & D Systems (Minneapolis, MN, SUA) și Cell Signaling Technology, respectiv. Dexametazona și compusul C au fost achiziționate de la Sigma Chemical Co., și inhibitorii protein kinazei activate mitogen (MAPK), incluzând SP600125, SB203580 și PD98059, au fost achiziționați de la Calbiochem (San Diego, CA, SUA).

Prepararea SGE

Toate plantele uscate, inclusiv Ginseng Radix alba, Atractylodis Rhizoma alba și Hoelen , au fost achiziționate de pe piața Yeoncheon Hyundai Herbal (Yeoncheon, Coreea), au confirmat identitatea profesorului Ki Hwan Bae (Universitatea Națională Chungnam, Coreea) bancă a Centrului de aplicare a medicamentelor coreene (Daegu, Coreea). Originea fiecărei plante este prezentată în tabelul suplimentar 1 .Pentru a prepara SGE, 16,67 g din fiecare planta se macină în pudră și apoi se extrage în 500 ml etanol 70% într-un incubator de agitare la 37 ° C la 100 rpm timp de 24 ore. Extractul s-a filtrat folosind hârtie de filtru de 185 mm (Whatman, Piscataway, NJ, SUA) și s-a concentrat folosind un evaporator rotativ vid (Buchi, Tokyo, Japonia). După uscarea prin congelare, pulberea SGE a fost colectată și cântărită la 1,96 g;prin urmare, randamentul a fost de 3,92%. Pentru experimentele in vitro , pulberea SGE a fost dizolvată în DMSO 10% (v / v) până la o concentrație finală de 50 mg / ml, filtrată printr-un filtru de disc de 0,22 pm și apoi depozitată la -20 ° C până la utilizare.

Testul viabilității celulare și colorarea celulelor vii / moarte

Efectul SGE asupra viabilității celulare a fost determinat utilizând Cell Counting Kit-8 (CCK, Donjindo Laboratories, Kumamoto, Japonia) conform instrucțiunilor producătorului. Pe scurt, celulele au fost însămânțate în plăci de cultură cu 96 de godeuri (0,5-1×104 / godeu / 100 pL), lăsate să se atașeze la plăci și apoi tratate cu concentrații variate de SGE timp de 24-48 ore. S-a adăugat o soluție CCK (10 uL / ​​godeu) în fiecare godeu și s-a măsurat absorbanța la 450 nm utilizând cititorul de microplăci SpectraMaxi3 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA) după o altă incubație timp de 1 oră. În plus, celulele vii și cele moarte au fost vizualizate utilizând Kitul de imagistică celulară LIVE / DEAD (Invitrogen, Carlsbad, CA, SUA) conform protocolului producătorului. Celulele vii (verde) și moarte (roșu) au fost observate sub un microscop fluorescent (Nikon Eclipse Ti, Instrumente Nikon, Kanagawa, Japonia).

Analiza Western blot

După spălarea celulelor cu PBS, s-au preparat lizatele celulare utilizând reactivul de extragere a proteinelor M-PER Mammalian (Thermo Scientific, Rockford, IL, SUA) conform instrucțiunilor producătorului. Concentrația proteinei lizate a fost determinată utilizând Pierce Kitul pentru determinarea proteinei cu acid bicinchoninic (Thermo Scientific) și cantități egale din fiecare probă de proteină au fost amestecate cu tampon de probă NuPAGE 4 x dodecil sulfat de litiu (Invitrogen) și denaturați prin încălzire timp de 10 minute la 95 ° C. Probele au fost separate prin SDS-PAGE de 8-15% și transferate electro-pe o membrană de difluorură de poliviniliden (Immobilon-P, Millipore, DARMSTADT, Germania). Membranele au fost blocate într-o soluție salină 3% BSA Tris tamponată conținând 0,05% Tween 20 (TBST) timp de 1 oră la temperatura camerei și au fost incubate mai întâi cu anticorpi specifici peste noapte la 4 ° C și apoi cu anticorpi secundari conjugați HRP timp de 1 oră la temperatura camerei. După spălarea cu TBST, benzi imunoreactive au fost vizualizate folosind Substratul Western ECL Bio-Rad Clarity  sub ChemiDoc Touch Imaging System (Bio-Rad, Hercules, CA, SUA). Intensitatea benzii a fost măsurată utilizând software-ul ImageJ (Institutul Național de Sănătate, Bethesda, MD, SUA).

Reacția în lanț cu transcripție inversă-polimerază (RT-PCR)

ARN – ul total a fost extras folosind o soluție de extracție a ARN (bioexperimentul Co., Daejeon, Coreea) și transcris invers utilizând 1 st Strand cDNA Synthesis Kit (bioexperimentul Co.) în conformitate cu protocolul producătorului. s-a efectuat amplificarea cADN a iNOS, IL-6, TNF-a și IL-1a în Vertiti 96-well Thermal Cycler (Applied Biosystems, Foster City, CA, SUA) și produsele ADN au fost vizualizate pe agaroză 1% gel prin colorare cu GreenLight  (BioAssay Co.). Intensitatea benzii relative a fost calculată folosind software-ul ImageJ.

Determinarea nivelurilor de NO în supernatantele de cultură

Celulele au fost pre-tratate cu concentrațiile indicate de SGE timp de 1 oră și apoi au fost stimulate cu LPS (200 ng / ml) timp de 24 de ore. Supernatantele culturii au fost obținute după centrifugare la 12000 rpm timp de 10 minute pentru a îndepărta reziduurile celulare și au fost amestecate cu același volum de reactiv Griess (1% sulfanilamidă, 0,1% diclorhidrat de naftiletilendiamină și 2,5% acid fosforic). După incubare timp de 5 minute la temperatura camerei, absorbanța la 570 nm a fost măsurată utilizând cititorul Multi-mode SpectraMaxi3 (Molecular Devices).

Analiza imunosorbantă enzimatică legată de citokine (ELISA)

Nivelurile de proteine ​​ale IL-1β, IL-6 și TNF-a de șoarece în supernatantele de cultură și serurile de șoarece au fost evaluate utilizând kitul ELISA-Ready-SET-Go (eBioscience, San Diego, CA, SUA) .

Prepararea mediei condiționate CT-26 (CM)

CT-26 celule suspendate în 10% FBS / DMEM au fost însămânțate în vase de cultură de 100 mm la o densitate de 5 x 10 4 celule / cm 2 , lăsate să adere și apoi tratate cu concentrațiile indicate de SGE. După 24 ore, celulele au fost spălate de trei ori cu PBS, spălate suplimentar de două ori cu DMEM fără ser și apoi incubate timp de 24 de ore în DMEM fără ser. CM a fost colectat și centrifugat pentru a îndepărta resturile celulare, urmată de filtrare utilizând un filtru de disc de 0,22 pm.

Detectarea proliferării mioblastelor C2C12, a diferențierii miotuburilor și a degradării miotubului

CT-26 CM a fost diluat 1: 5 fie cu FBS / DMEM 10% (mediu de creștere GM), fie cu 5% ser de cal (HS, Gibco-BRL, Grand Island, NY, USA) / DMEM și au fost adăugate cantitățile corespunzătoare de FBS, HS și antibiotice pentru a compensa CM. Pentru a măsura proliferarea mioblaste C2C12, celule însămânțate în placa de cultură cu 96 de godeuri (1 x 10 3 celule / godeu) au fost tratate cu control al GM, SGE-tratate CT-26 CM, sau netratate CT-26 CM. După incubare timp de 48 ore la 37 ° C, proliferarea celulară a fost observată și măsurată utilizând kitul CCK-8. Pentru a induce diferențierea miogenică, mioblastele C2C12 la o confluență de aproximativ 80% au fost incubate în DM de control, CT-26 CM tratate cu SGE sau CT-26 CM netratate timp de 3-7 zile. Degradarea miotubului a fost indusă prin adăugarea de CT-26 CM sau TNF-a (20 ng / ml).

Măsurarea acumulării lipidelor în adipocitele 3T3-L1

Pentru a induce diferențierea adipogenică, celulele 3T3-L1 cultivate la confluență în FBS / DMEM 10% au fost incubate în DM adipocite constând din FBS / DMEM 10%, insulină (1 pg / ml), dexametazonă (1 pM) și 3-izobutil- 1-metilxantină (0,5 mM) timp de 3 zile. Ulterior, celulele au fost menținute în 10% FBS / DMEM conținând insulină (10 pg / ml) timp de 2 zile și în FBS / DMEM 10% timp de încă 2 zile, schimbând mediul zilnic. În lipoliza indusă de tumoare, adipocitele mature 3T3-L1 au fost incubate cu CT-26 CM tratate cu SGE sau netratate timp de 2 zile și apoi acumularea celulară de vacuole neutre a lipidelor a fost evaluată prin colorarea Oil Red O. Colorantul roșu reținut a fost eluat cu izopropanol și absorbanța a fost măsurată la 520 nm.

Experimente pentru cașexia indusă de cancer in vivo

Pentru a induce cancer induse cașexie, CT-26 celule (3 x 10 6celule / șoarece) au fost injectate subcutanat în regiunea abdominală a șoarecilor BALB / c masculi. În ziua 5 după injectarea tumorală, greutatea corporală și consumul de alimente au fost scăzute la șoarecii cu tumori cu aproximativ 10% comparativ cu cea a șoarecilor normali (fără tumori + salină). Șoarecii purtători de tumoare au fost împărțiți aleatoriu în trei grupe și s-a administrat zilnic salină (tumoare + salină, șoareci martor) sau SGE zilnic la doze de 10 și 50 mg / kg într-un volum de 100 uL timp de 15 zile. Șoareci normali sănătoși au fost de asemenea administrați un volum egal de soluție salină. În timpul experimentului, greutatea corporală, aportul alimentar și volumul tumorii au fost măsurate la fiecare 3 zile. În ziua 20 după injectarea tumorii, tumori, grăsime epididimală, grăsime subcutanată abdominală, mușchi gastrocnemius și inima au fost rezecați de la șoareci după sacrificare cu CO 2prin inhalare și apoi cântărit. În plus, probele de sânge integral s-au colectat și nivelele IL-6 în ser s-au determinat prin ELISA. Pentru a măsura greutatea carcasei, sângele a fost exsanguinat, iar viscerele rămase au fost șterse clar folosind un tampon de tifon.

Statistici

Datele sunt prezentate ca mijloace ± deviația standard (SD). Valorile semnificative diferite între cele două grupuri au fost analizate prin t- testul Student . Efectul tratamentului a fost analizat utilizând metoda ANOVA într-o singură direcție prin testul de comparație Dunnett. O p- valoare mai mică de 0,05 a fost considerată ca indicând semnificația statistică. Toate variabilele au fost analizate utilizând GraphPad Prism5 (GraphPad software Inc., La Jolla, CA, USA).

 

MATERIALE SUPLIMENTARE FIGURILE ȘI TABELELE

Logo-ul oncotarget

Link to Publisher's site
Oncotarget . 2018 Mar 27; 9 (23): 16284-16296.
Publicat online 2018 Mar 27 doi: 10.18632 / oncotarget.24616
PMCID: PMC5893240
PMID: 29662645

Aeyung Kim , 1 Minju Im , 1 și Jin Yeul Ma 1

Note de subsol

Contribuit de

Contribuția autorului

AK și JYM au conceput cercetarea. AK și MI au proiectat și au efectuat experimentele. AK a analizat datele și a scris manuscrisul. Toți autori au analizat manuscrisul.

CONFLICTE DE INTERES

Toți autori declară că nu au conflicte de interese.

FINANȚAREA

Această lucrare a fost susținută de Grant K17281 acordat Institutului Coreei de Medicină Orientală (KIOM) din cadrul Ministerului Științei, TIC și Planificării Viitoare (MSIP), Republica Coreea.

REFERINȚE

1. Centrul MM, Jemal A, Smith RA, Ward E. Variații la nivel mondial în cancerul colorectal. CA Cancer J Clin. 2009; 59 : 366-78. https://doi.org/10.3322/caac.20038 . PubMed ]
2. Arnold M, Sierra MS, Laversanne M, Soerjomataram I, Jemal A, Bray F. Modele și tendințe globale în incidența și mortalitatea cancerului colorectal. Intestin. 2017; 66 : 683-91. https://doi.org/10.1136/gutjnl-2015-310912 . PubMed ]
3. Siegel RL, Miller KD, Fedewa SA, Ahnen DJ, Meester RGS, Barzi A, Jemal A. Statisticile cancerului colorectal, 2017. CA Cancer J Clin. 2017; 67 : 177-93. https://doi.org/10.3322/caac.21395 . PubMed ]
4. Haggar FA, Boushey RP. Epidemiologia cancerului colorectal: incidența, mortalitatea, supraviețuirea și factorii de risc. Clin Colon Rectal Surg. 2009; 22 : 191-7. https://doi.org/10.1055/s-0029-1242458 .Articol gratuit PMC ] PubMed ]
5. Morley JE, Thomas DR, Wilson MM. Cachexia: fiziopatologie și relevanță clinică. Am J Clin Nutr.2006; 83 : 735-43. PubMed ]
6. Ali S, Garcia JM. Sarcopenie, cașexie și îmbătrânire: diagnostic, mecanisme și opțiuni terapeutice – un mini-revizuire. Gerontologie. 2014; 60 : 294-305. https://doi.org/10.1159/000356760 .Articol gratuit PMC ] PubMed ]
7. Aoyagi T, Terracina KP, Raza A, Matsubara H, Takabe K. Cachexia cancerului, mecanism și tratament. World J Gastrointest Oncol. 2015; 7 : 17-29. https://doi.org/10.4251/wjgo.v7.i4.17 . Articol gratuit PMC ]PubMed ]
8. Fearon KC, Glass DJ, Guttridge DC. Canceria cailor: mediatori, semnalizare și căi metabolice. Cell Metab. 2012; 16 : 153-66. https://doi.org/10.1016/j.cmet.2012.06.011 . PubMed ]
9. Petruzzelli M, Wagner EF. Mecanismele de disfuncție metabolică în cazexia asociată cancerului. Genele Dev. 2016; 30 : 489-501. https://doi.org/10.1101/gad.276733.115 . Articol gratuit PMC ] PubMed ]
10. Dodson S, Baracos VE, Jatoi A, Evans WJ, Cella D, Dalton JT, Steiner MS. Pierderea mușchilor în cazexia de cancer: implicații clinice, diagnostic și strategii de tratament emergente. Annu Rev Med. 2011;62 : 265-79. https://doi.org/10.1146/annurev-med-061509-131248 . PubMed ]
11. Carson JA, Baltgalvis KA. Interleukina 6 ca regulator cheie al masei musculare în timpul cașexiei. Exerc Sport Sci Rev. 2010; 38 : 168-76. https://doi.org/10.1097/JES.0b013e3181f44f11 .Articol gratuit PMC ] PubMed ]
12. Kumar NB, Kazu A, Smith T, Crocker T, Yu D, Reich RR, Reddy K, Hastings S, Exterman M, Balducci L, Dalton K, Bepler G. Cachexia cancerului: terapii tradiționale și abordări bazate pe mecanisme moleculare noi la tratament. Curr Opțiuni de tratament Oncol. 2010; 11 : 107-17. https://doi.org/10.1007/s11864-010-0127-z . Articol gratuit PMC ] PubMed ]
13. Gagnon B, Bruera E. O analiză a tratamentului medicamentos al cașexiei asociate cu cancerul. Droguri.1998; 55 : 675-88. PubMed ]
14. Ruiz Garcia V, Lopez-Briz E, Carbonell Sanchis R, Gonzalvez Perales JL, Bort-Marti S. Megestrol acetat pentru tratamentul sindromului anorexie-cașexie. Cochrane Database Syst Rev. 2013: CD004310. https://doi.org/10.1002/14651858.CD004310.pub3 . PubMed ]
15. Haslett PA. Abordări anticotokine la tratamentul anorexiei și cașexiei. Seminar Oncol. 1998; 25 : 53-7.PubMed ]
16. DeBoer MD, Marks DL. Descrierea terapiei: utilizarea antagoniștilor de melanocortină în tratamentul cașexiei în cazul bolilor cronice. Nat Clin Pract Endocrinol Metab. 2006; 2 : 459-66. https://doi.org/10.1038/ncpendmet0221 . PubMed ]
17. Suzuki H, Asakawa A, Amitani H, Fujitsuka N, Nakamura N, Inui A. Fatofiziologia cașexiei de cancer și aspectul translațional al medicamentelor din plante. Jpn J Clin Oncol. 2013; 43 : 695-705. https://doi.org/10.1093/jjco/hyt075 . PubMed ]
18. Park B, Jun JH, Jung J, You S, Lee MS. Medicamente din plante pentru cașexia de cancer: protocol pentru o revizuire sistematică. BMJ deschis. 2014; 4 : e005016. https://doi.org/10.1136/bmjopen-2014-005016 . Articol gratuit PMC ] PubMed ]
19. Zhuang P, Zhang J, Wang Y, Zhang M, Song L, Lu Z, Zhang L, Zhang F, Wang J, Zhang Y, Wei H, Li H. Reversarea atrofiei musculare de către pereții de plante Zhimu și Huangbai a semnalului IGF-1 / Akt și semnalul autofagiei în cazexia de cancer. Asistență pentru îngrijirea cancerului. 2016; 24 : 1189-98. https://doi.org/10.1007/s00520-015-2892-5 . PubMed ]
20. Chung SH, Choi CG, Park SH. Comparații între radix ginseng alb și rădăcină pentru activitatea antidiabetică și mecanismul la șoarecii KKAy. Arch Pharm Res. 2001; 24 : 214-8. PubMed ]
21. Son CG, Han SH, Cho JH, Shin JW, Cho CH, Lee YW, Cho CK. Inducerea hemopoiezei de către saenghyuldan, un amestec de radix ginseng, paeoniae radix alba și extracte hominis placentă. Acta Pharmacol Sin. 2003; 24 : 120-6. PubMed ]
22. Parcul HJ, Kim DH, Parcul SJ, Kim JM, Ryu JH. Ginseng în rețetele tradiționale pe bază de plante. J Ginseng Res. 2012; 36 : 225-41. https://doi.org/10.5142/jgr.2012.36.3.225 . Articol gratuit PMC ]PubMed ]
23. Inhibarea melanogenezei de selina-4 (14), 7 (11) -dien-8-onă izolată din Atractylodis Rhizoma Alba. Biol Pharm Bull. 2007; 30 : 719-23. PubMed ]
24. Yu S, Yasukawa K, Takido M. Extractul de Atractylodis rhizoma și componenta sa, atractylon, inhibă promovarea tumorii în carcinogeneza în două etape a pielii de șoarece. Phytomedicine. 1994; 1 : 55-8. https://doi.org/10.1016/S0944-7113(11)80023-1 . PubMed ]
25. Li C, Li Q, Liu R, Niu Y, Pan Y, Zhai Y, Mei Q. Plante medicinale pentru prevenirea și tratamentul osteoporozei. Am J Chin Med. 2014; 42 : 1-22. https://doi.org/10.1142/S0192415X14500013 . PubMed ]
26. Xu Z, Meng H, Xiong H, Bian Y. Caracteristici biologice ale teleomorfului și condiții optimizate de in vitro a fructelor din ciuperca Hoelen, Wolfiporia extensa (Basidiomycetes mai mari) Int J Med Mushrooms. 2014; 16 : 421-9. PubMed ]
27. Sano R, Reed JC. Mecanismele de moarte celulară induse de stresul ER. Biochim Biophys Acta. 2013;1833 : 3460-70. https://doi.org/10.1016/j.bbamcr.2013.06.028 . Articol gratuit PMC ] PubMed ]
28. Darling NJ, Cook SJ. Rolul căilor de semnalizare MAPK în răspunsul la stresul reticulului endoplasmatic. Biochim Biophys Acta. 2014; 1843 : 2150-63. https://doi.org/10.1016/j.bbamcr.2014.01.009 . PubMed ]
29. Shaw RJ, Kosmatka M, Bardeyy N, Hurley RL, Witters LA, DePinho RA, Cantley LC. LKB1 kinaza supresoare tumorale activează direct kinaza activată de AMP și reglează apoptoza ca răspuns la stresul energetic. Proc Natl Acad Sci SUA A. 2004; 101 : 3329-35. https://doi.org/10.1073/pnas.0308061100 .Articol gratuit PMC ] PubMed ]
30. Donohoe CL, Ryan AM, Reynolds JV. Cazexia de cancer: mecanisme și implicații clinice. Gastroenterol Res Pract. 2011; 2011 : 601434. https://doi.org/10.1155/2011/601434 .Articol gratuit PMC ] PubMed ]
31. Elkina Y, von Haehling S, Anker SD, Springer J. Rolul myostatinului în pierderea musculară: o prezentare generală. J Cachexia Sarcopenie Muscle. 2011; 2 : 143-51. https://doi.org/10.1007/s13539-011-0035-5 . Articol gratuit PMC ] PubMed ]
32. Kim A, Im M, Gu MJ, Ma JY. Extractul de coajă Citrus unshiu ameliorează pierderea de greutate indusă de cancer la șoareci care poartă adenocarcinom CT-26. Sci. Rep. 2016; 6 : 24214. https://doi.org/10.1038/srep24214 . Articol gratuit PMC ] PubMed ]
33. Inui A. Sindromul de anorexie-cachexie a cancerului: probleme actuale în cercetare și management. CA Cancer J Clin. 2002; 52 : 72-91. PubMed ]
34. Evans WJ, Morley JE, Argiles J, Bales C, Baracos V, Guttridge D, Jatoi A, Kalantar-Zadeh K, Lochs H, Mantovani G, Marks D, Mitch WE, Muscaritoli M, et al. Cachexia: o nouă definiție. Clin Nutr. 2008; 27 : 793-9. https://doi.org/10.1016/j.clnu.2008.06.013 . PubMed ]
35. Fearon KC, Voss AC, Hustead DS, grupul de studiu pentru cancerul de tip Cachexia Definirea cancerului de cachexie: efect al pierderii în greutate, aportul alimentar redus și inflamația sistemică asupra stării funcționale și a prognosticului. Am J Clin Nutr. 2006; 83 : 1345-50. PubMed ]
36. Acharyya S, Ladner KJ, Nelsen LL, Damrauer J, Reiser PJ, Swoap S, Guttridge DC. Cachexia de cancer este reglementată prin direcționarea selectivă a produselor genetice ale mușchilor scheletici. J Clin Invest. 2004; 114 : 370-8. https://doi.org/10.1172/JCI20174 . Articol gratuit PMC ] PubMed ]
37. Mueller TC, Bachmann J, Prokopchuk O, Friess H, Martignoni ME. Căile moleculare care duc la pierderea masei musculare scheletice în cazexia de cancer – pot fi traduse la om la pacienții cu rezultate din modele animale? BMC Cancer. 2016; 16 : 75. https://doi.org/10.1186/s12885-016-2121-8 .Articol gratuit PMC ] PubMed ]
38. Busquets S, Toledo M, Orpí M, Massa D, Porta M, Capdevila E, Padilla N, Frailis V, López-Soriano FJ, Han HQ, Argilés JM. Blocarea miostatinei utilizând antagonismul actRIIB la șoareci purtători ai carcinomului pulmonar Lewis are ca rezultat îmbunătățirea pierderii musculare și a performanței fizice. J Cachexia Sarcopenie Muscle. 2012; 3 : 37-43. Articol gratuit PMC ] PubMed ]
39. Yae S, Takahashi F, Yae T, Yamaguchi T, Tsukada R, Koike K, Minakata K, Murakami A, Nurwidya F, Kato M, Tamada M, Yoshikawa M, Kobayashi H, et al. Hochuekkito (TJ-41), o formulă kampo, ameliorează cașexia indusă de adenocarcinomul de colon 26 la șoareci. Comportament bazat pe evidente Alternat Med. 2012; 2012 : 976926. https://doi.org/10.1155/2012/976926 . Articol gratuit PMC ]PubMed ]
40. Iizuka N, Hazama S, Yoshimura K, Yoshino S, Tangoku A, Miyamoto K, Okita K, Oka M. Efectele anticachectice ale plantei naturale Coptidis rhizoma și berberină asupra șoarecilor care suferă de adenocarcinom de colon 26 / clona 20. Int J Cancer. 2002; 99 : 286-91. https://doi.org/10.1002/ijc.10338 . PubMed ]
41. Kim A, Im M, Ma JY. Sosihotang ameliorează simptomele cachexiarelate la șoarecii care suferă de adenocarcinomul de colon 26 prin reducerea inflamației sistemice și a pierderii musculare. Oncol Rep.2016; 35 : 1841-50. https://doi.org/10.3892/or.2015.4527 . PubMed ]
42. Zhang Y, Wang S, Li Y, Xiao Z, Hu Z, Zhang J. Sophocarpina și matrina inhibă producerea de TNF-alfa și IL-6 în macrofagele murine și previne simptomele legate de cașexie induse de adenocarcinomul colon26 la șoareci. Int Immunopharmacol. 2008; 8 : 1767-72. https://doi.org/10.1016/j.intimp.2008.08.008. PubMed ]
43. Barreto R, Waning DL, Gao H, Liu Y, Zimmers TA, Bonetto A. Cachexia cauzată de chimioterapie este asociată cu epuizarea mitocondrială și activarea MAPK-urilor ERK1 / 2 și p38. Oncotarget. 2016; 7 : 43442-60. https://doi.org/10.18632/oncotarget.9779 . Articol gratuit PMC ] PubMed ]
44. Chen JA, Splenser A, Guillory B, Luo J, Mendiratta M, Belinova B, Halder T, Zhang G, Li YP, Garcia JM. Ghrelin previne pierderea musculară indusă de tumori și cisplatină: caracterizarea mecanismelor multiple implicate. J Cachexia Sarcopenie Muscle. 2015; 6 : 132-43. https://doi.org/10.1002/jcsm.12023 . Articol gratuit PMC ] PubMed ]

Articolele de la Oncotarget sunt oferite aici prin amabilitatea Impact Journals, LLC

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5893240/